做实验最怕什么?早起抢仪器?熬夜写报告?......都不是。这些是家常便饭,最怕的是辛辛苦苦做了很久的实验,才发现买的实验试剂是假货!那真叫一夜回到解放前。
题图无关
此前,《自然》发表了题为《中国科学家与假冒试剂的秘密战争》一文。根据文章描述,中国存在着一个利润丰厚的假冒试剂市场,科学家们在想方设法对付这些假货。
2016 年,Nature通过对 1576 名来自不同领域的科学家进行了调查(其中生物学家有 703 名),得出了令人震惊的结论:超过 70% 的研究人员无法复制其他科学家的实验结论,超过 50% 的研究人员无法复制自己的实验结果。
2017 年,Nature 又发文,David Cryanoski 对中国的假冒试剂产业进行了深度剖析,故事从一位科学家走进楼下的打印店开始:他惊讶的发现,这家打印小店竟然在大量制作 Abcam 和 CST 的抗体标签。
假科学试剂在中国并非是个新现象。相反,它们已经存在多年,对科学家们造成极大困扰。国内的科学网联合《科学新闻》杂志关于科研试剂耗材造假现象做过网络问卷调查,在将近500份问卷中,有43%的人曾使用假冒伪劣试剂耗材,比例几乎达到一半。
目前市场上试剂产品假货重灾区主要集中在试剂盒、细胞、抗体这三种领域。此前我们就得知不少科研人员都有过买到假货的遭遇:
季同学——
为了完成毕业论文,买了ELISA试剂盒回来做,结果却傻了眼。眼看时间越来越紧迫,各种小心求证才知道买到了假货(售后服务态度还很好,说是各大医院都用也没问题啊)幸亏早发现,没耽误毕业。
贾同学——
买了不同批次共8瓶胎牛血清,培养时间花了不少,培养效果却变幻莫测。钻研了好长一段时间后才发现,只有一个批次是真货,其他的都是假货。
施同学——
在实验最关键的时候,购买了一批知名品牌抗体,实验结果却始终无法解释。一直以为是自己实验设计的问题或者操作技术有问题,起早摸晚各种尝试调整验证,没想到最后发现竟然大部分抗体是假货。
科研造假严重影响科研结果,让科研工作者花费大量时间、金钱、精力做的研究没有成效的事并不鲜见。有的造假手段隐蔽性很强,这种ELISA试剂盒,也会用某种指标的产品冒充其他指标试剂盒。但比之前VEGF一种产品包打天下的做法“高明”之处在于,用于替换的指标更加多样化和隐蔽,让人防不胜防。2014年就有一个典型案例,当时多伦多大学研究人员的Ioannis Prassas博士在生命科学国际核心刊物Clinical Chemistry上撰文指出,为了验证他们一项重大发现——人体新型的胰腺癌生物标志物CUZD1,他和他的研究团队整整忙碌了两年时间、花费的研究经费超过五十万美元,但一直失败。随后Ioannis Prassas博士使用USCN和RD公司两个供应商的试剂盒做对比实验,发现USCN生产的CUZD1试剂盒中的抗体被验证无效。他在论文中提到,对比实验结果显示,CUZD1并未与目标抗原结合,而是与另一种完全不同的抗原CA125结合,他这才意识到失败的因素是一支包含在CUZD1 ELISA试剂盒中的抗体。更早之前的2012年,美国另一家使用USCN供应的试剂盒的研究团队也遭遇了相似情况。来自阿拉巴马大学伯明翰分校医学院肾脏科的Orlando M.Gutiérrez与其他四名来自哈佛医学院的学者,在医学行业权威刊物American Journal of Nephrology发文称,他们用RD公司的抗体和蛋白去验证USCN生产的HJV ELISA试剂盒,发现USCN公司的ELISA试剂盒存在严重的特异性问题,导致实验失败,团队因此蒙受巨大损失。这些事件为科学家们带来重大损失,也让整个行业再次意识到ELISA制假对科研的严重危害性。医学的发展离不开基础和应用研究,而科研用的ELISA试剂则是最为重要的科研工具之一。目前来看,作为基础科研工具之一的科研试剂,其所处行业的混乱程度与科研实验的严谨要求并不匹配。科研已经很惨苦了,再买到假货,毕业、晋升都会受到影响,真心受不起。尤其对于相关经验不足或是受限于实验经费的科研工作者,更容易落入陷阱,致使自己的实验迟迟没有进展或者出现了连自己都判断不了是真是假的结果。以大家常用的ELISA试剂盒为例,不良商家到底是如何造假的呢?今天,我们要为大家揭开其造假的各种黑幕,供大家互相学习和了解,尽量避免买到假货。如果公司成立时间不长,试剂盒种类齐全,各种种属,什么指标都有,包括比较偏门的指标,打开产品检索目录,上万种试剂产品在列,那购买时就需谨慎。大多知名品牌为了保证产品质量,保证品质的稳定性,不会搞出口分装,尤其是ELISA试剂盒。因为试剂盒中试剂都是一一对应的,很难给分装试剂的空间。所以ELISA试剂盒进口分装,基本上是假货无疑。如果购买了这个公司两个不同的试剂盒,可以将两个盒子中的标准品交叉做实验,如果这两个指标没有什么序列的同源性,但交叉试验后,标准品数值相似甚至相同,假货无疑。用TGFβ以假乱真,TGFβ是一类在大多数哺乳类动物中广泛表达的物质,其种属间抗原的氨基酸序列同源性达到100%,但在实验过程中会随其他因子影响而导致表达水平发生相应变化,“这些变化一般的人很难察觉,有了这些万能指标,公司就能以假乱真。”用不同种属的试剂盒替代,由于同一种蛋白有一定同源性,实验结果的准确性可能会差一点。生产厂家生产出一个自认为合理的人造蛋白,人造蛋白经免疫后生产出抗体,这个抗体与人造蛋白结合是没问题的,但拿去与生物体的天然蛋白结合,就存在一定风险,甚至不一定能够检测。厂家并不会去验证通过这种方式生产的抗体是否对天然蛋白有效。少数无良的生产商以一些国产甚至来历不明的试剂以次充好。反正,瓶子是回收的,标签是打印的,质量是无法保证的,说法呢,都是讲国外便宜水货进口的。这也是抗体造假时的常用伎俩。将一份抗体稀释成五份销售,类似于注水牛肉,导致抗体效价严重下降,与说明书严重不符。总之,不良商家的造假手段五花八门,科研人要小心对待。本文整理自:博士德(ID:BOSTER-1993)等