高效液相色谱-Part5：进样器与控温器
接着流路我们继续往下讲，接下来流路进入的就是进样器部件了。讲进样器之前先来普及下来Agilent的发展历史。
Agilent 1100
Agilent 1200
Agilent 1260
Agilent 1290
可能很多人都不知道Agilent和Hp之间的关系。先来看一下百度百科对安捷伦科技有限公司的介绍。
Agilent 是从Hp公司分离出来的，所以在Agilent 1100系列仪器上还贴有Hp的商标哦！
看下面的老古董！！！
图二：Agilent 1100系列正面图
回归正题，讲我们的进样器。现在大家用的都是自动进样器，当然也有人还在用手动进样器（心疼你3秒钟）。既然还有人用，那我们就先讲讲手动进样器。
图三：Agilent手动进样器装置图
这不是铁架台吗？的确，它有点像铁架台。上图标红处就是手动进样器，手动进样器其实也是一个六通阀（包括定子、转子密封垫、转子）与手动切换器（手柄）组成，还需要位置传感器电缆和平头进样针。图四是手动进样器的侧视图。
图四：手动进样器侧视图
进样器进样时主要经过Load 和 Inject这两个状态，也就是我们说的主路（Mainpass）和旁路（Bypass）。非进样状态下，流路一直处于Inject状态，但当我们需要进样时，首先需要将Inject状态切换到Load状态，如图五所示状态。
图五：Inject状态和Load状态（左进右出）
在Load状态下泵出来的流动相通过六通阀上的孔2和孔3直接与色谱柱子连接，并且针口和样品环连接。至少使用2到3倍样品环体积（如果需要更好的精度，则需要更多）的样品通过针口注入，以便提供良好的精度。样品填入环内，过量的样品通过和孔 6 连接的排泄管排出。
在Inject状态下泵出来的流动相通过六通阀上的孔1和孔2与样品环连接，通过六通阀上的孔3和孔4将定量环与色谱柱相连，将全部样品从定量环冲洗到色谱柱。针口和排泄管连接。
Note：为了防止虹吸，两个排泄毛细管的出口（孔 5 和孔 6）和针口必须装在同一水平面。具体细节参见图六。
图六：手动进样器剖视图（排泄毛细管与进样针口）
手动进样器是通过定量环来进行进样体积定量的，所以不同的进样体积需要使用不同的定量环，这就给不同体积的进样带来了麻烦。
那么问题来了：更换不同进样体积的定量环后仪器是否需要校验（定量环本身有证书）？
如果我不想更换定量环就像进不同体积的样品该怎么帮呢？
我们可以通过一个精密注射器往定量环中注入一定量体积的样品，就可以实现非满环进样。这种进样方式被称为部分装液法进样，而满环进样被称为完全装液进样。
其实，我们可以想想：如果有一个电机代替人手来回切换进样六通阀，有一个注射器主动取样注射，那不就是一个自动进样器了吗？
随着科技的进步和发展，目前总有个三种自动进样方式。
在吸入式自动进样器中，取样针安装在孔5，注射器安装在孔6处，通过注射器的吸取，取样针从进样小瓶中吸入液体并充满定量环。这种进样方式模拟了手动进样，所以也会有同于手动进样一样的缺点：必须满环进样且浪费样品，从下图可以看出，在这个过程中很多段管路被样品污染需要进行清洗。
图七：吸入式自动进样器原理图
这种自动进样方式其实就是模拟手动进样。在手动进样中进样针与孔5相连将样品推入定量环，从孔6排除废液。在推入式自动进样器中，取样针通过计量泵吸入一定量的样品，通过孔5注入定量环，废液从孔6排除，这种进样方式完全模拟了手动进样。但它的优点是可以实现部分装液进样。
图八：推入式自动进样器原理图
结合吸入式自动进样器和推入式自动进样器的特点，设计出一种新的进样模式：将进样针与定量环结合在一起。当六通阀处于Load状态时，计量泵与定量环以及取样针组成了一个新的注射器。取样结束后，对取样针进行清洗，然后扎入进样口。可以看出当六通阀处于Inject状态时，定量环、取样针、进样口一直处于流路中，所以交叉污染的可能性就降低了。没有什么是十全十美的，它也有它的缺点。从图中可以看出，进样口只能通过密封圈（类似于气相的进样隔垫）来密封，而且之前我们也说过，它们始终处于流路中，一直处于高压状态的，对密封的要求很高。
图九：整体样品环自动进样器原理图
进样器基本就是这些内容了，而且现在基本上用的进样方式都是整体样品环自动进样。但还有个地方需要大家去了解，取样针如何定位进样小瓶？
目前来说，可以分为取样针位置固定和取样针位置移动两种方式。
这种进样方式类似于气相进样塔进样，进样针始终固定于某处，由机械臂抓取不同位置的进样小瓶到固定位置后，进样针吸取样品。这种方式是在Agilent 1100系类的进样方式，很多人可能没见过。Agilent 1100机械臂的一些细节可以参见图十。
图十：Agilent 1100机械臂
其实，这种取样针位置移动的进样方式可以说是取样针位置固定的升级版，他只是将取样针与机械臂集合到一起，无需移动进样小瓶的位置就可以直接进样。Agilent 1100系列之后的HPLC都是采用的这用进样方式。机械臂的具体一些细节可以参见图十一。
图十一：集成取样针的机械臂
讲到进样器就要不得不说说另外一个部件，它不在流路内，而且是一个非标配部件，你能猜出它是什么吗？
它就是自动进样器恒温器，我把它称为“空调”，它的目的就是为了控制进样盘的温度。虽然它既可以降温也可以升温，但目前来说我还没听过要对样品盘进行加热的说法，基本都是控制样品处于低温状态，保持样品的稳定性。
我们来看看它是怎么工作的。
图十二：恒温器工作原理
这个部件了解一下就可以，无需挖太深。当我们没有恒温器且样品需要放到低温下储存时，我们就只能在进样前将低温样品放入进样盘来减小样品的降解。说到这，小编不由得想起了刚工作时艰苦的生活，实验室内液相室这样的：只有泵和检测器，然后外接一个手动进样器，就像两个鞋盒子摞在一起。做实验时，守在仪器旁边，看着图谱，吸着有毒气体。没有经历过如此艰苦条件的人就暗自庆幸吧！
课后习题
Q: 标出下图的流路方向以及各部件的名字？
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