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蛋白质组学第6期 搜库软件之 MaxQuant 结果数据介绍

生信技能树 生信技能树 2022-06-06

上个月我们公布了,蛋白质组学习小组起飞啦!  短短几天就获得了几百小伙伴的支持,让我们也更有信心的带领大家掌握一个蛋白质组学数据处理的实战,前面我们分享的是:

目录

一 .上期教程方法输出的结果1.上期的教程输出的结果2. 文件夹较多3.重要的文件夹是 combined4. txt 文件夹5. proteinGroup 文件二. 发现上期结果错误1.错误分析2.文章方法再次解析三. 正确的实验设置1)细胞一:OVCA4292)细胞二: OVISE3)注意四 输出结果基本认识summaryproGroupspeptidemodificationSpecificPeptides

一 .上期教程方法输出的结果

1.上期的教程输出的结果

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2. 文件夹较多

每个样本对应输出了一个文件夹,文件夹内是每个样本的的谱图的解析。这些文件夹我们就不用看了。

3.重要的文件夹是 combined

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4. txt 文件夹

在combined 文件里有一个 txt文件夹,这个txt文件包含了所有的你想要的信息。

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5. proteinGroup 文件

txt文件夹里有一个 proteinGroup 文件,使用excel表格打开,那这个表格就是我们想要的表格

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二. 发现上期结果错误

当我看到这里的时候,我发现了错误。

1.错误分析

我们上期教程中缩写的实验设计部分,输出的结果只有一个combined 文件夹,且在 蛋白定量的结果里只出现了两列定量丰富。

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2.文章方法再次解析

文章的实验设计有两种细胞,每种细胞又有对照组和实验组。我们要做的LFQ定量,应该是每一种细胞的6个raw文件(3个对照+3个实验)进行定量。也就是说应该输出两个combined的文件,且每个proteinGroup 里有6列定量的信息,也就是每个样本都会有一个定量信息。实验设计要重新设置。

三. 正确的实验设置

两种细胞分开搜库

为了加以区分,没有多样本混乱并且不出现上面的错误,我们采用分开搜库,重新进行实验设计,首先将两个细胞的文件分别放在两个文件夹下。

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1)细胞一:OVCA429

  • 点击Maxquant 打开一个窗口,先导入第一种细胞的6个样本,命名实验为每个样本的名字,这样最后定量的结果会输出每个样本的定量信息。

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  • 然后设置参数,参数设置和上期一样。

  • 1)增加数据库

  • 2)设置定量信息,修饰信息等,本文都是采用默认参数。别忘记选LFQ 和 match between run(参考上期)

2)细胞二: OVISE

  • 重新开一个Maxquant的搜库文件,导入数据

  • 然后设置参数,参数设置和上期一样。

  • 1)增加数据库

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  • 2)设置定量信息,修饰信息等,本文都是采用默认参数。别忘记选LFQ 和 match between run

3)注意

尽量搜完细胞一,再开始细胞二,电脑运行有限。全部搜库结束后也会出现上面描述的很多文件出现在每个文件夹下。然后再去找每种细胞文件夹下的 combined。这次大家不用再搜库了,我把结果文件放进了微云链接。大家去微云链接下载。

四 输出结果基本认识

summary

  • 包含了6个样本分别的参数 一级谱图数 二级谱图数 鉴定谱图数等信息。

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proGroups

  • 这里包含了最重要的蛋白定量信息

peptide

  • 如果做的是肽组学,需要定量肽段信息看这个表

modificationSpecificPeptides

  • 带有修饰信息的肽段

  • parameters

  • 参数信息


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