干货 | 一个过来人倾力推荐的14个实验心得(文末有福利）
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作者：解螺旋.子非鱼
转载请注明来源：解螺旋，医生科研助手
正所谓细节决定成败。很多时候，大多数实验的失败就在于对细节的忽略。小鱼以自己多年的实验经历，总结了14个心得，在小鱼的实验生涯里获益颇多，今天就贡献给大家，不用谢，小鱼嘛，不仅授人以渔，也要会授人以鱼，文末有福利赠送哦。
01
Protocol里有文章
实验前，一定先认真读Protocol。Protocol是前人针对该实验的经验总结的规范化流程，通过Protocol可以了解该实验的基本原理和大致流程，重点关注Protocol的关键步骤（可以用笔将其标示出来），做到心中有数。最好能做一份详尽的实验流程，贴在实验台前，特别注意的地方特别标注，可以随时参照。
其次检查该实验所需要的试剂是否齐全、所使用的仪器在实验室里是否具备及该仪器是否能够正常工作。如果试剂有缺乏，应及时订购或者依据实验原理寻找可替换的试剂，如此才可避免实验被迫中途停止的窘境。
总之，万事不打无准备之仗，在实验中只有做好万全的准备，才有可能获得成功女神的青睐。
02
设置尽量多和全的对照组（control）
没有对照组的实验，就得不到有效的实验结果。一个好的对照组（Control）既可以提高实验摸索的效率，且能够有助于找到实验失败的原因。其中最基本的Control包括阳性对照（Positive control）和阴性对照（Negative control）。前者既可以排除实验员个体的差异，也可以排除实验环境的差异；后者则可以评估假阳性的可能性与影响大小。
因此，无论Control结果如何，它都使得我们每一次实验都在知识结构上是“进步”的，可以提高下次实验的成功率和效率。
03
重质轻价格，试剂需分装
对于实验试剂而言，质量永远是第一位的，之后才是价格问题。有些试剂也许便宜，但因缺少质量控制（QC）环节，会导致不同批次产品之间性能的不稳定性，进而导致实验结果的不稳定性（这对于辛苦做实验需要发文章的研究人员来说是种灾难性的打击）。因此购买试剂时，最好去正规品牌的生物科技公司去订购（如生工、优宁维）。
谚语说：不要把所有的鸡蛋都放在同一篮子里。同样，在做实验时，也不要把所有试剂都放到同一个容器里。比如酶试剂、溶解肽等，均是价贵量少热不稳定的试剂，那为了避免出现反复冻融变质、污染、和与别人混用等问题，可将试剂分装成若干份。同时在最初分装时一定要注意将试剂全部溶解且充分混匀，可避免解冻时每管的浓度不均一。
04
实验流程中设置关键的检查点
实验检查点可以减少实验误差，在实验检查点没有通过之前不要进行后续的实验，除非你对通过该检查点非常有信心，否则不要着急。要知道心急吃不了热豆腐，不顾结果的赶进度经常会使实验变得更慢。
05
做好实验标记，按顺序加样
做大批量实验时，事先在实验记录本上写好样品全称和对应编号。因为如果加样时是按照字母或数字顺序加样的话，就可以很清楚加样是加到哪一管了。加大批量的样品时，先把要加的试剂写在纸上，按照从上至下，从左至右的顺序加样。对于同一试剂，加一个试管时就该试管往左、右或上、下移动一格。电泳时，不同泳道顺序为Marker、Control、实验组。多个Marker或Control时，再按照字母或数字顺序排列。收集样品时，可先按照时间顺序，后字母、数字顺序排列样品。
而编号中除了1、2、3...（可以的话，尽量避免同时使用1和7，或者在7的中间加一横），A、B、C...，a、b、c... 还有①② ③...，一、二、三...，α、β、γ...等，大家可形成自己独特的标记规则，以避免和他人的样品弄混。同样的标记日期时，yy/mm/dd或mm/dd/yy或dd/mm/yy，任选其一后请固定你习惯的标记方法。
06
大批量加样时，按枪头的排列顺序使用枪头
人的注意力集中时间总是因人而异。当在处理大批量加样品的实验中你不小心走神时，不要慌张，你可通过枪头盒上的枪头排布即枪头的使用量来判断样品加到第几个了，不至于少加、多加、或者错加，节省时间。
07
实验试剂用前需要混匀
实验对很多试剂的用量都有明确要求，要确保实验的成功和可重复性，必须保证试剂用量一致。试剂用量=体积×浓度，如果试剂浓度不混匀的话，浓度就会不同，即使加样的体积一样，实际的量也可能不一样。所以，一定要保证试剂是充分混匀的，结冰的试剂必须完全溶解才可以使用。容易沉淀的试剂，使用之前必须在漩涡振荡器（vortex）混匀后才能使用。
08
并行两三个实验，充分利用实验间隙
此技巧的应用前提，是你对并行的实验十分得心应手，要了解到每个实验中的哪一步是对时间比较敏感的，哪一步需要等时间的。比如在等转化的时候顺手配个培养基，跑胶过程中去画个平板等等，整体来看还是很节约时间的。这时可以使用多个计时器，为了避免搞错timer，可在每一个timer上贴上标签。
09
移液枪的注意事项
Tip头吸完后马上从移液器上取下来，以免忙乱的时候又以同一tip头吸取另一种试剂。使用移液枪时，务必注意要轻轻吸液，防止液体被吸到枪里面，造成移液枪的腐蚀和后续实验的污染。当tip头里还有液体时，移液枪不要倒过来。移液枪使用完之后，要归到最大计量的位置，防止久而久之弹簧失去弹性。
10
实验中注意力要集中，也要注意协同合作
实验中要集中精神、不要与人海聊，以免加错样或造成实验污染。因此做实验时不要想其他事情，想其他事情的时候不要做实验。有时实验中所需要使用的仪器，可能也其他人实验者着急要用，这时需要学会谦让，因为你在让别人的同时，也在给自己争机会。做完实验后，清理实验台，将药品、仪器归位，方便自己也方便大家。
11
实验数据一定要及时记录、分析处理
俗话说的好，好记性不如烂笔头。人的记忆力有限，实验结束后，一定要及时做好实验记录。因为实验记录不仅是对实验步骤、试剂、数据的真实客观的记录，也是一份能保证你的知识产权不被侵犯的法律文档，同时也是你留给实验室的“科研财富”，也许你学术影响力就从这份实验记录上开始扩展的。因此，实验数据应及时的进行分析整理，如果做不到当天整理，最起码每周整理。
12
实验记录一定要详细整洁
实验中往往一个很小的细节就是决定实验成功与否的关键所在。如果没有对细节进行详细的记录，实验一旦出了问题就很难找到原因。如实验中容易失效的试剂，一定要表明试剂名称、配置时间、试剂有效期、配置者及其他必要信息。实验记录要保持整洁，如果过于潦草，那么在需要寻找相关信息时候就难以找到。
13
一定要将实验数据进行及时备份
《At the bench》的作者曾说，如果实验室发生了起火等危急情况，首先应该抢救的不是试剂，而是实验记录。因为有了实验记录才可以完成论文。因此，为了防止发生实验记录丢失的情况，将整理好的实验记录扫描为PDF文档以备份。对于重要的研究数据，最好整理成电子文档例如Excel或Word文档，且最好养成对自己的电脑文件定期备份的习惯。此外，质粒、转化的细菌、珍贵的细胞株等也需要备份。最好备两份以降低丢失的概率。
14
实验首先要靠自己，但也要注意沟通
千万不要埋头苦干、闭门造车。多利用PPT的形式来向导师和同事展示你的科研成果，因为也许在他们的点拨下，你在实验中所遇到一些问题很容易就可以迎刃而解。
小鱼说了，要授鱼的，小鱼精心整理的常用实验Protocol献给大家，回复关键字“P”可获取，心疼小鱼辛苦的，帮转发下呗。
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