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用于菌群结构谱或宏基因组测序分析的人类鼻腔微生物取样方法

2017-07-05 江舜尧 微生太

一、样本筛选

1、如果受试者存在以下情况,则需剔除:

(1)样品采集当天,鼻腔佩戴饰品或其他金属,记录鼻腔穿刺情况;

(2)流感病毒疫苗注射后未满 28 天。

2、详细调查任何时间段患有的鼻窦炎、鼻炎、上呼吸道感染的病史,并记录疾病治疗的时间段,病史包括鼻部检查、鼻腔外科手术。

3、对鼻孔临床检查(特别是前鼻孔),检查鼻腔是否有炎症、息肉、包块、鼻涕等。

二、准备材料

2ml 无菌螺旋盖收集管(如MoBio 收集管)、750μ l样本收集液(如MoBio buffer)、Mark笔、无菌棉拭子、自封袋、一次性手套、碎冰或冰袋(最好是干冰)及冰盒。

三、收集方法

1、用Mark笔在收集管管壁和管盖上写上样品名称,样品名称只能用英文字母或阿拉伯数字或两者的组合,而且字符数不小于3且不大于9;

2、利用无菌的棉拭子在鼻前孔黏膜层(约 2.5 cm 处)轻轻旋转式擦拭 2 次,蘸取黏膜上分泌物,缓慢抽出;

3、样本采集后应立即放入含有 750μ L MoBio buffer 的灭菌管中;棉拭子应多次按压管壁不少于 20 s,确保微生物从拭子转移到溶液中;左右鼻腔样本采集后,汇总成一个样本;

4、收集好收集管后,用自封袋封存,置于冰上,2h 内运输到实验室,-80℃保存备用。

备注:如果实在不方便购买保存液,可以将棉团剪下直接保存在没有保存液的保存管中,将保存管用冰或冰袋或干冰冷却,2h 内运输到实验室,-80℃保存备用。

四、注意事项

研究者采集样本时,应佩戴一次性无菌手套,避免接触实际采样区域及其周围区域;如果发生接触,手套可能被污染,应该立即更换手套。

五、送样方法

所有样品采集完毕后联系北京微生太科技有限公司取样。微生太将派送干冰到样品所在地,将样品放进派送干冰的泡沫盒,封严后交给物流师傅既可。



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