为了更加快速的，操作更加方便的，同时能够最小化消旋的把全保护的多肽片段从CTC树脂上裂解下来，这里我们使用了HFIP（6-氟异丙醇）：DCM=1:4的混合物来进行裂解。使用酸不稳定的CTC树脂进行多肽的固相合成有很多优势：比如在树脂装载第一个氨基酸时由于装载条件温和，不使用缩合剂，比起其他树脂特别是Wang树脂，能够最大限度地抑制消旋；还能够有效抑制DKP副反应，当使用片段缩合策略进行多肽固相合成时，我们可以使用CTC树脂便捷的得到全侧链保护的片段肽。使用冰乙酸-三氟乙醇-二氯甲烷按照不同比例配成的裂解液去裂解含有叔丁基，Trt侧链保护基的肽链时，在裂解率，产率和选择性裂解方面得到了最好的结果。
通过这种切割方式获得的未经纯化的，含3-10个氨基酸残基的全保护多肽片段通常纯度会高于95%。因此，这样的多肽片段在原则上也许可以不经过纯化直接用于环肽的制备或直接用于固相法或液相法的片段缩合反应。使用通过以上方法获得的全保护多肽片段进行液相缩合或者制备环肽时必须严格控制由裂解液引入的羧酸衍生物。然而，上面提到的裂解条件有一个明显的缺点，那就是残留的羧酸衍生物必须通过额外的后处理工序来去除。为了克服这一缺点，一种新型的、快速和非常简单的裂解方法已经被研究出来，它允许人们使用极其温和的条件。该方法可提供高收率和高纯度的全保护肽，可直接用于片段缩合和多肽环合反应，而无需预先去除羧酸衍生物。多肽片段研究（图2），通过温和的成熟的Fmoc策略，选用CTC树脂进行。得到的肽树脂使用前面所述的HFIP（6-氟异丙醇）：DCM=1:4的混合物来进行裂解。其中，HFIP是一种非常弱的酸，能够在不脱除侧链保护基的情况下把多肽从肽树脂上裂解下来，只有在非常不耐酸的Trt侧链保护的Ser, Thr和Nim of His的特殊情况下，在裂解时才可以观察到少量的侧链氨基酸去保护肽。因此建议在肽链中替换掉这种不稳定的侧链保护基。HFIP与DCM的混合物作为全保护切割液有明显的优势，表现在能够有效溶解疏水性的全保护片段肽，也容易被减压除去。所得到全保护片段经过质谱测试分子量正确。裂解在室温氮气保护条件下反应3min完成。
在裂解过程中，树脂显示出典型的紫红色或红色，有时稍后消失。除了一些Met残疾被氧化的杂质外，对HFIP-DCM裂解产物的详细HPLC研究(图3)表明，在裂解介质蒸发后，受保护的肽段具有高纯度的特征。此外。根据这种新方法得到的肽与根据迄今应用的标准程序用醋酸衍生物处理得到的肽没有区别。
尽管本文报道的非常温和的分裂过程没有外消旋作用，但已经对具有c端His和Phe的模型肽进行了详细的测试，这些肽往往表现出强烈的外消旋作用。采用上述标准方法合成多肽H-Leu-His(Trt)-OH A和对照品H-Leu-D-His (Trt)-OH B;多肽H-Leu-Phe-OH C和对照品H-Leu-D-Phe-OH D，经HFIP-DCM裂解得到。用HPLC法对产物进行非对映异构体分离分析，从相应的峰面积确定外消旋化量。两种C端氨基酸的外消旋化程度均小于0.1%。这些数据表明，这种新的裂解方式不会引起严重的C-端氨基酸消旋。综上所述，这些结果清楚地表明HFIP-DCM混合物非常适合从CTC树脂中裂解得到全保护的肽段片段，代表了固相肽合成中具有实际重要性的发展<END>
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