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空间基因表达解决方案

周运来 单细胞天地 2022-08-10

作者 |  周运来

男,

一个长大了才会遇到的帅哥,

稳健,潇洒,大方,靠谱。

一段生信缘,一棵技能树。

生信技能树核心成员,单细胞天地特约撰稿人,简书创作者,单细胞数据科学家。


细胞和它们在组织之间的关系对于理解正常发育和疾病病理学是至关重要的。Visium 空间基因表达解决方案允许研究空间分辨的全转录组 mRNA 表达,同时在同一组织切片中捕获组织学信息。使用该解决方案,可以将基因表达谱映射回原来的位置,为组织和基因表达复杂性提供了新的观点,因为它适用于癌症、免疫肿瘤学、神经科学、发育生物学等领域的研究。

技术可达:

  • 将空间中的(切片)的全转录组分析与形态学内容相结合,补充单细胞基因表达信息。
  • 通过绘制所有基因表达的位置,获得疾病复杂性的完整视图,用无偏分析(为什么不翻译成无监督分析)发现新的目标。

图 1. Visium 空间基因表达解决方案的工作流程图。将新鲜冷冻组织切片,置于文库制备载玻片上,然后固定、染色和透化,释放与空间条形码捕获探针结合的 mRNA,以捕获基因表达信息。然后从捕获的 mRNA 和测序文库中合成 cDNA。然后对文库进行测序并可视化数据。从样本到文库制备的工作流程可在 < 1 天内完成。

图 2. 小鼠大脑中空间分辨的聚类和表达。A.冠状鼠脑切片H&E染色,成像,然后处理Visium空间基因表达工作流。图中显示的是包含UMI计数(B)、总基因计数(C)和基于总差异表达基因的空间朴素聚类(spatially naÏve clustering)(D)的图像覆盖。图中最右侧显示的是cluster 4(绿色)中比其他任何聚类都高表达的top基因。

图3。空间分辨基因在小鼠大脑中的表达。A. H&E染色小鼠冠状脑切片。Selenow (B)和Hpca的空间mRNA表达(C)是大脑中已知表达模式基因的例子,主要是海马区。海马体的表达与已知的表达模式一致(注意点的大小与比例无关)。

产品配置

VISIUM空间基因表达

  • 载玻片及试剂盒
  • 包括4(1张)或16(4张)反应的所有试剂和载玻片
  • 每张幻灯片包含4个捕捉区域 (6.5x6.5毫米),每个捕捉区有5,000个条码点
  • 每个点55µm直径(100µm中心之间的点)
  • 载玻片及试剂盒,包含所有的载玻片和试剂,以优化多达4种组织类型

已经技术成熟的组织:

人类

  • 心脏,肾脏,卵巢,乳房,淋巴结

小鼠

  • 脂肪,大脑,小肠,胃,
  • 肝脏,大脑,四头肌,肺,睾丸,
  • 甲状腺,眼睛,舌头,大肠,
  • 脾、乳腺

老鼠(RAT):

  • 大脑、肾、心脏


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