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本次公开课带领大家入门基础10X单细胞转录组数据分析,参考教程为Seurat包的官方教程:https://satijalab.org/seurat/articles/pbmc3k_tutorial.html

它需要10X单细胞转录组数据的cellranger结果文件,我们也是在单细胞天地公众号详细介绍了cellranger全部使用细节及流程,大家可以自行前往学习,如下:

因为这个cellranger上游数据分析流程对服务器要求比较高,而且10x的原始测序fastq文件也是接近100G文件,运行过程对技术资源消耗比较大,我们公开课没办法承担这个成本。所以大家直接下载其官方示例提供的 https://cf.10xgenomics.com/samples/cell/pbmc3k/pbmc3k_filtered_gene_bc_matrices.tar.gz 结果文件即可,后续跟课都是在自己的电脑里面操作,主要是统计可视化。

基本流程如下:


代码在:https://satijalab.org/seurat/articles/essential_commands.html

Seurat Standard Worflow

pbmc.counts <- Read10X(data.dir = "~/Downloads/pbmc3k/filtered_gene_bc_matrices/hg19/")
pbmc <- CreateSeuratObject(counts = pbmc.counts)
pbmc <- NormalizeData(object = pbmc)
pbmc <- FindVariableFeatures(object = pbmc)
pbmc <- ScaleData(object = pbmc)
pbmc <- RunPCA(object = pbmc)
pbmc <- FindNeighbors(object = pbmc)
pbmc <- FindClusters(object = pbmc)
pbmc <- RunTSNE(object = pbmc)
DimPlot(object = pbmc, reduction = "tsne")

虽然是seurat官方文档代码讲解,但是呢,本次课程的亮点与官网又有一点不一样。由于每天都会看见很多人在群里问,如何提取各种值,那么本次公开课会带领大家详细解剖Seurat对象,让大家不再迷茫于如何提取count值,normalized值,scaled值等内容!

其实Seurat对象也没有那么神秘,类似于下面的这样的SingleCellExperiment对象的结构!

 对象结构

图来源:http://bioconductor.org/books/release/OSCA/data-infrastructure.html

每个对象都有一个独特的设计理念,跟我一起探索seurat对象吧!

如果想要有更好的听课体验,需要提前看一下单细胞数据分析的基础10讲:

本次公开课时间为:5月5号晚上八点,不见不散!话不多说,赶紧下载钉钉软件搜索 “单细胞2021公开课”群的钉钉群号:35936686,加入吧!无需集赞,不玩虚的!

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