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细胞铺板标准化操作——实验外包
研究意义:细胞在培养瓶长成致密单层后,已基本上饱和,为使细胞能继续生长,同时也将细胞数量扩大,须进行传代再培养。传代铺板培养也是一种将细胞种保存下去的方法。同时也是利用培养细胞进行各种实验的必经过程。悬浮型细胞直接分瓶就可以,而贴壁细胞需经消化后才能分瓶。
细胞铺板
贴壁细胞:当细胞的融合度达到90%以上时,弃去培养液,PBS洗2次,加入胰蛋白酶消化3 min,加入含10%FBS的DMEM(RPMI-1640),将细胞吹打下来并吸取到10 mL离心管中,离心,弃上清,注意不要碰到管口,加入DMEM(RPMI-1640)完全培养基并接种到七个六孔板和96孔板中,置于37℃,5% CO2培养箱中继续培养,并在六孔板和96孔板上标明细胞名称及日期。
悬浮细胞:离心,弃上清液,加新鲜培养基,分装到六孔板或96孔板中。
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