解药 | 新冠核酸检测有多少假阴性？准确诊断是当务之急
目前使用的核酸检测确诊新型冠状病毒感染的肺炎，被披露出存在相当比例“假阴性”的检测结果。这意味着，每日攀升的确诊病例数之外，或有大量的新冠肺炎病患未被计入。图片来自财新记者 丁刚
临床反映假阴性比例高，湖北境内新增临床诊断病例这一确诊分型，特指疑似病例具有肺炎影像学特征者，准确识别感染者不能再拖延
新冠肺炎疫情肆虐，如何准确识别病人至关重要。目前使用的核酸检测确诊新型冠状病毒感染的肺炎，被披露出存在相当比例“假阴性”的检测结果。这意味着，每日攀升的确诊病例数之外，或有大量的新冠肺炎病患未被计入。
据财新记者了解，早期已有大量新冠肺炎患者，因无法进行确诊最后一道核酸检测，造成了实际确诊病例数量缓慢“爬坡”，对疫情判断、公众知情造成干扰。
此次疫情中，病毒核酸检测与基因测序，是官方推荐的两项确诊新冠肺炎病人的依据。只要符合核酸检测阳性，或者基因测序与已知的新冠病毒高度同源任意一条，就能将疑似确诊。基因测序价格昂贵，且许多医院不能独立检测，核酸检测运用更广泛。
新冠肺炎核酸检测要配套依据基因序列研发的试剂盒使用。在湖北疫情不断发酵中，前期决策限制医院检测权限，其后，试剂盒供应不畅，以及检测门槛等制肘，试剂盒的使用效率备受诟病。
核酸检测准确性也遭到了质疑。大量的病患未能得到核酸“阳性”确诊，即使流行病学史、临床症状吻合，甚至CT显示肺部病毒感染。危重症医学专家、中国医学科学院院长王辰院士2月5日接受央视采访时表示， “这个病有个特点，并不是所有患病者都能检测出核酸阳性。”王辰说，“对于真是这个病的病人，也不过只有30%-50%的阳性率。通过（采集疑似病患）咽拭子的办法，还是有很多假阴性的。核酸没有发现，但是实际上是的。”
此前，武汉大学中南医院影像科副主任张笑春等专家曾呼吁，采用CT影像作为此次新冠肺炎主要诊断依据，及时收治、及时隔离高度疑似病患，“目前武汉市家庭聚集性发病越来越多，而且大多起病隐匿，一次甚至多次核酸阴性，无任何临床症状，如采取家居留观的方式，必然造成疫情进一步蔓延。”张笑春说。
回应湖北省内疫情防控需求和一线医生呼吁，国家卫健委2月4日最新发布的第五版新冠肺炎诊疗方案中，针对湖北省内肺炎确诊增设“临床诊断病例”作为一个新的分型，特指疑似病例具有肺炎影像学特征者。（详见财新网报道“解读|新冠疑似诊断标准再放宽 湖北省内仅需两项临床表现”）
截至2月6日，全国仍有26359个疑似病人，累计确诊31161人。近几日，湖北省每日新增疑似病例都在4000-5000例上下。疑似病例及时准确诊断，将对疫情控制起到重要作用。
临床反映核酸检测假阴性高
新冠病毒核酸检测主要通过实时荧光RT-PCR鉴定。该方法是根据目标核酸基因来设计引物实现靶标检测。其主要原理是，将荧光能量传递技术应用于 PCR 仪中，在PCR 的反应体系中加入荧光基团，利用获取的荧光信号积累来实时监测整个 PCR 进程，最终通过得到的标准曲线进行定量分析。PCR全称是Polymerase Chain Reaction，中文名指的是聚合酶链式反应。这种酶促化学反应，可以将试管中待测目标基因短时间内扩增几十万倍乃至上百万倍，由此降低基因诊断的门槛。卫健委下属疾控部门所出的新冠肺炎防控方案介绍，新冠病毒核酸测定（实时荧光RT-PCR方法）主要针对新冠病毒基因组中开放读码框1ab（open reading frame 1ab ，ORF1ab）和核壳蛋白（nucleocapsid protein，N）。
要确认一个病例为阳性，需要同一份标本中2个靶标（ORF1ab、N）特异性实时荧光RT-PCR检测结果均为阳性。如果只有单个靶标阳性，则需要重新采样，重新检测。
“有经验的医生都知道，核酸检测是有漏洞的。”一名武汉三甲医院影像科医生告诉财新记者，此前，由于医院床位不够，一些CT显示明显病毒性表现，测出来核酸是阴性的高度疑似病患，无法收治入院，“放了回去”，没有切断传播源，结果加剧家庭和社区间传播。
2月3日，一封“以胸部CT作为新冠肺炎主要诊断依据”的专家提议书递交至湖北省新冠病毒防控总指挥部。提议称，经临床工作发现，核酸试剂盒质量参差不齐，很多没有经过中试稳定性检测，加上污染问题，检测稳定可靠性尚存疑。
王辰表示，核酸检测能力在迅速提升，但依然不够，不同的企业、试剂之间，精准程度有差别。
部分声音指向当前上市获批的试剂盒均是通过国家药监局应急审批程序获批，上市前并未经过严格充分测试。据财新记者了解，疫情发生后，为快速解决试剂盒供应问题，国家药监局已批准多家企业试剂盒上市申请。
一名从事多年检测行业的人士称，试剂盒质量只是核酸检测的其中一个环节，从采样、基因提取到检测，以及技术人员水平等，哪个环节出了问题，目前还不好判断。他表示，国内分子生物学等技术水平在全球并不落后，如果各项操作正常，行业一般检测准确率应该在95%以上。
目前，咽拭子在口腔和鼻腔取样是最普遍的采样方式。“核酸检出率低，许多病例需要2-3次重复，”上述提议书表示，“很多病人咽拭子阴性，但肺细胞里有病毒；与此同时，目前等待核酸检测人数大大超过检测能力，仓促上阵得出的检测结果可靠性不高。”
2月6日 ，北京中日友好医院通报一名武汉来京发热肺炎患者确诊为新冠肺炎，该患者核酸检测几经周折才最终确诊。据了解，该患者入院前，三次咽拭子新冠病毒核酸检测均为阴性，甲流核酸检测阳性，因此于1月30日以“重症甲流”收入院。入院后插管上呼吸机，通过肺泡灌洗检测才发现新冠病毒核酸阳性。
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