希望本视频能够给那些在组织消化和单细胞悬液制备遇到困难的实验室小伙伴以启示,部分细节镜头停留时间较长。本视频以10×Genomic平台的单细胞转录组为例,涉及的主要实验步骤都记录在了视频中,步骤包括
1. 文献资料查询,样本解离方案确定;
2. 样品接收(样品接收时的温度检测记录);
3. 组织解离器具准备;
4. 组织剪切和清洗(去除血渍等,剪切程度,过筛);
5. 酶液中组织的消化(组织转移,水浴,计时,中间观察);
6. 离心收集细胞(离心);
7. 去除死细胞提高细胞活率;
8. 自动化细胞技术仪对细胞进行计数;
9. 10×芯片进样操作和上机操作
10. 生成的GEM(油包水)转移回收
大家是不是很想知道组织解离消化的具体步骤呢?别着急,我们即将上市的工具书《单细胞测序一本通》的第五章,会有将近50页的篇幅为大家详细描述组织解离和单细胞悬液制备的各种细节。
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