收藏|外泌体分离和储存方法汇总，你都知道吗？

外泌体（Exosomes）是由绝大多数细胞自然分泌的、直径约为30-200nm、在蔗糖梯度中浮力密度在1.10-1.21g/ml之间的膜性囊泡，主要为磷脂双分子层结构。 

Exosomes天然存在于体液中，包括血液、唾液、尿液、脑脊液和母乳等。 

FrontPhysiol. 2012;3:145

一、外泌体分离方法汇总

1.      超离

Theranostics 2017, Vol. 7,Issue 3

2.      密度梯度离心

Theranostics .2017, Vol. 7, Issue 3

3.      蔗糖密度梯度离心

4. 碘克沙醇密度梯度离心

INTERNATIONAL JOURNAL OF MOLECULAR MEDICINE. 2015. 36: 11-17

5.超滤

Journalof Extracellular Vesicles 2015, 4: 27031

  6. Size-basedisolation techniques

Theranostics2017, Vol. 7, Issue 3

7.色谱 

JOURNAL OF EXTRACELLULAR VESICLES, 2017 VOL.6, 1286095

8.PEG聚合物沉淀

样品中加入PEG8000。4°C过夜孵化后，通过低速离心法或过滤法隔离含有外泌体的沉淀。

                                           Theranostics2017, Vol. 7, Issue 3

9. 微流控

微流控（Microfluidics）：指的是使用微管道（尺寸为数十到数百微米）处理或操纵微小流体（体积为纳升到阿升）的系统所涉及的科学和技术。微流控检测芯片一般具有样品消耗少、检测速度快、操作简便、多功能集成、体小和便于携带等优点，因此特别适合发展床边（POC）诊断。

   Theranostics 2017, Vol. 7, Issue 3

10. 分离新技术-声波联合微流控

 www.pnas.org/cgi/doi/10.1073/pnas.1709210114

外泌体在不同的疾病发病机理中具有重要功能，以上介绍了10种用于从生物体液获得并分离外泌体的方法，各有优缺点，从nature、science和cell上发表的文章来看，超离技术仍然是很常见的技术，但其它的方法也有满意的结果，并且可以有效地应用于实验室研究和临床医药。

二、实例分析

1、血浆中分离外泌体

2、尿液中分离外泌体

3、唾液中分离外泌体

(A)ExoQuick-TC TM (EQ)          (B) ultracentrifugation (UC)

4、实体组织中的外泌体分离

5、汗液中的外泌体分离

三、外泌体的储存

现抽现用最好，4°C短期保存， -80°C长期保存。

       JExtracell Vesicles. 2017 Aug 13;6(1):1359478. 

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