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可靠诊断测试的关键所在:高质量的血清免疫分析试剂 - Jackson ImmunoResearch

JIR ScienceAAAS 2022-11-15


血清免疫分析试剂

高质量的试剂对于确保准确性、灵敏度和可重复性至关重要——这是可靠诊断测试的关键要求。在本文中,我们描述了为您的免疫分析选择正确检测试剂的一些关键注意事项。


您正在开发什么类型的检测手段?

检测手段开发将取决于您所需的灵敏度、速度和易用性,以及可使用的设备和测试的进行方式。最常见的血清学测试是:


  • 基于磁珠法的测定

  • ELISA

  • 横向流动

  • 蛋白质印迹法

  • 散射光度滴定法/比浊法

  • 流式细胞术



您将使用什么形式?

免疫测定可以检测多种分子,例如病毒颗粒或过敏原上的结构基序,或来自超免疫患者生物体液(例如血清或唾液)的免疫球蛋白。检测可以分为多种形式,例如直接法、间接法、夹心法和竞争法。间接法和夹心法更为常用。它们通过缀合的二抗放大来自目标分子的信号,从而实现更高水平的灵敏度。


图1:免疫测定方法,夹心法或间接法



用于血清学测试的检测和捕获抗体


采用交叉吸附达到特异性检测的最好效果

如果在免疫检测体系中需要来自多个种属的抗体,建议使用交叉吸附后的二抗以避免检测到目标以外的 Ig,从而最大限度地减少非特异性信号。如无需考虑种属的交叉反应,则交叉吸附抗体可作为一个选择。
当来自一个种属的 Ig 识别另一种属 Ig 上的同源表位时,交叉吸附纯化后的二抗可防止交叉反应,从而消除了非特异性检测信号的可能性。

克隆类型:

在您的检测中使用单抗或多抗?

在所用检测条件下表现良好的单克隆抗体需要进行筛选。多克隆抗体易于量产,并可实现更高的检测灵敏度。作为 Ig 的混合物,每种 Ig 同时一道识别抗原上的不同表位,可以富集更多的报道分子,从而增加信号。


宿主种属对您的检测是否有影响?

最常用的血清学检测抗体来源于山羊。较大的动物有助于生产更多的抗体原料。JIR 还生产小鼠、兔子、羊驼和驴来源的具有强亲和力和活性的抗人抗体。
了解有关抗人抗体的更多信息请识别以下二维码



报道分子和缀合物


免疫测定中常用的报道分子包括胶体金、报道酶和荧光染料。具体选择取决于测定目标和信号读出方法。



40 nm胶体金缀合物

40 nm胶体金是 LFIA 的常用报告分子,可产生较深的颜色和强烈的信号,使读出结果变得容易。产生颜色强度的原因是金元素电子层的等离子体吸收和光散射(Huang & El-Sayed,2010)以及金颗粒在测试线和控制线上的高密度堆积。

了解有关40 nm胶体金的更多信息

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 荧光染料缀合物

荧光染料可广泛用于免疫测定,包括基于流式细胞术的测试。荧光素和花青染料是常见的选择。

了解有关流式细胞术的更多信息

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让测试更有效的信号增强策略:封闭


使用 BSA 或正常血清进行封闭可以提高结果准确性,并减少导致背景信号的非特异性相互作用带来的假阳性。使用与标记抗体相同宿主的稀释正常血清可获得最佳结果,在添加一抗之前作为单独的孵育步骤。Jackson ImmunoResearch BSA 不含 IgG 和蛋白酶,可防止与其他 BSA 制剂相关的常见免疫测定问题。



抗体作为对照试剂

免疫测定中所用对照试剂的选择很重要。抗体用作对照物以确认测试是否正确执行或排除性能故障。同型对照抗体与实验中使用的抗体宿主和类别相匹配,但不直接与目标抗原结合。它们用作阴性对照,以评估抗体的非特异性结合,并缀合有特异性抗体相同的报道分子。ChromPure™ 蛋白纯化自未免疫动物的血清,是合适的实验对照物。

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用于 LFIA 的抗鸡抗体

捕获针对目标分子的抗体,用于检测它们的缀合二抗通常在哺乳动物宿主中产生。在检测中与这些 Ig 一起使用的对照试剂不得干扰对测试结果有贡献的任何试剂。抗哺乳动物 IgG 对鸡 Ig 固有的低反应性使 IgY 成为特别有用的对照蛋白。类似地,抗鸡(IgY)抗体与哺乳动物 IgG 极低的结合,降低了可能导致背景信号的试剂之间相互作用的机会。

了解更多关于抗鸡抗体的信息

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小鼠单克隆抗人 IgE


针对人 IgE 抗体,我们新的抗人 IgE 将补充我们现有的抗人 IgG、IgM 和 IgA 抗体,是我们适用于诊断研究和开发的产品组合的最新成员。它们可与一系列选定的报道分子(包括碱性磷酸酶和生物素)缀合,从而实现出色的灵敏度。

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Jackson ImmunoResearch的抗体供应:我们的专注和专业


在单一、高度专业化的领域拥有超过40年的经验;专注二抗的生产、缀合和供应。
  • 致力于生命科学领域

  • 作为成熟可靠的供应商保持长期的客户关系

  • 快速、高效的客户服务

  • 持续致力于在我们的研发、生产和分销流程中保持最高标准

  • 产品质量有保障,产品长期保持一致性,性能可靠


JIR已通过 ISO 9001:2015 认证,可开发和生产免疫试剂。标准库存免疫试剂可以快速扩大为批量生产或按定制规格生产。
请联系JIR销售代表了解更多信息:https://www.jacksonimmuno.com/company/order-info/distributors




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