6 招教你选择正确的 ELISA 试剂盒 | ELISA 那些事儿
ELISA 试剂盒厂家琳琅满目，质量良莠不齐。这可难坏了「选择困难症」患者，如何浪里淘金，选择既符合研究需求，又品质上乘的 ELISA 试剂盒呢？只需 6 招，教你搞定 ELISA 试剂盒的选择。
一般来说，厂家都会在产品名称上标明种属，且为首个单词，检索种属的常用语言为英文。如下列的 VEGF ELISA 试剂盒（R&D Systems®，货号 DVE00）的首个单词为 human，即表明目标种属为人。
R&D Systems® ELISA 试剂盒所涵盖的种属，种类达 16 种之多。主要有：人（Human）、小鼠（Mouse）、大鼠（Rat）、豚鼠（Guinea Pig）、犬（Canine）、猪（Porcine）、马（Equine）、猫（Feline）、牛（Bovine）、棉鼠（Cotton Rat）、病毒（Viral）、恒河猴（Rhesus Macaque）、兔（Rabbit）、肉毒梭菌（C.botulinum）、山羊（Goat）。
✦ 一个 ELISA 试剂盒，多个种属
如果您需对不同物种的同一因子进行定量，建议优先寻找适用于多个种属的 ELISA 试剂盒，产品介绍中会注明「Multi-species」。如 Endothelin-1 ELISA 试剂盒（R&D Systems®，货号 DET100）能够定量检测人、大鼠、小鼠的细胞培养上清、血清血浆及尿液等样本中的 Endothelin-1 蛋白。
✦ 研究的种属没有对应的 ELISA 试剂盒，怎么破？
① 前人栽树，后人乘凉，看看别人是否验证过相关种属。R&D Systems® 官网上，在发表文献（Citation）的下方，有一个筛选框，可查看发表文献中使用该产品研究的种属及样本信息。如 Human IL-6 ELISA 试剂盒（货号 D6050），在人、大鼠、小鼠、非人灵长类、兔等种属中均有过实验记录，不妨一试。
② 联系厂家技术部门，获取目标种属与试剂盒验证种属之间的交叉反应性实验数据，R&D Systems® 的试剂盒说明书「Specificity」部分，会详细描述目标因子与相近因子的交叉反应结果，反应性高的，可自行验证。
③ 联系厂家定制 ELISA 试剂盒。
④ 如果觉得自己的技术经验过关，可以选择抗体对自行开发，不少厂家均提供适用于 ELISA 开发的抗体对（点击查看 R&D Systems® 抗体对列表）。
不同厂家验证样本类型不同，即使同一厂家不同试剂盒，其验证样本类型也不尽相同。特别是复杂的血浆样本，根据样本处理方式的差异，分为 EDTA 血浆、肝素抗凝血浆和柠檬酸盐血浆，因此购买前需仔细核对。
一般来说，待测因子可以根据经验或资料获得参考的检测范围，且正常人与疾病状态存在差异。如热门炎症因子 IL-6，正常人血清中浓度为 3.13 pg/mL，病人会显著增高，CAR-T 回输病人血清中的 IL-6 浓度甚至为正常人的 200 倍以上。
因而，必要时进行样本的稀释及选择合适检测范围的试剂盒极其重要。若浓度太低，可选择高敏试剂盒；若不确定待测浓度或样本间浓度差异较大，建议使用检测动态范围更宽的化学发光法ELISA试剂盒。
如同样为 IL-6 ELISA 试剂盒，各类型检测范围差异较大，需要根据实际情况选择合适的试剂盒：
质控数据在说明书中即可找到，在购买前检查试剂盒是否进行过严格的质控实验。比如 R&D Systems® 的 Quantikine® 系列试剂盒，每一个产品在面市前，均需要经过批次内（Intra-Assay）及批次间（Inter-Assay）的精密度检测、掺入回收实验、线性稀释实验及交叉反应测试，从而确保超强的结果重现性及准确性。
如果待测因子超过 5 个，且样本量较小时，单因子 ELISA 检测方法并不是最佳选择。建议考虑多因子检测方法，如固相芯片（样本数量一般 5 个以内，检测指标可达上百个）及 Luminex 液相芯片方法 (检测样本多达 80 个，检测指标多达 50 个）或微流控 ELISA 检测系统 Ella。可节约样本及时间成本，也可保证检测结果准确。
预算往往是大家优先考虑的，实际上，不能够一味讲究产品价格，更需要考虑性价比。生物学是极其严谨的科学，一致性的实验结果是基金、文章等评审过程中必不可少的因素，即使低廉的价格，不能够完美重现结果，也是资源的另一种浪费。
除上述的 6 点，你在购买 ELISA 试剂盒时还会考虑哪些其他因素？欢迎给我们留言。
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