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如何做环状RNA的引物设计(上)? | 跟我学

刘建宁 联川生物 2022-05-21

今年以来,国内环状RNA(circRNA)的研究热潮不断升温,越来越多的circRNA如春笋般涌现出来。由于circRNA的结构特殊性,如何采用定量PCR技术对circRNA平行验证成为当下一个热点问题。今天,小编邀请技术部的刘建宁老师继续为大家实例讲解circRNA的引物设计。由于内容丰富,circRNA的引物设计将分上下两篇呈现给大家。

言归正传,我们以环状RNA数据库circbase(http://circbase.org/)中收录的hsa_circ_0063162为例,为小伙伴详细介绍从circRNA序列获取到引物设计的全过程。马上动手试试吧!

  • CircRNA信息查找

1. 首先访问circbase数据库(http://circbase.org/),如下图所示。


2. 在Search上方的框中输入:hsa_circ_0063162,点击Search进行查找,查找结果如下图示。


  • CircRNA序列下载

3.点击
项目下的“chr22:36889679-36889850”,操作界面会跳转至UCSC数据库,界面如下图所示。


4.点击界面左方
按钮,会打开新的界面,如下图所示。


5.点击
按钮,进入序列下载界面,如下图所示。


6.按照默认参数,点击
按钮获取序列,进入界面如下图所示。


7.将序列复制粘贴至记事本(.txt)中即获取了所需的circRNA序列信息。

小伙伴你会了吗?试试获取其他的circRNA序列吧!

明天刘老师会接着讲解如何使用Primer 5进行circRNA引物设计。

点击下方”阅读原文“,查看”如何做环状RNA的功能验证?“

还不知道环状RNA是什么?!

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