细胞凋亡技术背景一:
在多细胞生物发育过程中,一些不需要的细胞会以一种自主的方式死亡并被机体清除,这个过程被称为程序性细胞死亡(programmed cell death)。
程序性细胞死亡多以细胞凋亡(apoptosis)的机制发生。除细胞凋亡外,细胞死亡还包括坏死(necrosis)和自噬性细胞死亡(autophagic cell death)等多种死亡形式。
在细胞坏死初期,胞质内线粒体和内质网肿胀、崩解,蛋白质颗粒增多,进而细胞质呈现强嗜酸性,经苏木精/伊红染色后胞质呈深伊红色,细胞质膜发生渗漏,DNA降解,细胞内容物释放到胞外,引起周围组织炎症反应。
早在20世纪60年代人们就已发现。当细胞在缺乏营养或发生应激反应时,可发生细胞自噬现象,细胞质中形成大量自噬泡,由双层膜包裹着待降解物质。随后,自噬泡与溶酶体融合,待降解物质经酶解后被细胞进一步利用。自噬在细胞的生长、发育和疾病发生中起着重要的作用。
近来的研究表明,在某些条件下,细胞自噬也能导致细胞死亡,相应地,细胞凋亡则被称为I型程序性细胞死亡。
凋亡细胞的基本特征主要包括:胞质凝缩,染色质聚集及边缘化,细胞核崩解,细胞以出芽的方式形成凋亡小体,并被邻近的巨噬细胞等吞噬消化。磷脂酰丝氨酸外翻。
凋亡过程中细胞内溶物不被释放,故不会引起炎症反应。④凋亡细胞中仍存在蛋白质的合成反应。⑤内切核酸酶被活化,导致染色质DNA在核小体连接处断裂,形成180~200bp整数倍的核酸片断,凝胶电泳图谱呈梯带状(DNA ladder)等。
注:
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