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让2D培养系统到3D培养的转化更加得心应手!

2015-12-22 小邦 细胞之邦


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今天冬至啦,关于冬至是该吃汤圆还是吃饺子,貌似有南北之说,听说南方冬至吃汤圆,北方是吃饺子。anyway,安邦生物全体人员祝大家冬至快乐!

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导读:与传统的2D培养系统相比,3D培养能够更好地模拟体内环境,让细胞能在各个维度与其他细胞接触并相互作用。尽管建立3D培养可能有点棘手,但有了下面的一些技巧,从2D到3D的转化可能更加得心应手。

从2D到3D的转化

首先,你需要查文献,看看你需要的是哪种3D培养,以及哪种分析类型适合它们。建议全面检索实验设计和细胞类型的文献。因为提前规划可以让你避免很大的麻烦。并非所有的细胞类型都适合无支架的3D培养系统。有些细胞,如SW480,不能产生足够的粘附分子,也许不能有效地自发形成3D聚集体。另一方面,带有支架的3D培养系统可能限制了细胞的收获和分析。


另一个需要考虑的因素是分析所用的时间,因为一些类型的分析是在传统的2D板上读取的。这种分析需要的时间比较短,一旦样本被转移到2D板上,3D细胞培养物将开始粘附,而生物学也开始发生变化。

避免潜在的陷阱

这里有一些技巧和注意事项,可以帮助你更顺利地从2D过渡到3D培养。

(1)不同的组织厚度

3D培养通常有几层细胞那么厚,因此通常为2D单层细胞而设计的分析必须经过调整和验证。可能出现的问题是扩散障碍,检测探针或试剂可能更难穿透3D培养物,到达作用位点,因此需要调整浓度或时间。对于那些之前未经3D验证过的2D分析,尤其如此。


(2)不同的细胞数量和生长习惯

在3D培养中,细胞的生长和表现会有所不同。这可能需要细胞滴定或时机的改变,当然,这取决于你的实验。对于某些3D方法,需要的细胞数量比2D培养要多,有些细胞可能需要一些时间来适应从2D到3D的转化,它们一开始会长得慢一点。


在第一次接种细胞时,细胞密度也很重要,但考虑到3D培养所需的体积较大,平常的2D条件可能需要修改。低的接种密度也可能会降低细胞之间的相互作用,影响细胞表型、倍增时间和增殖率。

3D培养技术还在不断发展中。尽管传统的2D培养可能满足了你的需求,但通过3D培养,你也许能开展更好的研究,获取更多的信息。

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