如何快准狠查找抗体

抗体是一种由浆细胞（效应B细胞）分泌，被免疫系统用来鉴别与中和细菌、病毒等的大型Y型蛋白质。

使用抗体的常见实验：

Western  blot	蛋白质变性，抗体识别线性表位
IHC/ICC/IF	蛋白质固定后经过修复，表位可恢复，抗体识别线性表位/构象表位
ELISA/FACS（表位）/Co-IP	蛋白质处于天然状态，抗体识别线性表位/构象表位
ChIP	蛋白质经过固定处理，部分表位可能被掩盖或发生变化，抗体识别线性表位/构象表位

在多种实验中，都要用到抗体，事实上你对你的抗体了解吗？

一、抗体结构

基本结构都由两部分组成，即包含有特异性结合抗原位点的Fab段和相对保守的Fc段，抗体的特异性表现在Fab段，标记时利用Fab段的抗原结合位点与细胞上抗原分子特异性结合，

根据Fab的不同，抗体可以分为以下5类：其中以lgG为主

二、一抗和二抗的区别

一抗即第一抗体：就是能和特异性抗原特异性结合的蛋白，包括单克隆抗体和多克隆抗体。

二抗即第二抗体：能和一抗结合，即抗体的抗体，是利用一抗的Fc段（恒定区，每个种属的Fc段都相同）去免疫异种动物，由异种动物的免疫系统产生的针对此抗体的免疫球蛋白，起放大一抗信号的作用。

三、单抗与多抗的区别

单抗即单克隆抗体：抗原通常是由多个抗原决定簇组成的，由一种抗原决定簇刺激机体，由一个B淋巴细胞接受该抗原刺激所产生的抗体称之为单克隆抗体。其制备过程：经过特定抗原处理过的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞通过细胞融合，得到杂交瘤细胞，经KAT培养基筛选得到阳性克隆，然后进行细胞培养、纯化得到单克隆抗体。

多抗即多克隆抗体：由多种抗原决定簇刺激机体，相应地就产生各种各样的单克隆抗体，这些单克隆抗体混杂在一起就是多克隆抗体。其制备过程：将抗原直接注入到动物体内进行免疫，经过3-4次免疫后，ELISA测定效价合格后，收集血液离心得到上清，纯化后就得到多克隆抗体。

二者优缺点总结：

	优点	缺点
多抗	亲和性比单抗高； 无表位被掩盖的顾虑 放大低表达靶蛋白的信号	引入较高的背景信号 存在批次差异
单抗	单抗的特异性高，杂带少； 在一段时期内较为稳定	有表位被掩盖的顾虑

四、如何快、准、狠查找自己需要用的抗体

1、看跟自己研究领域相关的文献，从材料方法里找所用试剂的信息。

2、从网站上查询，这里给大家安利几个网站

（1）CiteAb，https://www.citeab.com/

CiteAb号称是世界最大的抗体搜索引擎，其特色是搜索结果可根据抗体被引用的文献次数来排序。一般引用越多的产品，质量往往越有保障。

网址界面如下：

以β-catenin为例，进行搜索：出来很多关于该抗体的信息，也包括引用文献次数最多的厂家及产品信息，大家可以根据需要自行选择。

（2）The HumanProtein Atlas， https://www.proteinatlas.org/

这个网站是人类蛋白质组学的数据库网站，其中提供了部分人类抗体测试数据。网址界面如下：

还是以β-catenin为例，进行搜索：

（3）此外，还有一个网站http://compbio.med.harvard.edu/antibodies/

主要是提供部分组蛋白修饰抗体的验证数据，适用于表观遗传学的研究。

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