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脑声常谈:动物抑郁行为实验手册丨新奇事物探索实验方法、指标评价及注意事项

上海欣软 葛加兵 动物神经科学与行为学 2022-09-21


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新奇事物探索实验也叫新物体识别实验,是一种较新的评价抑郁症的典型症状:兴趣缺失的行为学方法。其主要是研 究动物对新奇事物的探索行为,是基于动物先天的 寻求新奇的行为,并用此来评价抑郁症模型是否存在兴趣缺失症状的方法,一般情况下抑郁症模型动物在新奇事物实验中的探索行为减少。1998年Harris 等通过对慢性不可预测性应激模型大鼠研究第一次将动物对新奇物体的探索行为作为评 价抑郁症动物模型兴趣缺失的评价指标。




实验材料

硬件:新奇事物探索实验可以分为大鼠和小鼠测试,其中小鼠建议的测试箱规格为40cm*40cm*40cm的透明箱体,大鼠规格建议为72cm*72cm*40cm的透明箱体。

软件:需要使用VisuTrack动物行为分析软件,自动跟踪实验动物的头部、重心及尾巴,考察动物头部接触物体的潜伏期、持续时间、接触次数等偏好指标。

VisuTrack动物行为分析软件跟踪小鼠新物体识别实验的效果,可以看下这个视频:

实验方法

新奇事物探索实验分为适应期和测试期两个阶段,操作步骤如下 :

(1) 适应期:动物放入自发活动测试箱,适应5min后,取出,放回原笼;

(2) 测试期:在同一环境条件下引入一新物体 (应放入中心位置),再将待测动物面壁放入测试箱,开始实验;

(3) 检测时间应为10min。

评价指标

潜伏期( latency period):  实验开始至动物首次 主动探索(接触)物体的时间。如规定检测时间内,动物没有接触新物体,则潜伏期记录为检测时间。正常大鼠潜伏期多在130s 以内。


抑郁行为判断标准:与对照组相比有显著性增加(P<0. 05)。(注:动物对新物体的探索标准:动物口鼻在新奇物体≤ 2cm范围内,直指向新奇物体或直接接触物体。


注意事项
  1. 所有行为学实验都要求周围安静,实验应在隔音,光强度和温、湿度适宜且保持一致的行为实验室内进行。

  2. 实验前需要对实验动物每天抚摸1-2min以减少非特异性应激刺激对实验动物的影响;实验前需要提前至少3小时将动物带入实验室,降低动物对新环境的不安情绪。

  3. 实验过程尽量是同一个人在每天的同一个时段来做;若多个人多批动物重复一个实验更有说服力。

  4. 进行旷场检测时,需要对实验动物进行筛选,有些实验动物在水平方向或垂直方向的活动情况显著低于同批动物平均水平,则需要将这些动物预先剔除。

  5. 每次小鼠的放置位置尽量统一,背朝物体,且距两物体距离相等。

  6. 做下一只小鼠之前必须用酒精除去气味清洗实验设备,用卫生纸擦干净,保证不要留下排泄物和味道。

  7. 物体尽量为圆形较好,正方形或者长方形有四个角,动物可能会产生偏好。

  8. NOR实验对动物各方面影响较小,而其他行为学实验(如强迫游泳、水迷宫、悬尾实验)对小动物影响较大,因此同一批动物进行不同行为学测试时,应先进行NOR实验。

故障排查表


序号问题现象问题原因解决方法
1老鼠在旷场箱攀爬墙壁室内的压力源检查实验条件:温度、湿度、光度、噪音及实验员自身的气味(香水、口香糖、音乐)
老鼠对仪器和物体缺乏好奇心(可能在环境中大量暴露后发生)将老鼠替换到旷场区域中与活动开始时相同的位置
旷场墙壁太低考虑改变旷场箱的大小
2一只老鼠不符合标准压力、紧张将小鼠排除在分析之外
大都数老鼠都达不到标准实验室内的压力源或小鼠在测试前需要更多的处理检查实验条件:温度、湿度、光度、噪音及实验员自身的气味(香水、口香糖、音乐)
对物品缺乏好奇心,恐新症使用不同的物体
不适当的饲养条件检查住房条件:温度、湿度、光度、环境噪音,每个笼子相对于笼子大小的动物数量
焦虑的老鼠紧张增加习惯时间
3老鼠根本不会探索这些物体(花在僵直或梳理上的时间)压力将此老鼠的分析排除在外
老鼠对仪器和物体缺乏好奇心(可能在环境中大量暴露后发生)使用不同的物体
4记忆性能再现性差室内的压力源检查实验条件:温度、湿度、光度、噪音及实验员自身的气味(香水、口香糖、音乐)
焦虑的老鼠紧张使用长期的习惯性方案,甚至增加习惯化时间



   关于

上海欣软

上海欣软是一家集研发、生产、销售于一体的的高新技术企业,是专业的动物行为视频分析方案解决商。我司专注于动物神经科学与行为学产品的研究且致力于向高校、科研机构等领域提供实验室一体化方案,业务范围遍布全国上百家实验室。公司主营产品均为自主开发, 拥有100%核心技术,同时公司拥有数位动物行为学仪器行业从事10年以上的资深服务工程师,可为我们的产品提供全方案的售前及售后服务。我司开发的仪器设备都是科学研究所必备且不可替代的。


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2、SuperMaze软件

3、FishTrack斑马鱼分析软件


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1、自身给药、条件恐惧、斯金纳、震惊反射(PPI)、跑步机、各类经典迷宫等

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4、睡眠剥夺仪、饮水偏好测试仪、体温维持仪、智能热板仪、转棒疲劳仪、鼠尾光照测痛仪等


神经电生理:


1、光遗传、无线光遗传

2、光纤记录系统(单通道、多通道)

3、电生理信号采集系统(脑电、肌电等)



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