问：新冠肺炎诊疗方案（试行第九版）核酸检测的Ct值是什么？
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《新型冠状病毒肺炎诊疗方案（试行第九版）》第十三条：
试行第九版将解除隔离管理及出院标准中的“连续两次呼吸道标本核酸检测阴性（采样时间至少间隔24小时）”修改为“连续两次新型冠状病毒核酸检测N基因和ORF基因Ct值均≥35（荧光定量PCR方法，界限值为40，采样时间至少间隔24小时），或连续两次新型冠状病毒核酸检测阴性（荧光定量PCR方法，界限值低于35，采样时间至少间隔24小时）”。
第八版、第九版全文如下：
《新型冠状病毒肺炎诊疗方案》第八版
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《新型冠状病毒肺炎诊疗方案》第九版
新冠肺炎专辑，公众号：离床医学新型冠状病毒肺炎诊疗方案（试行第九版）：更新11处核心要点
问题来了：很多人看不懂这个“N基因和ORF基因Ct值”是什么？
解读1：N基因和ORF基因是什么？
新型冠状病毒是一种 β属冠病毒(SARS-CoV-2)，直径 60～140 nm，有包膜，颗粒呈圆形或椭圆形，常为多形性。
目前采用的实时荧光ＲT-PCＲ技术以ORF1ab 基因、N基因以及E基因作为检测靶标。
研究发现，随时间的增加，患者Ct值不断增加，E基因最先消失，其次是ORF1ab基因，最后是N基因，所以不能以E基因作为患者转阴的标准，否则可能造成假阴性结果。
所以我们看到的试行第九版的“连续两次新型冠状病毒核酸检测N基因和ORF基因Ct值均≥35”，并没有E基因Ct值。
解读2：Ct值是什么？
Ct值，英文cycle threshold，循环阈值，简称Ct值：
是每个反应管内的荧光信号到达设定阈值时所经历的循环次数，是一个半定量的数值，与体内的病毒载量呈负相关，Ct 值越低，说明标本中病毒载量越高。
这也太专业了吧。。。
Ct值在核酸检测中是个很重要的概念，我们以荧光定量PCR的核酸检测为例。
一般意义上，核酸检测就是采集咽拭子或者鼻拭子等（血液）体液样品，然后通过仪器检测里面含有的病毒数，如果样品中有病毒或者病毒数目太多（超过一定值），就说明这人感染了病毒，此刻定义为阳性，反之阴性。
现实情况是，即使一个人感染病毒并出现了症状，体液中病毒的含量其实也并不多，不多数量的病毒无法引发可侦测到的荧光，就导致定义阳性非常困难。
咽拭子采样量本来就不大，加之采集之后的溶解等步骤会损失一部分样品（病毒数）。
直接检测问题重重。那么怎么办呢？
让病毒体外繁殖扩增，到足够的数量再检测吧。
简单就是，数个病毒不足以引起看得见的荧光，那我们让病毒扩增无数倍，然后成千上万的病毒引起的荧光我们总能看见吧
所以PCR就登场了。
PCR的原理非常简单，就是通过聚合酶链这种化学反应，在体外负责病毒RNA的扩增。
聚合酶链式反应（polymerase chain reaction，PCR）是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术，它可看作是生物体外的特殊DNA复制，PCR的最大特点是能将微量的DNA大幅增加。
因此，无论是化石中的古生物、历史人物的残骸，还是几十年前凶杀案中凶手所遗留的毛发、皮肤或血液，只要能分离出一丁点的DNA，就能用PCR加以放大，进行比对。这也是“微量证据”的威力之所在。
这儿需要补充一点，PCR扩增的其实不是完整的病毒，而是只扩增病毒的遗传物质，即核酸RNA，核酸检测的名称就是这么来的。
如图，一个病毒由蛋白和核酸RNA等物质构成。
蛋白组成比较复杂，但一个病毒肯定有一套RNA，病毒感染机体也主要是复制自己的遗传物质RNA。
所以检测病毒RNA数就等于是检测病毒数，RNA数和病毒数，这儿可以看成同一回事。
既然感染者样品中的病毒量还是太少，就先用PCR扩增到数目足够再检测。
PCR扩增是指数级增长的。
比如有1个病毒（即一套RNA），那么扩增一次即1个循环，就是2个；
紧接以2个为基础，扩增第2个循环，就是4个（2的2次方）；
继续扩增第3个循环，就是8个（2的3次方）；
然后16个，以此类推，扩增n个循环，就是2的n次方。
注意这个n，其实就是Ct值。
解读3：怎么科学的定义Ct值呢？
一个人感染了病毒但他本人还没表现出症状时，怎么区分他是阳性还是阴性呢？
举个例子：
用PCR扩增咽拭子样品，当Ct等于30，即扩增了30个循环时，这时候还没有看到足够量的病毒数（RNA数）所导致的荧光，即阴性。
但如果我们不放心，那么让PCR仪器继续工作，增大循环Ct到100次，病毒核酸数直接扩增了100代。
这顿猛如虎的操作下来，一看不得了，此时病毒RNA数量达到了检测所需的最低值，仪器出现了可见的荧光。
然后“惊喜”雀跃，果然又一个阳性，这人核酸检测阳性！
哎呀，差一点都漏诊了。
其实对于健康的人体，比如A在空气中感染一个或者几个病毒，并不一定得新冠肺炎（有症状），因为强大的自身免疫系统会趁着病毒还没开始复制自己（就像PCR一样在体内复制），就已经把这几个小病毒清除了。
但是，如果此时我们进行核酸检测，然后，只要把Ct值调得无限大（即扩增很多的倍数），是不是也能检测出病毒引发的荧光反应呢？
因为足够大的Ct循环数让原本一两个病毒的RNA繁衍2的n次方倍，终于达到了足以引发荧光的数量。
接着呢，虽然A没什么症状也不会传染，大概率会自愈，依然要果断定义A为阳性？因为不管怎么说，核酸检测结果就是阳性呀，只要我不说我用的是多大的Ct值就行。
这样看来，感染病毒和阳性之间，感染病毒和症状之间，如果抛弃了Ct值，是不是就很难界定了？
我在门把手上采集样品，然后把Ct值调的无限高试试？ 哈哈
所以在新冠的核酸检测中，首先是确定Ct值，才能更精准的用于新冠肺炎筛查。
最后，记住“新型冠状病毒核酸检测N基因和ORF基因Ct值≥35（荧光定量PCR方法，界限值为40）”。
下次做核酸的时候，看看报告单有没有这个数值，还是仅仅有阴性二字？哈哈
参考来源：
1.国家卫健委.新型冠状病毒肺炎诊疗方案（试行第九版）
2.石玉如,常文娇,岳莉,刘婷,刘佳星,刘杨,谷妍,王云,戚应杰.新型冠状病毒核酸检测循环阈值变化规律浅析[J].临床检验杂志,2020,38(04):241-243.
3.江苏感控之窗.科普丨什么是Ct值？
4.百度百科.聚合酶链式反应PCR
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