（文章篇）S5E54：用了那么多，原来可以这么扯

我们研究通路、分子功能常用到抑制剂或激动剂，那它们是怎么跟我们研究的分子扯上关系呢？这篇文章浅浅地讲了一个关于HDAC抑制剂的作用，具体的机制并未深入阐述。

Class I HDAC inhibitor mocetinostat induces apoptosis by activation of miR-31 expression and suppression of E2F6 ( cell death discovery)

下载链接：http://pan.baidu.com/s/1bpmiFSF

 Mocetinostat是HDAC（组蛋白去乙酰化酶）抑制剂，在临床试验中发现其能抑制多种肿瘤，包括滤泡性淋巴瘤，霍奇金淋巴瘤和急性髓细胞性白血病。

miR-31被认为是肿瘤抑制miRNA。在转移性乳腺癌中几乎不表达。在卵巢癌中也是被显著下调的。miR-31能影响转录因子tp53的水平。肿瘤细胞系中，不活跃的tp53通路明显存在不稳定的miR-31表达。miR-31的高表达预示着良好的预后水平。

在该文章中，miR-31是一个凋亡相关miRNA，前期发现在前列腺癌中该分子被表观调控沉默。作者发现在前列癌细胞系中，mocetinostat处理后能显著上调miR-31。而miR-31的靶蛋白，抗凋亡蛋白E2F6则水平降低。

如使用miR-31的抑制剂对miR-31处理后，mocetinostat诱导凋亡的能力下降了。

Mocetinostat能增强多西他赛诱导凋亡的活性。干扰掉E2F6能使得肿瘤细胞对mocetinostat诱导的凋亡作用敏感，而过表达E2F6则能阻遏这种作用。

动物移植瘤模型表明，mocetinostat能激活miR-31，下调E2F6，诱导凋亡，抑制前列腺癌生长。在原代前列癌干细胞中，Mocetinostat能上调miR-31表达，下调E2F6，诱导凋亡。

1 mocetinostat诱导前列腺癌细胞凋亡

通过不同浓度处理2株前列癌细胞株，发现凋亡效果成一定的浓度递增。

2 mocetinostat诱导miR-31表达，下调E2F6

实验验证了，干扰掉HDAC1起到的效果跟使用HDAC1抑制剂一样，能提升miR-31的表达，下调E2F6水平。

Bcl-2蛋白家族是一个特别的家族，目前已发现25种Bcl-2家族同源蛋白，其成员中有些促进凋亡，如Bad、Bid 、Bax，有些成员阻止细胞凋亡,如Bcl-2、 Bcl-x、Bcl-w。Bcl-2能够阻止细胞色素c从线粒体释放到细胞质，从而抑制了细胞凋亡。

实验发现Bad，caspase表达量随着mocetinostat处理浓度的递增而增加。Bad是一个关键的凋亡蛋白，引发内源性的凋亡。

miR-31被抑制后，mocetinostat诱导凋亡的能力下降了。且能增强多西他赛的抑癌作用。

3 miR-31靶蛋白E2F6的功能

干扰掉E2F6，mocetinostat能提高凋亡作用；过表达E2F6则下调mocetinostat的凋亡功能。

4 动物实验

Mocetinostat注射移植瘤小鼠的前列腺中，观察到miR-31、Bad、caspase-3水平上调，E2F6水平下调。

5 在肿瘤干细胞中的功能验证

Mocetinostat在前列癌肿瘤干细胞中依然能诱导miR-31表达，促进凋亡。

That's all. Thank you!

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