改善RNA提取质量的方法 | RNA专题
小编有话说
RNA提取小课堂又开课啦~今天我们来讲讲一些改善RNA提取质量的方法，希望对小伙伴们在日常的实验中能有所帮助。那么，接下来——
1、在收获组织及细胞死亡之后，应立即灭活内源的RNA 酶，以防止RNA 降解。
灭活内源性RNase：
①细胞裂解液收获的样品，立即匀浆；
②用液氮瞬间冻结样品，组织块必须保证足够小，在浸入液氮的瞬间就能冻结，以确保RNA 酶瞬间失活；
③样品置于RNALater，组织样品切片一定要够薄（<0.5 cm）。
2、使用正确的细胞或组织储存条件，在样品用液氮瞬间冻结之后，应该储存在-80°C，样品在RNA提取之前应避免反复冻融，瞬间冻结的组织应该首先在超低温条件下先研磨成粉，然后置于裂解液中进行匀浆。
3、彻底匀浆样品。
4、在RNA 提取过程中对样品的预处理：对于脂肪含量高的组织，像脑组织和脂肪组织得到的裂解液，就需要通过氯仿抽提来去除脂类，从而提高RNA产量；许多植物组织中富含多酚和多糖，会降低RNA的质量和产量，用天根DP441试剂盒可去除这些难以处理的成分。
5、在组织破碎的过程中，应保证样本始终处于低温状态，或样本始终浸泡在裂解液中，组织破碎速度要快，尽可能减少RNase的作用。
6、选择最好的RNA 分离方法：根据组织样本本身的结构特点，选择最佳的抽提方案。
7、DNase 处理：提取RNA的过程中必须用DNaseI处理纯化的RNA 样品以去除残留的DNA 污染。
8、必须保证一直使用无RNase 的枪头、试管和溶液，手套也应经常更换；实验前移液器、工作台、玻璃器皿，都必须用RNaseZap擦拭。
9、正确的沉淀：纯化得到的RNA 可能需要通过沉淀来浓缩，以满足一些下游应用的需要。醋酸钠(NaAc) 沉淀（加1/10体积的3 M 醋酸钠、3倍体积的无水乙醇，-80°C 过夜）可以很好地回收RNA； 如果需要回收低浓度的RNA，可以采用共沉淀如糖原glycogen，沉淀后，注意避免RNA 沉淀过分干燥，因为这可能导致很难重新溶解。
10、total RNA于-80°C保存， RNA 溶液应分装，避免反复冻融损伤RNA，并预防偶然的RNase 污染。
小编这么呕心沥血为大家整理了这么多关于RNA提取的资料，小伙伴们是不是该给小编一个爱的么么哒？要是能顺便再帮小编点个赞，那就……你懂得~
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