进阶版—doplot可视化多个单细胞亚群的多个标记基因

分享是一种态度

我们以 seurat 官方教程为例：

rm(list = ls())
library(Seurat)
# devtools::install_github('satijalab/seurat-data')
library(SeuratData)
library(ggplot2)
library(patchwork)
library(dplyr)
load(file = 'basic.sce.pbmc.Rdata')

DimPlot(pbmc, reduction = 'umap', 
        label = TRUE, pt.size = 0.5) + NoLegend()

sce=pbmc

如果你不知道 basic.sce.pbmc.Rdata 这个文件如何得到的，麻烦自己去跑一下 可视化单细胞亚群的标记基因的5个方法，自己 save(pbmc,file = 'basic.sce.pbmc.Rdata') ，我们后面的教程都是依赖于这个文件哦！

首先对每个细胞亚群找高表达量的标记基因

# 参考：https://mp.weixin.qq.com/s/enGx9_Sv5wKLdtygL7b4Jw  
if (file.exists('sce.markers.all_10_celltype.Rdata')) {
  load('sce.markers.all_10_celltype.Rdata')
}else {
  sce.markers <- FindAllMarkers(object = sce, only.pos = TRUE,
                                min.pct = 0.25, 
                                thresh.use = 0.25)
  save(sce.markers,file = 'sce.markers.all_10_celltype.Rdata')
  
}

DT::datatable(sce.markers) 
library(dplyr) 
# 不同seurat版本的 avg_logFC 不一样 
top5 <- sce.markers %>% group_by(cluster) %>% top_n(5, avg_logFC)
DoHeatmap(sce,top5$gene,size=3)  

普通的热图或者气泡图可视化

DT::datatable(sce.markers) 
library(dplyr) 
# 不同seurat版本的 avg_logFC 不一样 
top5 <- sce.markers %>% group_by(cluster) %>% top_n(5, avg_logFC)
DoHeatmap(sce,top5$gene,size=3)  
p <- DotPlot(sce, features = unique(top5$gene) ,
             assay='RNA' )  + coord_flip()

p+ theme(axis.text.x = element_text(angle = 45, 
                                    vjust = 0.5, hjust=0.5))

如下所示：

其实这个函数不仅仅是接受一个向量，还可以接受一个列表，代码如下：

head(top5)
top5=top5[!duplicated(top5$gene),]
select_genes_all=split(top5$gene,top5$cluster)
select_genes_all
DotPlot(object = sce, 
        features=select_genes_all, 
        assay = "RNA") + theme(axis.text.x = element_text(angle = 45, 
                                                          vjust = 0.5, hjust=0.5))

出图如下：

这样的雕虫小技肯定是入不了大家的法眼，出一个作业吧，文章是《High-Throughput Single-Cell Transcriptome Profiling of Plant Cell Types》，里面的图 ，见：差异分析要的是表达量矩阵，基因名字并不重要啊

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注：如果想要获取文中代码。后台回复单细胞亚群即可！

往期回顾

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如果你对单细胞转录组研究感兴趣，但又不知道如何入门，也许你可以关注一下下面的课程

看完记得顺手点个“在看”哦！

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