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人—尿液细胞悬液制备流程
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注 | 以上操作指南中设计的消化酶以及实验方法仅供参考,实际应用过程中请根据自己的组织样本类型进行细节上的调整
背景介绍
尿液是人类及脊椎动物为了新陈代谢的需要,经由泌尿系统排出体外的液体排泄物。尿液的形成从肾小球开始,流经整个肾脏和泌尿道系统,最终到达尿道。肾脏和泌尿道中的细胞可以从上皮细胞脱落到尿液中,而白细胞可以从局部组织浸润到尿液中,这使得尿液成为临床评估相关疾病的有用对象。
实验仪器及耗材
实验步骤
收集尿液后立即以390g转速离心5分钟。
离心后的细胞使用F12(含5%FBS,1%P/S,1%glutamine)清洗两次。
PBS重悬细胞后使用40μm滤膜过滤以除去杂质。
使用台盼蓝血细胞计数仪分析细胞数量和活性。
检测细胞活性,活性在85%以上可用于后续测序实验。
实验结果
使用immunarch包进行单细胞免疫组库数据分析(九):Annotate clonotypes
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