脉络膜γδ T细胞对视网膜色素上皮和视网膜损伤的保护作用

 

Choroidal γδ T cells in protection against retinal pigment epithelium and retinal injury

发表期刊： FASEB Journal

影响因子： 5.498

发表单位： 德克萨斯大学医学部

技术手段： RNA-seq（联川提供）

下游实验： 小鼠眼底体内检查，组织病理学和免疫荧光染色，视网膜或RPE /脉络膜组织分离的RNA的qRT-PCR分析，过继γδ T细胞转移，流式细胞分析眼后段淋巴细胞，脉络膜/巩膜间接免疫荧光染色

 

研究背景

皮肤，肺，肠和生殖道的上皮屏障是先天免疫系统的一部分。上皮附近的组织相关T细胞是遇到病原体并在免疫监视中起主要作用的第一道防线的一部分。这些细胞大部分是γδ T细胞，其具有组织特异性和非常规功能。γδ T细胞缺乏与上皮或粘膜组织对损伤的易感性增加有关，并加重了自身免疫反应。视网膜色素上皮细胞（RPE）是神经感觉视网膜和脉络膜之间的血液-视网膜屏障的一部分。脉络膜中的γδ T细胞尚未得到很好的表征，但可能在其他器官中共享上皮内淋巴细胞（IELs）的一些不同特性。

RPE以许多方式控制眼后段的免疫反应，如产生细胞因子和补体蛋白，并与T淋巴细胞，巨噬细胞和小胶质细胞相互作用。RPE的变性涉及免疫应答的失调，包括年龄相关性黄斑变性（AMD）和视网膜色素变性。尽管已经进行了广泛的研究来证明活化的免疫细胞和补体蛋白如何促进外部视网膜中的炎症和血管生成反应，但尚未确定脉络膜的先天免疫细胞是否可以对RPE损伤发挥保护作用。

研究方法

本研究基于以前慢性RPE退化模型研究中鉴定的可产生IL-17的脉络膜γδ T细胞，进一步确定脉络膜γδ T细胞的功能，并探索控制RPE损伤遗传和化学毒性模型的性质的潜在机制。

材料：

T细胞受体（TCR）δ链敲除小鼠（Tcrd^tm1Mom）

AhR敲除小鼠（Ahr^tm1.2Arte）

所有小鼠在12小时光照/黑暗条件下饲养并随意喂食。根据不同实验需求对小鼠进行不同处理后进行研究。

研究发现

研究数据表明脉络膜γδ T细胞通过响应NaIO₃处理的RPE损伤而被激活，并且它们表达编码免疫抑制性细胞因子如IL-4和IL-10的基因。对γδ T细胞缺陷小鼠施用对野生型小鼠影响最小的NaIO₃剂量，发现γδ T细胞缺陷小鼠发生深度RPE和视网膜损伤，并且过继转移γδ T细胞后防止致敏。玻璃体内注射IL-4和IL-10改善了NaIO₃诱导的RPE毒性。γδ T细胞与RPE外植体的体外共培养通过芳基烃受体（AhR）依赖性机制激活抗炎细胞因子的产生。AhR缺陷在过继转移后废除了γδ T细胞的保护作用。

本研究结果表明，RPE损伤引发了保护性脉络膜γδ T细胞的扩张和激活。RPE通过依赖于芳香烃受体（AhRs）的机制调节γδ T细胞的功能并促进其产生免疫抑制性细胞因子。这些发现定义了脉络膜γδ T细胞在维持外部视网膜组织稳态中的重要作用。

图 RPE以AhR依赖方式促进γδ T细胞的抑制表型

A）用RPE外植体共培养的脾脏γδ T细胞的示意图。

B）在与RPE外植体共培养16小时后，检测野生型或AhR2/2小鼠γδ T细胞中细胞因子基因的表达。

C）注射NaIO₃小鼠的RPE flat mounts，其中玻璃体内递送IL-4和IL-10混合物或载体对照。RPE病变用黄线标注。通过离子钙接头分子1染色测量视网膜下小胶质细胞浸润（n = 6）。

参考文献

Zhao Z, Liang Y, Liu Y, et al. Choroidal γδ T cells in protection against retinal pigment epithelium and retinal injury[J]. Faseb Journal Official Publication of the Federation of American Societies for Experimental Biology, 2017, 31(11):4903.

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