20230407【回放】-张潇颖丨造血干细胞年轻化创新策略——调整基质硬度构建体外骨髓微环境
精选提问：
1.GELMA 孔径测量，是冻干后测量的吗？实际用的是冻干的胶吗？
2.老师，请问竞争性移植实验方法学您能介绍一下吗，非常感谢。
3.有文献表明HSC 线粒体膜电位低可以更好维持其自我更新能力，和本文章的结果是不是有点冲突？
4.请问种到胶里是流式分选的五标的HSC吗？
5.人源HSC向淋系分化在体外有好的诱导体系吗？
6.请问这种培养方式有可能用于培养原代的、病人来源的白血病细胞吗？尤其是像急淋白血病，以往这些肿瘤细胞在体外不能单独培养。
7.潇颖，非常棒的工作。我有一个疑问，造血微环境基质细胞其实有很多种，体外培养条件下，只是添加了BMSC，就很好很好的模拟效果。那其他的内皮细胞，神经细胞的作用不大吗？
8.请问gelma是怎么实现3D培养的呢？像matrigel一样重悬然后直接孵箱凝固嘛？还是光固化？如果想要收取细胞进行WB等实验要怎么样取出呢？另外硬度怎么实现呢？是商品化已经确定浓度直接进行添加就可以嘛？
9.有没有观察在3D共培养前后HSC在数量上的变化？
10.GelMA的硬度如何精确的调整，能具体说说吗？Matrigel里有很多促生长的因子，本研究中水凝胶中还有没有加入特殊的因子呢？
11.请问HSC在3D培养条件下可以培养多久，HSC的干性是否可以在一定程度上维持，有无进行检测？另一个问题：低硬度可以促进HSC的年轻化，那如果老年骨质疏松的情况下，HSC的状态会怎样呢？
12.观察到衰老过程骨髓基质硬度增加，是首次报道的结论吗？是否分析过发生此变化的可能性原因？
13.请问您有观察过不同硬度水凝胶的细胞增殖变化嘛？2D和3D变化趋势一致嘛？
14.matrigel可以3D培养吗？
15.请问gelma本身是否具有免疫原性呢？
16.nature materials去年的文章提出骨髓粘弹性影响了单核细胞分化和功能，请问gelma属于线性弹性凝胶还是粘弹性水凝胶，有没有考虑过这两种弹性的区分呢？
17.刚才提到说用酶消化GelMA解离得到HSC做下游实验，请问用的是什么酶？消化多久？
18.恭喜潇颖，非常棒的工作。请问，是否能在这个3D培养体系中，对HSC进行一些基因干预实验？
19.请问GELMA光固化的光照参数是多少呢？
20.BMSC或者3D培养系统对HSC的扩增有影响吗？有没有做相关实验？
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演讲人介绍：
张潇颖：2018年毕业于苏州大学，现为同济大学生命科学与技术学院岳锐课题组博士研究生。主要研究造血干细胞衰老机制与年轻化策略，研究成果发表于Cell Stem Cell、PNAS、Circulation Research、Bone Research、EMBO journal等杂志。
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