单细胞悬液制备注意事项之离心速率和时间 | 单细胞知识微问答

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利用10X Genomics和BD等单细胞平台进行后续细胞标记之前，如何对组织进行解离消化和制备成功的单细胞悬液需要有非常多的细节注意。

今天，就给大家带来制备单细胞悬液的注意事项之-离心速率和时间

• 理想的离心结果是得到不紧密的细胞沉淀，上清液中残留的细胞最少。

• 过度离心可能会降低细胞活力，而且紧密堆积的细胞沉淀可能需要额外吹打以重悬细胞，由于剪切作用而损伤细胞；

• 较大的细胞需要以较低的速度离心或较短的时间以保持细胞完整性；

• 推荐的初始离心条件为150rcf、3分钟，对于较小细胞（例如PBMC），在室温下离心条件为300rcf、5分钟。一些非常小的细胞可能需要更高的速度（例如400rcf）或更长的离心时间（例如10或15分钟），但需要注意过高的离心速度会损害细胞的完整性和活力

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