专业分享 | 贵州省新型冠状病毒核酸检测质量现场考核结果分析

作者：黄山  吴娴  冯勤颖  王济林（贵州省临床检验中心）

　　2019年12月以来，武汉市部分医疗机构陆续出现不明原因肺炎病例，现已明确为新型冠状病毒肺炎（Novel Coronavirus Pneumonia, NCP），NCP是由2019新型冠状病毒（2019 Novel Coronavirus, 2019-nCoV）感染引起的，而确定诊断的金标准就是能在患者体内找到2019-nCoV的存在，核酸检测就是检测病毒基因中某些特定核酸序列的存在，因此从方法学层面考虑其作为实验室诊断金标准没有任何疑问。同时，国家药品监督管理局启动了《医疗器械应急审批程序》，已批准多家企业的新型冠状病毒核酸检测试剂盒上市。近期，新型冠状病毒核酸检测阳性率问题备注社会关注。贵州省为了切实做好“外防输入、内防扩散”工作，及时有效发现和控制传染源，规定了对五类人员（疑似病例、与确诊病例的密切接触者、每天发热门诊就诊的发热病人、武汉市湖北省等重点疫区返黔的居家隔离和集中隔离人员、每天由武汉市湖北省等重点疫区新的来黔返黔人员）开展全面核酸检测。贵州省卫生健康委在原来的10家疾控中心检测实验室的基础上，新增21家医疗机构和3家第三方检验机构实验室，作为全省新冠病毒核酸检测指定实验室，一共34家。为保证检测结果，了解各实验室检测能力，以及检测试剂的质量状况，贵州省临床检验中心组织了针对省内34家新型冠状病毒核酸检测实验室进行技术考核，现将相关结果汇报如下：

1.材料和方法

　　本次考核品一共分10个批次，包括阴性、弱阳性和阳性。阴性样品为稀释液，阳性样品采用装甲RNA技术，将三个目标RNA序列(含 ORFI ab、N和E基因)用噬菌体蛋白外壳加以包裹形成，其结构类似于天然病毒，以还原真实的样品，然后进行培养，获得培养液，对收获的假病毒培养液进行初步定值，然后用阴性稀释液稀释至所需浓度，弱阳性样品为一般检测限的3～5倍含量，阳性样品大约为105的含量，规格:1.0mL/管。所用考核样品由专人按照冷藏条件送到各检测实验室，在事先不通知的情况下，在规定时间进行检测和回报。

２.结果

　　本次考核发放样品34家，至规定时间回收结果30份。在30家检测机构，总符合率为100%，其中阳性样品符合率、阴性样品符合率、全省疾控系统总符合率、全省医疗机构总符合率、第三方机构总符合率均为100%。本次考核，一共涉及6个厂家试剂，其符合率也为100%。

３.讨论

　　核酸检测涉及其方法学特点、病人疾病发展过程、标本采集、标本保存与运输、样品检测等过程。本次考核，只针对样品检测，包括核酸提取、扩增体系、人员操作、室内质控等因素，也就是通常的检验中质量管理。医疗机构检验科，包括第三方实验室，经过多年的实践，在质量管理方面取得了较为骄人的的业绩，许多实验室通过了ISO15189或者CAP认可，一些没有通过认可的实验室，基本也是参照相关规则进行质量管理。疾病预防控制系统，有的通过了ISO17025认可，或者按照相关规则进行质量管理。同时，对于国家或者省级临床检验中心开展了室间质评的项目，几乎所用的医院实验室都参加了相关项目的室间质评，保障了检验质量。在贵州省指定的34家检测实验室中，有5家实验室通过了ISO15189认可，1家疾控系统实验室通过了ISO17025认可；21家医疗机构，其中20家为三甲医院，1家三级医院。在回报的30家检测实验室，均建立了完整的质量体系，严格按照操作规程和室内质控规则进行实验室检测。所以，在这次的新冠病毒核酸检测中，能够保证100%的符合率，既是意料之外，也是情理之中。

　　在我国，核酸检测试剂是按照三类医疗器械进行管理的，正常情况下试剂开发完成后，需经过临床试验确认结果的有效性后，再由国家药品监督管理局审批才能正式上市，但目前由于新型冠状病毒疫情的紧迫性，国家药品监督管理局启动应急审批程序，目前国内先后已有几十种新型冠状病毒核酸检测试剂被批准上市，但大量试剂的紧急上市不可避免地出现产品质量问题。在回报的30家检测实验室中，用于考核样品检测的一共为6家产品，并且主要集中在传统的2家基因试剂厂家上，占87%左右，说明我国传统试剂生产厂家的产品质量是过硬的。

　　临床检验全面质量管理，其中的分析前质量管理极其重要，病人疾病发展过程、标本采集、标本保存与运输等，对检测阳性率有着决定性作用。对此，中华医学会检验医学分会主委王成彬教授已经做了精辟的论述。我们认为，对于社会关注的核酸检测阳性率低的问题，主要是由病人疾病发展过程、标本采集、标本保存与运输等问题引起。加强与临床和疾控采样人员的沟通和联系，共同对分析前质量进行管理，以保障检验质量，其意义非常重要。

　　对于贵州省临床检验中心组织的这次现场考核，由于时间紧，任务重，还存在许多不足之处，比如对考核样品的一致性和稳定性未进行验证，对于考核品的定值，采用本实验室仪器进行的，其准确性可能存在一定的误差。各检测实验室对这次考核非常重视，有的实验室进行了两次及以上的检测，未能体现其真实检测水平，也是造成全部符合的一个原因。由于考核样品是无感染性的，在检测过程中没有要求灭活，所以对实际样品检测过程中的灭活过程，是否会造成实质性的影响，还有待验证。

　　贵州省临床检验中心从2月6日到2月10日，短短五天时间完成了7300份新冠病毒核酸样本检测，相关的经验，将与大家分享。

利益冲突

作者声明不存在利益冲突