【色谱学堂】色谱柱老化的 When?Why?How？

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经常有粉丝询问我们关于色谱柱老化的问题
今天，我们就专门做一期来回答大家这个问题

关于气相色谱柱的老化，有各种各样的说法
比如有设个缓慢的升温程序走一整晚的

也有忽高忽低走好几次循环的

也有些实验室就简单粗暴的直接升到高温下烘烤

那到底怎么做才能有好的效果呢？

首先，我们要定义一下，什么叫做老化

有两种情况，第一种情况，新的柱子
使用之前一般会先做老化
主要目的是去除键合不够稳定的固定相
让新柱子性能更稳定

另一种情况，是做了一天样品，怕柱子里有残留
也会说今晚要老化一下柱子，或说烘烤一下柱子

老化的重点是什么呢？

老化的第一个重点是温度
老化的最高温度
通常推荐设为方法最高设定温度和色谱柱耐受温度的中间值

比如，这个方法的最高温度是300度
色谱柱的耐受温度是325，就可以老化到310度

但要注意的是，不同的柱子耐受温度有很大差别
极性强、膜厚大的柱子通常耐受温度比较低

比如这根DB-wax 柱的恒温耐受温度只有250摄氏度
如果膜厚增加到0.5um
耐受温度还会进一步下降到240摄氏度

建议同学们老化之前
要仔细看一下色谱柱的包装盒或者说明书
因为超过温度上限使用色谱柱
对性能和寿命都影响很大

具体的老化程序，通常会缓慢升温至老化温度
比如2~5摄氏度/min，然后再继续老化2个小时  

老化失败最常见的原因是什么？

比纠结具体的升温速率更重要的事情
是绝对避免氧气的存在
这也是老化失败最常见原因

因为高温下的氧气是破坏化学键的好手
而色谱柱里的固定相一旦氧化
彼此间的键键链接会被破坏
固定相就不再能稳定“固定”在色谱柱里
造成大量柱流失，柱效也会大幅下降

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从避免氧气的角度，严格的老化需要注意以下几点：
第一，把色谱柱末端伸入溶剂中，观察是否有连续气泡
如果没有，要检查是否漏气，色谱柱断裂或者堵塞

第二，升温前，先通15min载气
置换掉色谱柱中可能存在的氧气

第三，确保其它接头，正确安装

要连检测器吗？

另外，从避免污染的角度来说
新柱子老化的时候，最好不要连接检测器
如果是FID检测器，可以不用点火，也不用开氢气和空气

去残留，该注意哪些呢？

如果是已经使用的柱子，怕有残留
希望通过高温老化去除污染物
有些实验室甚至每天都会在关机之前运行一针老化方法
但这种做法，其实是有一定风险的

因为这种污染，往往是沸点高的化合物，一般聚集在柱头
比如样品中的色素、蛋白质、胶状物等等
盲目的老化可能会促使污染物更快的向后转移
却不能完全排出色谱柱，反而会污染整根柱子

正确的做法应该是

先分析样品的成分和污染情况

如果是存在老化温度也不能完全气化的成分
比如色素、蛋白质、胶状物等
那在老化之前，

应当先进行色谱柱的维护

包括换衬管、色谱柱柱头切割

去除污染源再做老化，才是有意义的

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最后，我们回顾一下老化的要点

1、查看说明书，确定老化温度
2、检查仪器连接，确保无氧
3、最好不接检测器
4、必要时，先做进样口维护
5、缓慢升温至老化温度，保持2小时

同学们还有什么疑问，欢迎给我们留言！

来源： 色谱学堂

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