2017年动物及动物产品兽药残留检测方法及残留限量检测方法 （二）
附录6
动物性食品中林可胺类和大环内酯类药物残留检测
－液相色谱-串联质谱法
1 范围
本标准规定了动物性食品中林可霉素、克林霉素、吡利霉素、红霉素、泰乐菌素、螺旋霉素、替米考星、竹桃霉素、吉他霉素、克拉霉素、阿奇霉素、罗红霉素和交沙霉素等13种林可胺类和大环内酯类药物残留检测的制样和液相色谱-串联质谱测定方法。
本标准适用于牛奶、鸡蛋、猪肌肉、肝脏和肾脏中林可霉素、克林霉素、吡利霉素、红霉素、泰乐菌素、螺旋霉素、替米考星、竹桃霉素、吉他霉素、克拉霉素、阿奇霉素、罗红霉素和交沙霉素单个或多个药物残留量的检测。
2 规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
3 制样
3.1样品的制备
3.1.1 牛奶
取适量新鲜或解冻的空白或供试牛奶，摇匀。
3.1.2 鸡蛋
取适量新鲜或冷藏的空白或供试鸡蛋，去壳后混合匀质。
3.1.3 猪肌肉、肝脏和肾脏
取适量新鲜或解冻的空白或供试组织，绞碎并使匀质
3.2样品的保存
上述制备样品-20℃以下贮存备用。
4 测定方法
4.1方法提要或原理
供试样品中的残留药物用乙腈提取后，用正己烷去除脂肪等杂质，浓缩后供液相色谱-串联质谱法测定。
4.2试剂和材料
以下所用的试剂，除特别注明者外均为分析纯试剂；水为符合GB/T 6682规定的一级水。
4.2.1 林可霉素、克林霉素、吡利霉素、红霉素、泰乐菌素、螺旋霉素、替米考星、竹桃霉素、吉他霉素、克拉霉素、阿奇霉素、罗红霉素和交沙霉素对照品：纯度均大于98.0%。
4.2.2 乙腈色谱纯
4.2.3 甲醇色谱纯
4.2.4 无水硫酸钠
4.2.5 正己烷
4.2.6 正丙醇
4.2.7 乙酸铵
4.2.8 乙酸铵溶液（50mmol/L）：称取0.77g乙酸铵，溶解于200mL水中，摇匀即得。
4.2.9标准储备液（1mg/mL）：准确称取适量的林可霉素、克林霉素、吡利霉素、红霉素、泰乐菌素、螺旋霉素、替米考星、竹桃霉素、吉他霉素、克拉霉素、阿奇霉素、罗红霉素和交沙霉素对照品，用甲醇溶解稀释，分别配制成1mg/mL的标准储备液。-20℃下保存，有效期为3个月。
4.2.10混合标准工作液（10μg/mL）：分别准确吸取0.1mL林可霉素、克林霉素、吡利霉素、红霉素、泰乐菌素、螺旋霉素、替米考星、竹桃霉素、吉他霉素、克拉霉素、阿奇霉素、罗红霉素和交沙霉素各标准储备液至同一10mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，混匀即得。-20℃下保存，有效期为3个月。
4.3 仪器和设备
4.3.1 液相色谱-串联质谱仪（配电喷雾离子源）
4.3.2 分析天平感量0.00001g
4.3.3 天平感量0.01g
4.3.4 高速冷冻离心机
4.3.5涡旋混合器
4.3.6水平振荡器
4.3.7 旋转蒸发仪
4.3.8微孔滤头 0.22μm
4.4 测定步骤
4.4.1 试料的制备
试料的制备包括：
00001—— 取匀质的供试样品，作为供试试料。
00002—— 取匀质的空白样品，作为空白试料。
00003—— 取匀质的空白样品，添加适宜浓度的标准工作液，作为空白添加试料。
4.4.2 提取
称取2（±0.02）g匀质样品，置于50mL离心管内，加乙腈10mL，再加无水硫酸钠2g，涡旋混匀后，中速振荡5min，8000r/min离心8min，转移上清液于另一离心管内，再用乙腈10mL重复提取一次，合并上清液。
4.4.3 净化
在提取液中加正己烷10mL，涡旋混匀后， 5000r/min离心5min，弃上层有机相；下层溶液中加正丙醇5mL，于50℃水浴中旋转蒸发至干，加正己烷2mL，涡旋溶解后再加入50％甲醇水溶液2mL，涡旋后静置分层，取下层溶液1.0mL于1.5mL塑料离心管内，于4℃下15000r/min离心10min，取上清液适量，过滤膜后供液相色谱-串联质谱仪测定。
4.4.4 标准曲线的制备
分别准确量取适量13种药物混合标准溶液，用50％甲醇水溶液配制成5、10、20、50、100和200ng/mL的系列标准溶液，从低浓度到高浓度依次上机测定。以特征离子质量色谱峰面积为纵坐标，标准溶液浓度为横坐标，绘制标准曲线。
4.4.5 测定
4.4.5.1 液相色谱参考条件
色谱柱：BEH C18（50×2.1mm，1.7µm），或相当者。
流动相：A相为乙腈；B相为50mmol/L乙酸铵水溶液。
梯度洗脱：0～6min，15％A线性变化至60％A；6～8min，保持90％A；8～10min，保持15％A。
流速：0.3mL/min；
柱温：30℃；
进样量：10µL。
4.4.5.2 质谱参考条件
离子源：电喷雾离子源；
扫描方式：正离子扫描；
检测方式：多反应监测；
电离电压：3.1kV；
源温：110℃；
雾化温度：350℃；
锥孔气流速：50L/h；
雾化气流速：650L/h；
测试药物定性、定量离子对及对应的锥孔电压、碰撞能量见表1。
表1 13种药物的保留时间、定性定量离子对以及锥孔电压、碰撞能量
4.4.5.3 测定法
取试料溶液和基质匹配标准溶液，作单点校准，外标法计算。试料溶液和基质匹配标准溶液中林可霉素、克林霉素、吡利霉素、红霉素、泰乐菌素、螺旋霉素、替米考星、竹桃霉素、吉他霉素、克拉霉素、阿奇霉素、罗红霉素和交沙霉素的特征离子质量色谱峰面积均应在仪器检测的线性范围之内。试料溶液中的离子相对丰度与基质匹配标准溶液中的离子相对丰度相比，符合表2的要求。标准溶液和添加试液中特征离子质量色谱图分别见附录A中图A.1和图A.2。
表2 试料溶液中离子相对丰度的允许偏差范围
式中：
X——供试试料中待测药物残留量（µg/kg）；
Cs——基质匹配溶液中待测药物浓度（ng/mL）；
As——基质匹配溶液中待测药物峰面积；
A——供试试料溶液中待测药物峰面积；
V——定容体积（mL）；
——供试试料质量（g）。
注：计算结果需扣除空白值，测定结果用平行测定的算术平均值表示，保留三位有效数字。
5 检测方法灵敏度、准确度和精密度
5.1 灵敏度
林可霉素、克林霉素、吡利霉素、红霉素、泰乐菌素、螺旋霉素、替米考星、竹桃霉素、吉他霉素、克拉霉素、阿奇霉素、罗红霉素和交沙霉素在牛奶、鸡蛋、猪肌肉、肝脏和和肾脏中的检测限为1µg/kg，定量限为2.5µg/kg。
5.2 准确度
本方法牛奶、鸡蛋、猪肌肉、肝脏和和肾脏在2.5µg/kg～200µg/kg添加浓度范围内回收率为70%～120%。
5.3 精密度
本方法批内相对标准偏差≤20%，批间相对标准偏差≤20%。
（资料性附录）
测试药物特征离子质量色谱图
注：1－林可霉素特征离子质量色谱图（407.4﹥125.9）；
2－吡利霉素特征离子质量色谱图（411.3﹥111.9）；
3－阿奇霉素特征离子质量色谱图（749.9﹥115.7）；
4－竹桃霉素特征离子质量色谱图（688.8﹥157.8）；
5－红霉素特征离子质量色谱图（734.8﹥157.9）；
6－螺旋霉素特征离子质量色谱图（843.8﹥173.9）；
7－替米考星特征离子质量色谱图（870.0﹥155.8）；
8－泰乐菌素特征离子质量色谱图（917.0﹥173.8）；
9－克拉霉素特征离子质量色谱图（748.9﹥157.8）；
10－克林霉素特征离子质量色谱图（425.3﹥125.9）；
11－罗红霉素特征离子质量色谱图（837.9﹥157.8）；
12－吉他霉素特征离子质量色谱图（772.8﹥108.6）；
附录7
牛奶中四环素类药物残留检测－超高效液相色谱
-串联质谱法
1范围
本标准规定了牛奶中四环素、土霉素、金霉素和多西环素单个或混合物残留检测的制样和超高效液相色谱-串联质谱的测定方法。
本标准适用于牛奶中四环素、土霉素、金霉素和多西环素单个或混合物残留量的检测。
2规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。
GB/T 6682-2000 分析实验室用水规则和试验方法
3制样
3.1样品的制备
取适量新鲜或解冻的空白或供试样品，混合均匀。
3.2样品的保存
-20℃以下冰箱中贮存备用。
4测定方法
4.1方法提要或原理
试料中残留的四环素、土霉素、金霉素和多西环素经Mcllvaine-Na2EDTA缓冲液提取，HLB柱净化。用超高效液相色谱-串联质谱法测定，外标法定量。
4.2试剂和材料
以下所用的试剂，除特别注明者外均为分析纯试剂；水为符合GB/T 6682规定的一级水。
4.2.1盐酸四环素含量≥97%。
4.2.2土霉素含量≥92.4%。
4.2.3盐酸金霉素含量≥94.5%。
4.2.4 多西环素含量≥83.2%。
4.2.5 甲醇色谱纯
4.2.6 乙腈色谱纯
4.2.7 甲酸
4.2.8 氢氧化钠
4.2.9 柠檬酸(C6H8O7·H2O)
4.2.10 磷酸氢二钠（Na2HPO4·12H2O）
4.2.11 乙二胺四乙酸二钠(C10H14N2Na2O8·2H2O)
4.2.12 氢氧化钠溶液（1mol/L）称取氢氧化钠4g，加水溶解并稀释至100mL，即得。
4.2.13柠檬酸溶液（0.1mol/L）称取21.01g柠檬酸，用水溶解并定容至1000mL，即得。
4.2.14 磷酸氢二钠溶液（0.2mol/L）称取28.41g磷酸氢二钠，用水溶解并定容至1000mL，即得。
4.2.15 Mcllvaine缓冲液将0.1mol/L柠檬酸溶液1000mL与0.2mol/L磷酸氢二钠溶液625mL混合，用1mol/L氢氧化钠溶液调pH值至4.0±0.5。
4.2.16 Mcllvaine-Na2EDTA缓冲液（0.1mol/L）称取60.5g乙二胺四乙酸二钠放入1625mL Mcllvaine缓冲液中，使其溶解，摇匀即得。
4.2.17 标准储备液准确称取盐酸四环素、盐酸土霉素和盐酸金霉素对照品适量，用甲醇溶解并稀释成浓度均为1mg/mL的溶液，作为标准储备液。置-20℃冰箱中保存，有效期为1个月。
4.2.18 混合标准工作液准确量取标准储备液适量，用甲醇-水（3+7，V/V）溶液稀释成适宜浓度的四环素、土霉素、金霉素和多西环素混合标准工作液。临用前配制。
4.3仪器和设备
4.3.1超高效液相色谱-串联质谱仪（配电喷雾离子源）
4.3.2分析天平感量0.00001g
4.3.3天平感量0.01g
4.3.4涡旋混合器
4.3.5水平振荡器
4.3.6离心机
4.3.7酸度计
4.3.8固相萃取柱 HLB小柱(60mg/3mL)，或相当者。
4.3.9氮吹仪
4.3.10微孔滤膜 0.22µm
4.4测定步骤
4.4.1试料的制备
试料的制备包括：
00001—— 取混匀后的供试样品，作为供试试料。
00002—— 取混匀后的空白样品，作为空白试料。
00003—— 取混匀后的空白样品，添加适宜浓度的标准工作液，作为空白添加试料。
4.4.2提取
称取2（±0.05）g混匀样品，置50mL离心管中，加Mcllvaine-Na2EDTA缓冲液18mL，涡旋混匀，8000r/min离心10min(温度低于15℃)，取上清液于另一离心管内备用。
4.4.3净化
HLB小柱依次用甲醇、水各5mL预洗。取备用液10mL过柱，依次用水、5％甲醇水溶液各5mL淋洗，减压抽干。用甲醇-乙酸乙酯溶液（1+9，V/V）3mL洗脱，洗脱液用氮气吹干（温度低于40℃）。用甲醇-水（3+7，V/V）0.5mL溶解残余物，过滤膜后供超高效液相色谱-串联质谱仪测定。
4.4.4标准曲线的制备
精密量取混合标准工作液适量，用甲醇-水（3+7，V/V）溶液稀释成含四环素、土霉素、金霉素和多西环素分别为10、20、50、100、200、500ng/mL的系列标准工作液，供超高效液相色谱-串联质谱仪测定。
4.4.5测定
4.4.5.1液相色谱条件
色谱柱：BEH C18（50×2.1mm，1.7µm），或相当者；
流动相： A相为0.3%的甲酸乙腈溶液，B相为0.3％的甲酸水溶液；
梯度洗脱： 0～5min，15％A线性变化至35％A；5～6min，保持15％A。
流速：0.3mL/min；
柱温：20℃。
进样量：10µL。
4.4.5.2质谱条件
离子源：电喷雾离子源；
扫描方式：正离子扫描；
检测方式：多反应监测；
电离电压：2.5KV；
源温：100℃；
雾化温度：300℃；
锥孔气流速：50L/h；
雾化气流速：500L/h；
定性、定量离子对及锥孔电压、碰撞能量见表1。
表1 四环素类药物保留时间、定性定量离子对以及锥孔电压、碰撞能量
式中：
X——试料中四环素、土霉素、金霉素和多西环素的残留量(ng/g)；
A——试样溶液中相应药物的峰面积；
AS——对照溶液中相应药物的峰面积；
cs——对照溶液中相应药物的浓度(ng/mL)；
V1——提取试料后缓冲液的总体积(mL)；
V2 ——过固相萃取柱所用备用液体积(mL)；
V3——溶解残余物的体积(mL)；
m——供试试料的质量(g)。
注：计算结果需扣除空白值，测定结果用平行测定的算术平均值表示，保留3位有效数字。
000011 检测方法灵敏度、准确度、精密度
5.1灵敏度
四环素、土霉素、金霉素和多西环素在牛奶中的检测限为5μg/kg，定量限为10μg/kg。
5.2准确度
本方法在10μg/kg～200μg/kg添加浓度的回收率为70%～120%。
5.3精密度
本方法的批内变异系数≤20%，批间变异系数≤20%。
（资料性附录）
四环素类药物特征离子质量色谱图
附录8
动物性食品中四环素类、磺胺类和喹诺酮类药物多残留的测定 液相色谱-串联质谱法
1 范围
本标准规定了动物性食品中四环素类、磺胺类和喹诺酮类药物的制样和液相色谱-串联质谱测定方法。
本标准适用于牛、羊、猪和鸡的肌肉、肝脏和肾脏组织中四环素、金霉素、土霉素、强力霉素、乙酰磺胺、磺胺吡啶、磺胺嘧啶、磺胺甲恶唑、磺胺噻唑、磺胺甲嘧啶、磺胺甲基异恶唑、磺胺甲二唑、苯甲酰磺胺、磺胺异嘧啶、磺胺二甲嘧啶、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺甲氧哒嗪、磺胺对甲氧嘧啶、磺胺氯哒嗪、磺胺邻二甲氧嘧啶、磺胺间二甲氧嘧啶、磺胺苯吡唑、酞磺胺噻唑、诺氟沙星、依诺沙星、环丙沙星、培氟沙星、洛美沙星、达氟沙星、恩诺沙星、氧氟沙星、麻保沙星、沙拉沙星、二氟沙星、噁喹酸和氟甲喹残留量的测定。
2 规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修定版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本文件。
GB/T 1.1-2009 标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写规则
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
3 原理
试料中残留的四环素类、磺胺类、喹诺酮类药物，用缓冲溶液提取，固相萃取净化，液相色谱-串联质谱法检测，外标法定量。
4 试剂和材料
以下所用的试剂，除特别注明者外均为分析纯试剂；水为符合GB/T 6682规定的一级水。
4.1 四环素类药物对照品：四环素、金霉素、土霉素、强力霉素，含量≥95%。
4.2 磺胺类药物对照品：乙酰磺胺、磺胺吡啶、磺胺嘧啶、磺胺甲恶唑、磺胺噻唑、磺胺甲嘧啶、磺胺甲基异恶唑、磺胺甲二唑、苯甲酰磺胺、磺胺异嘧啶、磺胺二甲嘧啶、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺甲氧哒嗪、磺胺对甲氧嘧啶、磺胺氯哒嗪、磺胺邻二甲氧嘧啶、磺胺间二甲氧嘧啶、磺胺苯吡唑、酞磺胺噻唑，含量≥95%。
4.3 喹诺酮类药物对照品：诺氟沙星、依诺沙星、环丙沙星、培氟沙星、洛美沙星、达氟沙星、恩诺沙星、氧氟沙星、麻保沙星、沙拉沙星、二氟沙星、噁喹酸、氟甲喹，含量≥95%。
4.4 乙腈：色谱纯。
4.5 甲醇：色谱纯。
4.6 乙酸乙酯：色谱纯。
4.7 甲酸：色谱纯。
4.8 乙二胺四乙酸二钠（C10H14N2Na2O8·2H2O）
4.9 浓氨水
4.10 磷酸氢二钠（Na2HPO4·12H2O）
4.11 磷酸二氢钠（NaH2PO4·2H2O）
4.12 柠檬酸（C6H8O7·H2O）
4.13 氢氧化钠
4.14 HLB固相萃取柱:200mg/6 mL，或相当者。
4.150.05 mol/L磷酸二氢钠溶液：取磷酸二氢钠7.8 g，用水溶解并稀释至1000 mL。
4.16 0.05 mol/L磷酸氢二钠溶液：取磷酸氢二钠17.9 g，用水溶解并稀释至1000 mL。
4.17 磷酸盐缓冲液：取0.05 mol/L磷酸二氢钠溶液190 mL，用0.05 mol/L磷酸氢二钠溶液稀释至1000 mL。
4.18 1 mol/L氢氧化钠溶液：取氢氧化钠4 g，用水溶解并稀释至100 mL。
4.19 0.03 mol/L氢氧化钠溶液：取1 mol/L氢氧化钠溶液3 mL，用水稀释至100 mL。
4.20 Mcllvaine- Na2EDTA缓冲液：分别取柠檬酸12.9 g，磷酸氢二钠10.9 g，乙二胺四乙酸二钠39.2 g，用水900 mL溶解，用1 mol/L的氢氧化钠溶液调pH至5.0±0.2，用水稀释至1000 mL。
4.21 洗脱液：取甲醇150 mL，加乙酸乙酯150 mL、浓氨水6 mL，混匀。
4.22 复溶液：取水40 mL，加甲醇5 mL、乙腈5 mL、甲酸0.05 mL，混匀。
4.23 1 mg/mL四环素类、磺胺类和喹诺酮类药物标准贮备液：精密称取相当于各药物10 mg的四环素类、磺胺类和喹诺酮类药物对照品，分别于10 mL量瓶中，四环素类、磺胺类药物用甲醇溶解并稀释至刻度，喹诺酮类药物用0.03 mol/L氢氧化钠溶液溶解并稀释至刻度，配制成浓度为1 mg/mL的四环素类、磺胺类和喹诺酮类药物标准贮备液。-20℃以下保存，有效期6个月。
4.2410 μg/mL四环素类、磺胺类和喹诺酮类药物混合标准工作液：分别精密量取1 mg/mL四环素类、磺胺类和喹诺酮类药物标准贮备液各0.1 mL，于10 mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，配制成浓度为10 μg/mL的混合标准工作液。-20℃以下保存，有效期1个月。
4.25 1 μg/mL四环素类、磺胺类和喹诺酮类药物混合标准工作液：精密量取10 μg/mL四环素类、磺胺类和喹诺酮类药物混合标准工作液1 mL，于10 mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，配制成浓度为1 μg/mL的混合标准工作液。-20℃以下保存，有效期1个月。
4.26 0.1 μg/mL四环素类、磺胺类和喹诺酮类药物混合标准工作液：精密量取1 μg/mL混合标准工作液1 mL，于10 mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，配制成浓度为0.1 μg/mL的混合标准工作液。-20℃以下保存，有效期1个月。
5 仪器和设备
5.1 液相色谱-串联质谱仪:配电喷雾离子源。
5.2 分析天平：感量0.00001g。
5.3 天平：感量0.01g。
5.4 高速冷冻离心机
5.5 均质机
5.6 涡旋混合器
5.7 固相萃取装置
5.8 氮吹仪
5.9超声波清洗仪
5.10滤膜：0.2μm。
6 试样的制备与保存
6.1 试料的制备
取适量新鲜或解冻的空白或供试组织，绞碎，并使均质。
——取均质的供试样品，作为供试试料
——取均质的空白样品，作为空白试料。
——取均质的空白样品，添加适宜浓度的标准工作液，作为空白添加试料。
6.2 试料的保存
-20°C以下保存。
7 测定步骤
7.1 基质匹配标准曲线的制备
精密量取10 μg/mL混合标准工作液10和20 μL、1 μg/mL混合标准工作液20和40 μL、0.1 μg/mL混合标准工作液0、20和40 μL，分别加入7份经提取和净化的空白试料残渣中，45℃水浴氮气吹干，加复溶液溶解残余物并稀释至1 mL，配制成浓度为0、5、10、50、100、250和500 μg/L的基质匹配系列混合标准溶液，过滤，供液相色谱-串联质谱测定。以测得特征离子峰面积为纵坐标，对应的标准溶液浓度为横坐标，绘制标准曲线。求回归方程和相关系数。
7.2 提取
称取试料(1±0.02) g，于50 mL离心管中，加入Mcllvaine- Na2EDTA缓冲液8 mL，涡动1 min，超声20 min，于-2°C10000 r/min离心5 min，取上清液于另一50 mL离心管中。残渣加入磷酸盐缓冲液8 mL重复提取1次。合并两次提取液，混匀，备用。
7.3 净化
HLB固相萃取柱依次用甲醇5 mL和水5 mL活化，取备用液过柱，依次用水5 mL、20%甲醇水溶液5 mL淋洗，抽干5 min。用洗脱液10 mL洗脱。收集洗脱液，于45℃水浴氮气吹干，用复溶液1 mL，涡动1 min溶解残余物，14000 r/min离心5 min，滤膜过滤，供液相色谱-串联质谱测定。
7.4 测定
7.4.1 色谱条件
色谱柱： C18（50 mm×2.1mm，粒径1.7µm），或相当者；
流动相：A：0.1%甲酸水溶液；B：0.1%甲酸甲醇溶液；
梯度洗脱：梯度洗脱程序见表1；
流速：0.3mL/min；
柱温：35℃；
进样量：10 µL。
表1 梯度洗脱程序
7.4.2 质谱条件
离子源：电喷雾离子源；
扫描方式：正离子扫描；
检测方式：多反应监测；
电离电压：3.0 kV；
源温：100 ℃；
雾化温度：450 ℃；
锥孔气流速：30 L/h；
雾化气流速：1000 L/h；
测试药物定性、定量离子对及对应的锥孔电压、碰撞能量见表2。
表2四环素类、磺胺类、喹诺酮类药物的定性、定量离子及锥孔电压、碰撞能量
7.4.3.2 定量测定
取试样溶液和相应的标准工作液，按外标法定量，标准工作液及试样溶液中的四环素类、磺胺类、喹诺酮类药物响应值均应在仪器检测的线性范围内。在上述色谱-质谱条件下，四环素类、磺胺类、喹诺酮类药物标准溶液和试样溶液的液相色谱质谱图见附录A。
7.5 空白试验
除不加试料外，采用完全相同的步骤进行平行操作。
8 结果计算和表述
式中：
X——供试试料中相应的四环素类、磺胺类、喹诺酮类药物残留量，µg/kg；
A——试料溶液中相应的四环素类、磺胺类、喹诺酮类药物的峰面积；
Cs——对照溶液中相应的四环素类、磺胺类、喹诺酮类药物的浓度，μg/L；
C——从标准曲线得到相应的的四环素类、磺胺类、喹诺酮类药物的浓度，μg/L；
V——试样最终定容体积，mL；
As——对照溶液中相应的四环素类、磺胺类、喹诺酮类药物的峰面积；
——供试试料的质量，g。
注：计算结果需扣除空白值，测定结果用平行测定的算术平均值表示，保留三位有效数字。
9 检测方法灵敏度、准确度和精密度
9.1 灵敏度
本方法的的检测限为2 µg/kg，定量限为10 µg/kg。
9.2 准确度
本方法在10～500 µg/kg添加浓度水平上的回收率为60%～110%。
9.3 精密度
本方法的批内相对标准偏差≤15%，批间相对标准偏差≤20%。
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