如何用Image J 对Western blot 条带进行灰度分析
Image J软件:Windows 版本
第一步:软件安装
1. 下载地址:http://rsb.info.nih.gov/ij/download.html
2. 下载windows 32位带Java版本,双击软件安装。
第二步:界面介绍
软件界面
第三步:图片分析
1.下图为样板图片
2. 导入图片:File> Open> Sample1.jpg
图片导入后,Sample1.jpg在新的窗口中打开
3. 图片类型设置:Image> Type> 8 bit
4. 去除图片背景:Process> Subtract Background> …
4.1 Subtract Background 窗口:Rolling ball radius 设为50 pixels,勾选light background,可选preview,点击“OK”确定
5. 工具栏:选择“矩形选框”
6. 最大化“Sample1.jpg”窗口,便于矩形选择,矩形选择第一个泳道
7. 标记“矩形选框”为1:矩形选择后,调整矩形至合适大小,按下数字键“1”,或者Analyze> Gels> Select Fist Lane。
8. 选择“泳道2”:拖动“1”的矩形框,会出现两个矩形选框,拖动矩形框至泳道2,调整位置,并按下数字键“2”,Image J 会自动调整大小使“矩形框2”与“矩形框1”保持同一水平。
9. 继续拖动,会出项新的“矩形选框”,调增至泳道3,并按下数字键“2”(注意:是按下数字键“2”),重复9至6个泳道全部选择。
10. 所有泳道选择后,按下数字键“3”,出现分析图谱。
11.“直线”封闭峰:工具栏选择“直线”,从起峰处至落峰处。
12. 计算峰值:工具栏> Wand(tracing) tool,点下刚才封闭的区域,峰值结果出现在新的窗口中。
计算结果:
12.其他泳道,以此类推
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