一句话知晓实验方法怎么选？WB、SPR、ELISA…

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作者：解螺旋.麦子

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导语

在分子生物学实验室里的玩法，无非就是用某种特定的刺激物（如细胞活素）去刺激一些细胞或组织，让它们high起来，然后分析细胞对这些外源刺激物的反应，检测细胞内哪条信号通路被激活或失活，或者什么蛋白被分泌出来。这里面就有很多种方法，哪种最合适，关键看你要检测这个反应的哪个方面的特性。

WB

建立蛋白质的个人档案

一个典型的免疫印迹实验（Western Blot，WB）可检测信号通路中某种蛋白质的特性、表达和分布，分析容量大、敏感度高、特异性强。

但至于蛋白-蛋白相互作用则要用另一种更复杂的方法，即免疫共沉淀法（Co-immunoprecipitation，Co-IP），它接近细胞内的生理情况，是以成为经典方法。

WB影视，实验做累了可以用

SPR

想知道Ta和Ta能有多亲密？

表面等离子共振（Surface Plasmon Resonance，SPR）除了研究蛋白-蛋白相互作用（例如受体-配体相互作用），还有可研究小分子-蛋白或细胞-蛋白的相互作用。这种方法不需要标记蛋白（荧光标记或同位素标记），还可以实时定量分析这些相互作用的亲和力、热力学、动力学特性。SPR是分析动力学和亲和力的金标准。

SPR咖啡，熬夜读文献的时候用

EMSA

蛋白瞄着核酸，我们又瞄着那些蛋白

电泳迁移率实验（Electrophoretic Mobility Shift Assay，EMSA）最初用于检测DNA结合蛋白与相应的DNA序列结合的情况，可做定性和定量分析，包括细胞核中的转录因子（如NF-kB ）的活性等等，现在也常用于研究RNA结合蛋白和相应的RNA序列相互作用。

这些分析用酶联免疫吸附实验（EenzymeLinked ImmunosorbentAssay，ELISA）也可以做，原理差不多。

EMSA，德国家居品牌，休息区的椅子可以吗？

PCR

把小树养大才能更好地招风

转录因子激活并和靶基因结合之后，该基因就被激活。PCR（Polymerase Chain Reaction）或Real Time PCR可以把特定的DNA序列大幅扩增，便于检测活性基因的表达情况。

PCR，用途很广啊

ELISA

追踪到天涯海角！

如果要看看细胞外如何，比如细胞培养上清液或体液中的某种蛋白质分泌情况，则通常选用ELISA，从而获知相应基因的活性。

艺人ELISA，在实验室放放她的歌吧……

参考资料：

http://bitesizebio.com/19759/western-blot-elisa-or-pcr-which-technique-should-i-use/

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