新冠病毒抗原检测试剂3大标记物对比，存在哪些差异

21日，国家医保局要求各省级医疗保障部门应根据《新型冠状病毒肺炎诊疗方案（试行第九版）》，及时调整优化医保相关政策。

 一是按程序将新冠病毒抗原检测试剂及相应检测项目临时性纳入本省份基本医保医疗服务项目目录。二是及时调整纳入医保支付范围的新冠治疗用药。

——来 源：央视财经

新冠抗原检测试剂可辅助评估新型冠状病毒感染状况和临床诊断，实现对疑似人群进行早期分流和快速管理，能较好地满足疫情防控即时检测、即时报告、及早发现的需求，有利于提高早发现能力，提高监测预警灵敏度，降低检测成本。

目前，市面上抗原检测产品基本采用免疫层析技术。类似妇女检测怀孕的验孕棒，是一种简易而快速的检测手段，无需要设备介入，居民在家就可以自行检测，分钟之间即可获得结果，今天我们就来解析解析什么是免疫层析？

免疫层析技术

免疫层析技术是在20世纪80年代初在发达国家兴起并被用于检测血清蛋白的一种结合了免疫技术和色谱层析技术的快速检测分析方法。

检测原理：在层析时，标记物与待测物的络合物被相应的配体捕获而浓集显色于硝酸纤维素膜上的检测线，以纤维膜上显色条带的有无、颜色深浅和反射光线来定性或定量检测结果。在即时检测（POCT）中应用极为广泛。

免疫层析试纸条一般由样品垫、结合垫、硝酸纤维素（NC）膜、检测线（T线）、质控线（C线）、吸水垫、聚苯乙烯（PS）底板等部分组成。

（图片来源网络）

根据待检测物的大小和抗原抗体结合的方式，分为双抗体夹心法、竞争法、间接法。双抗体夹心法：主要检测多抗原位点的生物大分子；竞争法：主要检测半抗原、即不具备免疫原性的小分子化合物（如药物、毒素、糖类等）；间接法：主要用于血清中抗体检测，纯化或者重组的抗原固定于NC膜上，标记大多为蛋白A，如人狂犬病毒IgG检测等。

根据标记物质的不同又可分为：有色测流层析、荧光测流层析、磁信号测流层析等。其中对应的不同特性的标记物大概有：有色纳米颗粒（乳胶微球、胶体金、胶体碳、胶体硒）、荧光纳米颗粒（时间分辨荧光、荧光微球、量子点、上转换磷光）、磁性纳米颗粒、脂质体、稀土纳米材料等。

下面，我们重点来讲一讲在获证的新冠抗原检测试剂中，胶体金、乳胶微球、荧光微球这3种标记物分别有什么区别。

三大标记物的区别

01

胶体金

胶体金即胶体纳米金，是由氯金酸(HAuCl4)在还原剂（如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等）作用下，聚合成一定大小的金颗粒，在静电的作用下成为稳定的胶体状态，形成带负电的疏水胶溶液。胶体金标记主要包括三种作用力，即静电作用、疏水作用及金硫键。胶体金在弱碱环境下带负电荷，可与蛋白质分子的正电荷基团形成牢固的结合。由于这种结合是静电结合，所以不影响蛋白质的生物特性。

02

乳胶微球

乳胶法是以彩色乳胶微球作为载体的间接凝集试验。吸附可溶性抗原在其表面，特异性抗体与之结合后，产生凝集反应。目前，常用的免疫层析用彩色微球多为采用内部包埋法制备而得，染料处于微球内部，不易泄露，有比较稳定的形态结构。

用于免疫层析产品中的彩色乳胶微球的粒径比胶体金颗粒大（彩色乳胶微球粒径在200nm-400nm，胶体金粒径在20-40nm），相对灵敏度更高。

乳胶微球的颜色鲜艳，并且能够包被氨基、羧基、硫基等多种官能团，因此，既可以通过化学反应形成共价键的形式偶联抗体也可以通过吸附的方式偶联抗体（胶体金仅可通过吸附的方式偶联抗体）。对于含有多个硫原子类的分子，用乳胶微球的标记效果更好。

胶体金法和乳胶法的操作流程基本类似，以双抗夹心法为例：

双抗夹心法演示（图片来源网络）

03

荧光微球

荧光微球是指将荧光物质，比如荧光素，通过物理和化学等方法标记在粒子的表面或包埋在微球内部，一般为球形，直径在纳米到微米之间，受到激发光的激发可发出肉眼可见的荧光。

荧光微球形状和大小相对稳定，粒径均匀、单分散性好、发光效率高、重复性好，与生物体之间相互作用后产生的各种反应好，吸附性强、比表面积大、表面反应能力强和凝集作用大等。基本不受外界环境的影响，荧光物质的光学稳定性较好，需要通过免疫荧光分析仪读取荧光强度大小。荧光微球发射出来的荧光信号持续强而稳定，易于用仪器检测其荧光信号。

荧光免疫层析就是利用荧光微球表面修饰的功能基团（如羧基）与抗原或抗体等共价结合，通过荧光物质发出稳定而强的荧光信号从而进行定量检测。

（图片来源网络）

总体来说，这3种免疫层析的标记物各有千秋。胶体金法和乳胶法的特点在于不需使用特殊仪器，肉眼即可判断，并且操作简便、检测时间短，其中乳胶法的显色能力更强，结果显示更直观。荧光免疫层析法相较于胶体金法、乳胶法而言灵敏度更高，但在使用的时候均需要配套的荧光检测器，目前没有居家使用型，仪器价格高。另外，荧光微球的成本较之于胶体金、乳胶高，可及性偏差。

在新一轮的新冠疫情之下，新冠抗原检测试剂的上市无疑大大方便了居民检测，缩短了检测时间，有利于提高早发现能力，并且新冠抗原检测的成本比核酸检测低。“抗原筛查+核酸诊断”的模式推广，针对不同场景、不同适用人群，各自发挥作用，进一步优化新冠病毒检测策略，服务疫情防控需求。

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