转子如何选?各种优缺点,适用场景帮你罗列!
说到离心力的经典应用场景
相信各位实验汪们肯定能列举出很多
从日常的洗衣机、游乐园刺激的过山车
到宇航员的失重训练
……
坐在过山车上
身体被甩出去的感觉
高度模拟了离心管里的样品们
当然,坐过山车我们感觉到的都是小意思,更接近样品体验的应该是飞行员和宇航员的训练用人体离心机(点此回顾:☞宇航员要承受8个G的重力是什么概念?)
想必有为实验苦恼的 E 粉儿要问了:
“小 E,我更想知道离心机各种转子,我的样品该用哪种!”
一般来说,实验室里常用的台式离心机转子有两种:固定角转子和水平转子。两种类型的转子各有优点和缺点,在不同的应用场景中,需要选择不同的转子。
固定角转
固定角转就是样品管在固定的角度下完成离心,样品通常沉淀在管壁。
固定角转没有像水平转子那样可移动的部件,转子承受的金属压力较小,因此,固定角转可以实现更高的相对离心力和由此而缩短的离心时间(Eppendorf 5430 R 高速离心机相对离心力最高可达 30,130 x g)。
需要使用固定角转的场景
① 需要更大的相对离心力才能彻底分离② 要获得更紧凑的沉淀物③ 样品体积较少如:核酸的高速离心,菌体的沉淀等等样品分离效果
大多数固定角度的转子孔在 45° 角度时可以形成最紧密的样品沉淀。小于 45° 的固定角度转子则可导致样品沉淀区域更分散,在转移上清时可能产生沉淀的再次重悬,影响分离效果。
固定角转的局限
离心通量有限,台式离心机最大离心通量 6 x 250 mL, 落地高速离心机最大离心通量 6 x 1L。
水平转子
水平转子的吊篮可以 90° 的角度水平摆出,让样品沉淀直接位于管底部的中间。这些转子的优势在于,可提供不同的适配器选择,能够实现大容量和高灵活性。
样品分离效果
样品沉淀位于管底中部,而不是像固定角转一样将样品沉淀于管壁侧面,好处就是:当待分离样品的浓度较低时,只要让样品尽可能密集沉淀于管底,然后使用小体积的缓冲液来重悬沉淀,就能让样品浓度尽可能高。
另外,梯度离心也需要使用水平转子,这样才能形成多个水平梯度层,同时保证在离心结束也能保持各个水平梯度的位置。
使用密度梯度离心法通过 5910 Ri 及 5920 R 多功能台式冷冻离心机获得的分层清晰的 PBMC 分离结果(a,b,c,d 为 Eppendorf 实验组;e 为其他品牌对照)
需要使用水平转子的场景
① 样品通量较高② 需进行梯度离心③ 需要把样品离心至管底中间④ 需离心各种不同离心管/瓶、工作板如:传代细胞的收集,血细胞分离,中、大通量培养上清的收集,蛋白样品的粗纯等等水平转子的局限
吊篮在离心时发生位移可引起较高的金属压力,这导致最大离心力会相应的降低和可能需要更长的离心时间。
以上是一些简单的转子选择诀窍,如果你觉得记住这些应用太复杂,那么可以用小 E 的挑选工具,来帮你选择离心机和转子。只要输入应用,就可以找到对应的离心机和转子啦,非常简单明了。
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小 E 还为实验汪们准备了视频教学,来看看怎样离心可以省时又省力吧!
固定角转离心省时小窍门
水平离心省时小窍门