G实验能否用于隐球菌感染诊断？为什么？

细胞壁成分

隐球菌外观呈圆形或椭圆形，直径约２-20 μｍ，HE染色阳性，细胞壁外常有３-5 μｍ 的荚膜，该荚膜是隐球菌致病性的标志之一，菌体外无荚膜的隐球菌一般不引起隐球菌病。

新生隐球菌荚膜主要成分为多糖，其中最重要的是葡萄糖醛酸木糖甘露聚糖( GXM)。

研究表明，GXM是隐球菌荚膜多糖最主要的组成部分，约占荚膜多糖总质量的90%。

(1,3)-β-Ｄ葡聚糖(1，3-B-D-glucan，BDG)广泛分布于多种真菌细胞壁中，为真菌(除隐球酵母和接合菌属外)细胞壁特有的细胞成分，占真菌壁成分的50%以上。

G阳性很少用于隐球菌感染的诊断

当真菌进入人体血液或深部组织，被吞噬细胞吞噬消化后，(1,3)-β-Ｄ葡聚糖从细胞壁中持续释出，使血液及体液中含量增高，其测定结果对真菌感染有一定意义。

而浅表真菌感染或真菌定植时BDG极少释放入血。

目前用于循环中BDG检测的方法主要是G试验，即利用凝血酶原G因子检测体液中BDG的存在，其参考范围为<20 pg/mL。

There was no benefit shown for detection of BDG in patients with cryptococcosis, who had an antigen concentration lower than 16.5 pg/mL。

由于隐球菌具有较厚的荚膜，不利于吞噬细胞的吞噬、消化及细胞壁抗原的释放，在隐球菌感染患者中的G阳性率仅为25%，因此很少用于隐球菌感染的诊断，脑脊液中G试验结果对隐球菌的治疗和预后有较大影响.

隐球菌病诊断最可靠的方法 

荚膜抗原检测是隐球菌病诊断最可靠的方法 。

用于隐球菌检测的免疫学诊断方法主要针对隐球菌荚膜多糖抗原、胞浆抗原及抗荚膜多糖抗体等。

常用于隐球菌荚膜抗原的检测方法有：

• 乳胶凝集试验(latexagglutinationtest,LA)

• 酶联免疫分析法(enzyme immunoassay，EIA)

• 侧流免疫层析法(lateral flow immunoassay, LFA)

其中LA及LFA方法简单、快速，是目前临床上应用较为广泛的方法.

乳胶凝集试验：

以人工合成的聚苯乙烯乳胶颗粒作为载体直接吸附抗体（或抗原）形成致敏乳胶颗粒，可与特异性抗原（或抗体）发生免疫反应产生肉眼可见的白色沉淀，即为乳胶凝集反应。

美国IMMY公司进口原装真菌检测系统，可对隐球菌的荚膜多糖抗原进行定量或半定量检测，此法可检测血清、脑脊液及其他体液标本中新生隐球菌荚膜多糖（抗原），可运用于快速诊断 。

在隐球菌感染的早期快速诊断中，乳胶凝集法明显优于墨汁染色和标本真菌培养，且阳性率高，有利于早期发现感染者，防止漏诊。

参考文献：

1.“十三五”国家科技重大专项艾滋病机会性感染课题组.艾滋病合并隐球菌病临床诊疗的专家共识.西南大学学报（自然科学版）2020年7月第42卷第7期

2.KEDZIERSKA A, KOCHAN P, PIETRZYK A, et al. Current Status of Fungal Cell Wall Components in the Immuno-diagnostics of Invasive Fungal Infections in Humans: Galactomannan, Mannan and (1→3)-β-D glucan Antigens [J]. European Journal of Clinical Microbiology &. Infectious Diseases, 2007, 26(11): 755-766.

3.曹林、沈继录.隐球菌检验方法的应用.中国感染与化疗杂志 2018年1月20日第18卷第1期