海洋学子（392）| 从细胞培养开始的科研之旅——2015级本科生李剑焕，2017级本科生金凡茗、赖明彦

我们小组项目的研究建立了四种珠江口重要海水鱼类的细胞系，分别为银鲳鳍条细胞系（PaF）、叫姑鱼脑细胞系（JgB）、弓斑东方鲀鳍条细胞系（ToF）和黄鳍鲷鳍条细胞系（AlF）。对于这四株细胞系，首先进行了细胞鉴定及分析其细胞特性。我们绘制了生长曲线，探讨其生长的最适温度与血清浓度；通过细胞冻存与复苏，进行细胞的保存；核型分析中进行染色体计数，初步探讨其核型；通过转染，检验其是否可作为外源基因操作的理想工具。在此基础上我们还研究了其对重要的病毒性病原体——出血性败血症病毒(VHSV)、赤点石斑鱼神经坏死病毒（RGNNV）的敏感性。首先用病毒感染细胞，观察细胞病变效应，初步判断细胞系是否对该病毒敏感，随后通过qRT-PCR，病毒滴度分析以及透射电镜观察检验病毒在受感染细胞内的复制。

四株海水鱼细胞系的建立，为后续海水鱼类的研究提供体外操作平台，并丰富了我国海水鱼类细胞系资源。同时，建立对VHSV及RGNNV高度敏感细胞系，可为这两种病毒的防控提供研究平台。

用来建系的鱼类样本

银鲳鳍条细胞

项目小组一共有三名成员，小组长是2015级的李剑焕，有两名2017级的组员，赖明彦和金凡茗。申请项目时，李剑焕同学为海洋生物方向三年级本科生，已经过一年的生物基础知识的学习，以及一些科研经历的积累。当时赖明彦和金凡茗两位成员大一下学期刚开学，尚未分方向，若说学过的相关课程，那就只能算上“普通生物学”啦。但这挡不住他们对生物的热爱和对科研的好奇与兴趣，便一同联系了老师申请了课题。大家所处阶段不同，在这个过程中也有着不同的所获所感。

项目研究过程中，我们对书本中的科研有了更多更深的理解，不再只是纸上谈兵，支撑理论的实验也十分重要。这为期一年的学习过程，从最养细胞开始，充以RNA和DNA提取、核型分析、qRT-PCR，我们不知不觉中完成了不少实验，提高了实验技术，锻炼了实验思维。虽然最初，会因为没有成功而有些失落，但后面想办法解决问题后的成功带来了发自内心的感到喜悦。

细胞培养，日常细胞观察

整个项目令人难忘着，关于它的方方面面。我们养的细胞，我们做过的实验，统计数据时的辛苦，实验中等待的无趣，细胞被污染时的愁闷，实验成功时的喜悦，等等等等。失败也是难忘的，一次次的失败。虽不是什么可喜的事情，真正说来也不愿与人提起，但一次次的失败与挫折确确实实是研究期间颇有感触与有收获、许多年以后回想起来仍会记忆犹新的事情。

虽每次失败后会查阅资料、积极思索、改进，但也有时百思不得其解，久久找不出问题所在。有时会伤心难过，就像满怀希望播种的小种子，百般精心呵护后，它却久久沉寂。在失败许多次后，终于，等到成功的那一刻时，彻彻底底的开心，空气里都是笑。一个小小的结果，背后却有许多付出。枯燥重复的实验使我们变的更耐心仔细，一次次的失败磨练了意志，也提升了解决问题的能力。科研的道路很长，我们现在经历一些小挫折只会让我们成长，所以不必担忧，享受实验的过程就好啦。

核型分析实验，染色体制片过程

十分感谢我们的指导老师贾坤同副教授，在项目进行过程中积极与我们交流，给予我们指导，让我们不断开拓思维、提高自己。也感谢贾鹏博士后在我们实验过程当中无微不至的帮助，指导我们闯过了一道道实验难关。

在与实验室研究生师兄师姐们一起工作的日子里，也体会到科研工作者的专注、慎思、明辨、笃行，督促着我们时时自省、不可怠惰，并不断鉴之以自勉自律，不断成为更优秀的人。同时也深深感受到了科研的辛苦与不易，在此向科研工作者们致以诚挚的敬意。

山水一程，走过这趟，带着满满的收获，继续向前吧。科研的道路很长很长，莫畏惧山高水远。

合照（从左至右：李剑焕、金凡茗、赖明彦）

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来源：2015级本科生李剑焕，2017级本科生金凡茗、赖明彦

编辑：杨荣南；初审：林奇琦

审核：汪帼英、韩墨香、林奇琦、李颖、刘亚婷、曾瑛

审核发布：潘云智