动物行为实验方法专题：5/9孔探鼻操作箱（5-CSRTT）

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5-CSRTT是测量大鼠视觉注意过程的一种经典实验方法。这种范式要求受试者在大量试验中，在五个空间位置中的一个位置，以随机顺序检测短暂的闪光。为了完成这项任务，这些动物每天接受B30-40次训练，在此期间，它们逐渐学会在一定时间内对适当的光圈做出反应。如果他们没有回应，在错误的洞或不适当的时间回应，短时间的黑暗(超时)将被视为惩罚，不会给予奖励。

5-CSRTT提供了测试各种神经、药理学和行为操作对离散和稍微独立的行为控制措施的影响的可能性，包括辨别的准确性、冲动性、持续反应和反应潜伏期。同时可选择搭配光遗传、在体多通道电生理、钙信号实验使用，做多维度的行为学实验。

一、适应期

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  1. 控制饮食：一般控制饮食3天，每天的食物量按照每100g的体重给5g的食物来计算。

• 2. 称重：从食物限制的第一天开始，每天称每只老鼠的体重，直到它们达到自由进食体重的85-90%。然后，定期称重动物（例如，每周），以监测它们的生长。

• 3. 抚摸动物：从食物限制的第一天开始，每天轻轻抚摸大鼠2-3分钟，逐渐使动物适应实验者。

• 4. 食物口味适应：每天处理后，在笼子里放一些奖励丸，让大鼠以适应它们的口味，避免低钠症。

• 5. 测试箱适应：在食物托盘里放10个奖励丸，同时在测试箱的的五个孔中各放2个奖励丸。将大鼠带到测试箱，开始测试箱适应（15-20分钟），其中五种刺激灯、室内灯和托盘灯在整个适应过程中保持常亮。重复此步骤，直到大鼠可靠地吃掉所提供的所有奖励丸。

二、训练期

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  1. 一旦老鼠适应了测试箱和奖励颗粒，开始5-CSRTT训练。在训练阶段，五孔中和食物托盘中不得放置奖励丸。设置软件，训练期一般包括100次测试。在每次测试中，只有一个孔被照亮，并由计算机软件根据伪随机时间表实现该序列。这样，在100次试验中，每个洞都被点亮20次。（详见测试方法流程图和训练表）

• 2. 一旦动物达到至少30个正确测试的标准，则逐渐减少刺激持续时间，并增加ITI，直到达到目标。

• 3. 按照训练表所述训练动物并达到目标，通常需要25个回合，期间精确度逐渐提高。为了达到稳定的性能，再对动物进行6到10次训练，直到单只大鼠在几天内表现出可靠稳定的目标(准确率为80%，遗漏率为20%)。根据实验目标，未能达到这些标准的动物可能被排除为异常值，或保留以评估表现不佳的动物表现的重要变化。

• 4. 一旦测试数据达到要求，需要使用最后4d的训练数据作为标准，将动物进行分组进行正式实验。

三、主要考察指标

过早反应次数、正确反应次数、错误反应次数、错失次数、探洞潜伏期、获得食物潜伏期、探洞次数、获得食物后的食物槽重复进入次数等。

四、注意事项

1、每次训练或测试后，尽量保证每天在大致相同的时间给动物喂食

2、确保动物保持饥饿状态，有欲望获取足够的食物

3、尽量避免同一只动物不同操作箱内实验

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