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储存10年,20年,还是“永久”,细胞到底能冻存多久?

James 干细胞之父 2023-01-13

根据国际权威机构研究结果显示,细胞也会老化,其自我再生能力亦会随着年龄的增加而衰退。


人体有自我修复的能力,但每一次细胞修复与自我更新,除了端粒酶保护能力下降外,难免导致基因突变的发生,而此现象是会不断累积。


        因此,为了有效预防疾病,预先将当下健康年轻态的细胞,通过安全采集并超低温冻存起来,在有抗衰防病之需时再回输体内来对抗疾病、延缓衰老、增强抵抗力,就成为了未雨绸缪的重要抉择。


        储存自己健康时期的细胞,就如同储蓄未来的生命与健康,为自己和家人的幸福储存一份意义非凡的保障。

为什么用冷冻低温的方式来保存细胞呢?

从冻存精子的历史说起 

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冻存技术不断改进


60 年代,美国纽约血液中心 Rowe 实现了红细胞的低温保存。1980 年,他将在液氮温度下保存了 12 年的红细胞复苏后进行检查,没有发现任何生化和功能上的变异,从而从实践上证明了生物材料可以在低温下长期存活。


80 年代以来,理学和工程学进入低温保存研究领域,低温工程理论及实用设计原理的不断更新及应用,低温生物学的研究快速发展。


20 世纪以来,人类的科学研究进入细胞水平阶段,开始对生物和作为食品原料的生物材料进行低温保存处理。到了 20 世纪末,随着科学方法的不断进步以及冷冻方法的不断完善,低温保存技术广泛的应用到了临床上。



2015 年科幻小说《三体》编审之一、重庆女作家杜虹找到成立于 1972 年 的美国阿尔科生命延续基金会(Alcor)冷冻大脑引起轰动。


工作人员在模拟人体冷冻过程

注射一种特殊的玻璃混合物到要冷冻的遗体里

防止冷冻后,身体里面会结冰


目前,世界上还有较大两家机构提供冷冻人体的业务,分别是成立于 1976 年的美国的人体冷冻研究所(CI)和成立于 2005 年的俄罗斯的 KrioRus 公司。Alcor 在 1976 年进行了首例人体冷冻术,对象是该基金会的创始人弗雷德·钱德林的父亲。



细胞到底可以冻存多久?


理论上可永久储存

提起脐带血,大多数人并不陌生,脐带血对于储存温度和储存环境的要求非常高,只有深低温冻存状态下才能使细胞处于休眠状态,细胞中的酶被抑制,不会发生电离损伤,才可长期冻存。细胞冷冻储存在-70℃冰箱中可以保存一年之久;细胞储存在液氮中,温度达-196℃,理论上储存时间是无限的。


沉睡15年,复苏后活性94.2%

美国脐带血干细胞生物学研究权威Broxmeyer小组的体外和动物实验研究表明,冻存15年以上的脐带血造血干细胞仍可维持其原有的体外增殖、分化、扩增和体内植入潜能。

11岁的湖南女孩晓颖2014年12月在湖南确诊为急性髓细胞白血病。为更有效及时地进行治疗,晓颖一家听取当地医生建议,转院到广州南方医院,希望能在南方医院接受脐带血造血干细胞移植。当地脐血库迅速为其找到了一份配型6/6相合的脐带血,没想到的是,植入自己体内的这份脐血是2000年在广东省妇幼保健院采集的,冻存时间长达15年,按年龄来说,这份脐带血居然还是她的“姐姐”这份脐带血刷新了当地脐血库冻存时间最长的临床应用记录,“脐血姐姐”虽沉睡了15年,但它依然生命力旺盛——移植前复苏活性检测高达94.2%。


《沉睡15年“脐血姐姐”救11岁白血病妹妹》


《沉睡11年脐带血救活武汉妈妈 零下196度罐里冻存》


2012 年,北京市道培医院救治一位 49 岁,体重达 87 公斤的白血病患者, 使用了一份 1998 年已经冻存 14 年的干细胞, 复苏后细胞活性达 96%。


2017 年北京使用一份采集于 1998 年 5 月,冻存 18 年 11 个月的干细胞,复苏后细胞活性为 97.16%。

广东脐血库在 1000 多例的出库中,冻存年限超过 10 年的已有 58 例,平均细胞复苏活性约达 90%完全达到临床应用需要。其中有 1 例冻存了 15 年复苏活性仍达到 94.2%,于 2015 年救治了广东省 11 岁急性髓细胞白血病女童患者,目前其身体状况良好。

美国脐带血干细胞生物学研究权威美国印第安纳大学的 Broxmeyer 教授团 队在 2011 年《BLOOD》杂志发表的体外和动物实验研究结果证明,冻存 23.5 年 的干细胞仍可维持其原有的体外增殖、分化、扩增和体内植入潜能

冻存细胞是一项看似简单却极具技术含量的系统工程,脐带血放入液氮正式储存前,为了防止造血干细胞在低温环境中破损,需要对脐带血加入冷冻保护剂,进行降温处理。在降温的过程中,要利用专业的计算机程序逐步缓慢降低温度,直至-90℃后才可以转入-196℃深低温液氮中进行长期冻存,方能保证和不影响干细胞的活性。

在冻存过程中,所有液氮罐需由管道相连,终端连接液氮存储塔,对已经储存的脐带血进行24小时不间断补充液氮。为了保证脐带血存储环境的安全性,还需使用闭路监控、红外线报警、液位监视、双电路供电、氧含量实时监控等24小时不间断监控系统严格监控,至此,一份脐带血才能长期保存下来供临床使用。

科普视频:免疫细胞储存

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