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大咖云集中山检验 规范质谱临床应用

2018-04-26 分析测试百科网 分析测试百科网

——复旦大学附属中山医院液相色谱-质谱技术临床应用培训班举办

分析测试百科网讯 2018年4月25日,由复旦大学附属中山医院检验科主办、国家级I类继续教育学习班——“液相色谱-质谱技术临床应用培训班”在复旦大学附属中山医院独山厅举办。本次活动围绕LC-MS/MS技术在我国临床检验领域的应用,邀请了国内外著名专家教授,向学员们讲授了液相色谱-质谱检测技术的基本理论、平台建设、研发与验证、质量管理、临床应用、常用检测项目和相关解决方案等方面的知识,共吸引140多位来自国内各大医院的检验技术人员和相关单位的工作人员参加。

复旦大学附属中山医院检验科主任 潘柏申教授

复旦大学附属中山医院检验科副主任 郭玮教授

会议伊始,复旦大学附属中山医院检验科主任潘柏申教授致欢迎辞,向参会学员介绍了本次培训会的协办单位,包括复旦大学生物医学研究院,美国临床化学学会(AACC)质谱委员会,Mass Spectrometry Applications to the Clinical Lab,上海市医学会检验医学分会质谱学组,中国医药教育协会检验医学专业委员会和上海市生物医学工程学会检验医学专业委员会。

液相色谱-质谱技术临床应用培训班

本次培训班协办方、纽约州罗彻斯特大学临床质谱实验室主任,病理和临床医学系副教授,美国临床化学学会(AACC)质谱委员会主席张岩教授带来视频致辞。

张岩教授在致辞中说道:“复旦大学附属中山医院检验科主办的液相色谱-质谱技术临床应用培训班至今已连续举办了三届,让近400位参与者受益。推广临床质谱检测应用的主要挑战之一在于培训和教育,因此中山医院的培训班也是在中国推动临床质谱检测诊断应用的一大步。尽管临床质量标准在美国有着多年的历史,仍然有很多进一步发展的机会。我非常热衷于加强这一强大平台的临床应用,以满足患者的需求。中山医院检验科致力于引进新型技术,将其用于开发迎合临床诊疗所迫切需求的检测项目。

他们于2011年建立了液相色谱串联质谱技术平台,并成功开发了内分泌激素检测及治疗药物监测手段,如血浆甲氧基肾上腺素、尿儿茶酚胺、25羟基维生素D、醛固酮、肾素活性、类固醇等激素检测项目,为临床诊疗决策提供了准确的实验室结果。所以他们在这一领域已经积累了不少经验,公然无私地向所有听众分享他们的第一手经验,举办培训班为学员们提供了直面专家的宝贵学习机会,还能有机会认识参与此计划发展的人员。我相信这个项目将激励越来越多的中国人,参与临床质谱的进一步发展。我相信通过大家的共同努力,我们将在中国临床质谱和临床诊断方面拥有非常光明的未来,更好地辅助疾病诊疗。”

复旦大学附属中山医院检验科主任潘柏申教授、复旦大学化学系丁传凡教授、克利夫兰医疗中心临床生化主任及医学总监王思合教授共同带来以“液相色谱-质谱检测技术的基本理论”为主题的培训内容,全程由复旦大学附属中山医院检验科副主任郭玮教授主持。

复旦大学附属中山医院检验科主任潘柏申教授带来题为《迎接质谱技术进入医学检验领域》的精彩报告,向学员们介绍了质谱分析技术的发展历史,质谱分析技术的优势,质谱技术临床应用国内现状和未来发展等。

质谱技术包括有机物检测(气相色谱-质谱联用仪、液相色谱-质谱联用仪、基质辅助激光解吸飞行时间质谱仪、傅里叶变换质谱仪)和无机物检测。基质辅助激光解吸飞行时间质谱仪可用于检测多肽、蛋白质、多糖、核苷酸、糖蛋白、高聚物以及多种合成聚合物,可获得丰富的结构或序列信息;具有高灵敏度、高准确度、高分辨率、质量范围广、速度快、制样简便等优势;可用于分子量测定、肽质量指纹谱、源后衰变技术测序、寡核苷酸分析等。

质谱技术的临床应用包括蛋白组学与新标志物筛查,激素检测与内分泌疾病诊断,治疗药物浓度监测,毒物与违禁药物检测,氨基酸检测与遗传代谢病诊断,病原微生物快速鉴定,参与检测方法建立与标准化等。

复旦大学化学系教授 丁传凡

复旦大学化学系教授丁传凡带来题为《LC-MS/MS的基本原理和结构》的精彩报告,包括LC-MS/MS 的基本原理和质谱仪器的结构与原理。

LC由流动相和固定相组成,是溶于流动相中的各组分经过固定相时,由于与固定相发生作用(吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和)的大小、强弱不同,在固定相中滞留时间不同,从而先后从固定相中流出。

报告指出,GC-MS是适宜分析小分子、热稳定性好、能气化的化合物。一般用电子轰击方法(EI)电离产生样品离子,可与标准谱库对比。LC-MS主要用于难挥发性化合物,极性化合物,热不稳定化合物的分析测定,特别是大分子量化合物(包括蛋白、多肽、多聚物等)的分析测定。

质谱仪器中有几种用于串级质谱分析的质谱仪器,包括三重四级质谱,四极-飞行时间质谱,FT-ICR MS和Orbitrap MS。其中,FT-ICR MS是利用不同质荷比的离子在一稳定磁场中的回旋运动所产生的与质荷比对应的映像电流推断其离子种类。

克利夫兰医疗中心临床生化主任及医学总监 王思合教授

克利夫兰医疗中心临床生化主任及医学总监王思合教授为学员们带来了题为《临床质谱检测的人员与设备要求》的精彩报告。

美国临床实验室改进修正案(CLIA),该条例对以诊断、预防或疾病治疗、健康评估为目的的人血、体液及组织样品实验室检测确立相应质量标准。现行CLIA’88条例于1992年首次公布,1994年开始实行,并于1993年、1995年、2003年先后经修订。美国医疗保险和医疗补助服务中心(CMS)签发了“标准和认证:实验室要求”以实施国会通过的CLIA法规。

报告介绍了条例中要求的临床实验室中实验室主任、技术主管、临床顾问、行政主管、检测人员、技术人员的资格与职责以及对设备的要求。CLIA’88条例主要管辖对人员有特殊要求的临床实验室,临床质谱实验室中的工作人员需经过特殊教育及培训,满足质谱设备所需的特殊要求以确保检测质量及员工安全。

会议间隙,液相色谱-质谱技术临床应用培训班演讲嘉宾与参会学员举行了合影。

液相色谱-质谱技术临床应用培训班合影

下午的培训班以“液相色谱-质谱检测技术的平台建设”为主题的培训内容中,中国科学院生物物理研究所研究员李岩教授、美国宾夕法尼亚州立大学Hershey医学中心实验室负责人朱玉胜教授、复旦大学生物医学研究院生物质谱分析高级工程师晏国全、克利夫兰医疗中心临床生化主任及医学总监王思合分别带来精彩报告。

中国科学院生物物理研究所研究员 李岩教授

中国科学院生物物理研究所研究员/教授李岩为学员们带来了题为《代谢产物检测方法学建立的基本原理与步骤》的精彩报告,包括分子组学,代谢产物检测和代谢产物质谱方法建立三个方面。

常见的代谢产物检测方法包括化学反应(氧化还原反应),酶反应(酶反应产物或底物),电化学反应(检测电导等),光谱分析(检测物质发光波长)和质谱分析(检测物质质量)等。代谢产物质谱检测不受生化免疫反应限制,具有高特异性,高灵敏度,多检测指标等优点。代谢产物质谱分析流程包括大分子去除,小分子富集,分离和质谱分析,需要考虑样品进样、离子源、离子模式和质谱调谐等因素。

美国宾夕法尼亚州立大学Hershey医学中心实验室负责人 朱玉胜教授

美国宾夕法尼亚州立大学Hershey医学中心实验室负责人/教授朱玉胜为学员们带来了题为《液相色谱串联质谱技术(LC-MS/MS)基本操作》的精彩报告,介绍了标本制备,标本检测(校准、内标、计算、质控)和结果报告。

标本制备与萃取是尽可能多地消除干扰,同时最大化地回收分析物。常规的萃取技术包括稀释进样、蛋白沉淀、液液萃取(LLE)、固相萃取(SPE)。稀释进样常用于尿液、唾液与脑脊液;蛋白沉淀多用于相对高丰度蛋白样品的萃取以进行LC-MS定量检测;液液萃取是基于同一物质在两种互不相容的溶剂中具有不同的溶解度;固相萃取采用固相吸附剂(常包含于萃取柱内)于检测前纯化或浓缩样品成分。

复旦大学生物医学研究院生物质谱分析高级工程师 晏国全

复旦大学生物医学研究院生物质谱分析高级工程师晏国全为学员们带来了题为《LC-MS/MS常见故障的原因分析与处理》的精彩报告,通过实际案例分析直观地表述在实际操作中遇到的故障及原因分析。

LC-MS/MS的常见故障包括液相色谱中的硬件故障/色谱柱问题/连接管路等,离子源的喷雾稳定性/硬件故障,质谱系统中的硬件故障/谱图污染峰/灵敏度等。例如,液相色谱的压力太高可能是由于色谱柱入口塞子污染、排液阀塞子污染、色谱柱污染、毛细管堵塞特别是进样针底座毛细管、进样阀转子堵塞、进样针或针底座堵塞等;压力太低可能是溶剂入口滤头堵塞、链接毛细管或其他部位泄露、错误的溶剂或流速、主动入口阀损坏、多通道梯度阀比例不正确、出口球形阀损坏、色谱柱损坏等;压力波动可能是由于溶剂入口滤头堵塞、溶剂没有脱气、泵密封圈泄露、出口球形阀损坏、主动入口阀损坏。

本次液相色谱-质谱技术临床应用培训班的举办还受到了多家临床检测与仪器厂商的全力支持与倾情赞助,以下是部分参展企业。

沃特世

SCIEX

Thermo Fisher

华大基因

迪安诊断

PEAK

金域检测

可力梅塔

CIL

英盛生物

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