10年临床研究数据：CIK细胞能够显著提高无进展生存期和总体生存率丨医麦猛爆料

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2020年11月27日/医麦客新闻 eMedClub News/--今年6月，在来自德国波恩大学医院综合肿瘤学中心的一篇文章中，收集了2010-2020十年间使用CIK细胞治疗的患者数据，包括了30多种实体瘤的4889例患者。

结果显示：CIK细胞治疗显著提高了患者的无进展生存率和总体生存率，并且拥有积极的安全性，研究中观察到轻度的不良反应和移植物抗宿主病。

▲ 图片来源：Journal of Cellular Physiology

相比于CAR-T、TCR-T疗法，同属于免疫细胞疗法的CIK在国内略显暗淡。但事实上，CIK细胞疗法的研究在国内启动更早一些，CIK在临床上也显示出不弱的抗肿瘤能力，也被誉为肿瘤过继性细胞免疫治疗的新星。但由于2016年的魏则西事件，使得CIK细胞疗法受到了巨大冲击。

2016年，一名21岁的大学生魏则西通过百度搜索找到武警北京总队第二医院，耗费20多万元接受了DC-CIK疗法，但是年轻的生命并没有能够被挽救。随后被爆出的各种消息证实这是一场非法人体试验，加上带有欺骗色彩，使得一时之间国内对于细胞免疫疗法的热情骤减。

CIK细胞疗法与DC-CIK细胞疗法有一定程度的相关性，因此也受到了影响，但是随着时间的推移，CIK细胞的优势和潜力逐渐显现出来，并在临床研究中取得了积极的数据，使得CIK细胞重新回到人们的视线中。

CIK细胞治疗

CIK细胞疗法，即细胞因子诱导的杀伤细胞(Cytokine-Induced Killer，CIK)，是一种过继性细胞疗法，是指外周血/骨髓/脐血来源的单个核细胞在体外经过多种细胞因子（如抗CD3单克隆抗体、IL-2和IFN-γ等）刺激诱导培养后获得的一群异质细胞。

CIK细胞疗法的主要效应细胞为CD3+/CD56+细胞，由于同时表达CD3和CD56两种膜蛋白分子，故又被称为NK细胞样T淋巴细胞，兼具有T淋巴细胞强大的抗肿瘤活性和NK细胞的非MHC限制性杀瘤优点。

▲ CIK细胞机制（图片来源：ncbi）

CIK细胞通过以下机制对肿瘤细胞发挥杀伤作用：（1）与靶细胞结合并释放穿孔素及颗粒酶对靶细胞发挥直接杀伤作用；（2）产生大量细胞因子(如 IFN-γ，TNF-α，IL-2 等)间接杀伤肿瘤细胞；（3）调节免疫系统发挥间接杀伤作用；（4）诱导肿瘤细胞凋亡和坏死。

CIK细胞增殖速度快，主要效应细胞CD3+/CD56+细胞可增殖1000倍；抗肿瘤活性高，优于传统的LAK细胞、以及IL-2和IFN-γ等；不受MHC限制，具有广谱抗肿瘤和病毒的作用，对多重耐药肿瘤细胞敏感；现在主流的CIK细胞疗法一般是自体疗法，因此免疫反应较小，具有较高的安全性；毒副作用小，无严重不良反应。

此外，由于CIK细胞具有免疫调节和体细胞修复作用，在大部分肿瘤患者接受CIK治疗后，出现了消化道症状减轻或消失，皮肤有光泽，黑斑淡化，静脉曲张消失，脱发停止甚至头发生长或白发变黑等“年轻化”表现，及精神状态或体力明显恢复等现象。CIK疗法也正在逐渐走向美容抗衰老等领域。

CIK细胞培养流程

CIK细胞制备流程：首先抽取患者的外周血，使用淋巴细胞分离液密度梯度离心法收集PBMC，清洗后按1~2E+6 cells/mL的密度重悬于无血清培养基中，加入所需的多种细胞因子，如CD3单抗、IFN-γ、IL-2、IL-1α等，转入37℃、5% CO2培养箱培养，根据细胞生长情况每隔2~3天进行补液并取样计数，在第14天收集CIK细胞。

在CIK细胞培养过程中，对温度和环境要求较高，而这就涉及到了培养瓶的重要性。英诺维尔智能科技(苏州)有限公司从细胞培养必不可少的培养瓶（culture flask）出发，使细胞培养工作更快、更方便、更有效，尤其适用于大规模细胞培养技术。

英诺维尔 ImmunoVessel 培养瓶具备良好透气性、生物相容性和无菌指标；透气性使得能够维持合适的氧和pH水平，有利于细胞的生长繁殖；生物相容性是保证细胞高活率与高活性的重要关键。

英诺维尔智能科技（苏州）有限公司的研究人员针对ImmunoVessel培养瓶进行CIK细胞扩增培养，分别取两个Donor的PBMC进行诱导并扩增培养，CIK细胞在ImmunoVessel培养瓶中迅速扩增并可进行高密度培养(>1x10⁷cells/mL)，培养14天细胞数量扩增均达到400倍以上，细胞活率在90%以上。

▲ ImmunoVessel中CIK细胞的扩增

▲ CIK细胞培养活率

▲ CIK细胞密度(> 1x10⁷/mL)

在ImmunoVessel培养瓶中扩增14天，通过流式检测CD3+/CD56+表达均在25%至30%之间，相同于传统培养方式（普通培养瓶或培养袋）。

▲ Day0和Day14 CIK的CD3+/CD56+表达情况

以往实验中，英诺维尔研究人员在 ImmunoVessel 中扩增不同 Donor 来源的 CAR-T 细胞，检测 10 天内的数据，结果发现这些 CAR-T 细胞可以以高活率状态扩增 200 倍左右。并且在培养扩增期间，CAR 分子阳性率维持不变，使得 CAR-T 细胞生长有数量优势和质量保证。

▲ ImmunoVessel中CAR-T细胞的扩增

▲ CAR-T Cells的CAR转导效率

此外，诸如HEK293F、CHO、NK、Hybridoma等悬浮细胞系均可以在ImmunoVessel中进行培养，同样可以维持高密度细胞生长及持续保持高细胞活率。

英诺维尔ImmunoVessel除传统培养瓶共有的优势外，具有更好的透气性，并且培养密度也高于传统培养瓶。研究人员在培养过程操作会更方便，1个ImmunoVessel和3个T175 Flask相当，实验操作上可以极大地减少工作量，节省时间的同时也减少了细胞污染的概率，培养空间可节省80%以上。

试用培养瓶或代理意向请联系：

18761953357  

0512-62620553

参考资料：

1.https://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/jcp.29827

2.北京瑞格生物：CIK细胞一肿瘤过继性细胞免疫治疗的新星

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