仪器课堂┃UV-Vis紫外可见分光光度法
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一、紫外可见分光光度计原理
定义:紫外-可见分光光度法是在190~800nm波长范围内测定物质的吸光度,用于鉴别、杂质检查和定量测定的方法。
当光穿过被测物质溶液时,物质对光的吸收程度随光的波长不同而变化。因此,通过测定物质在不同波长处的吸光度,并绘制其吸光度与波长的关系图即得被测物质的吸收光谱。从吸收光谱中,可以确定最大吸收波长λmax和最小吸收波长λmin。物质的吸收光谱具有与其结构相关的特征性。
用于定量时,在最大吸收波长处测量一定浓度样品溶液的吸光度,并与一定浓度的对照溶液的吸光度进行比较或采用吸收系数法求算出样品溶液的浓度。
二、UV-2700的仪器结构图
仪器结构:光源,单色器,试样容器,检测器,(显示屏),软件。
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UV-2700的仪器示意图
三、紫外可见分光光度计的关键参数
3.1 分析波长
3.2 光谱带宽
3.3 杂散光
3.4 吸光度范围
3.5 基线平坦度
3.6 噪音
杂散光对分析结果的影响:
杂散光是紫外可见分光光度计非常重要的关键技术指标。它是紫外可见分光光度计分析误差的主要来源,它直接限制被分析测试样品浓度的上限。当一台紫外可见分光光度计的杂散光一定时,被分析的试样浓度越大,其分析误差就越大。ASTM认为:“杂散光可能是光谱测量中主要误差的来源。尤其对高浓度的分析测试时,杂散光更加重要”。有文献报道,在紫外可见光区的吸收光谱分析中,若仪器有1%的杂散光,则对A为2.0的样品测试时,会引起2%的分析误差。
不同光谱带宽对吸收光谱的影响:
UV-2600/UV-2700的性能
四、扩展应用
五、仪器操作演示视频--UV-1800
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六、应用案例-UV-2600应用案例-硝酸盐氮检测-紫外分光光度法
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