卫行标准：寄生虫病诊断名词术语 - 检查方法术语

5 检查方法术语

5.1  病原学检查方法

5.1.1  粪便检查

5.1.1.1

    直接涂片法  direct smear method

    常用的检查寄生虫病的方法，可以针对检查蠕虫卵、原虫包囊和滋养体的不同而选择不同的染色法，方法简便，可连续3次涂片，提高检出率。

5.1.1.2

    集卵透明法  egg concentration-transparency method

    将粪便充分搅匀后，取5g加水调成粪液，经铜丝筛过滤，用分为内袋和外袋的尼龙袋收集，用药勺刮取外袋内全部沉渣，分作涂片。覆盖经甘油孔雀绿溶液浸渍24 h的亲水玻璃纸，以载玻片压匀，室温过夜，次日镜检。

5.1.1.3

    厚涂片透明法（改良加藤法）  modified Kato's thick smear

    取约50 mg [ 已用150 μm（100目）不锈钢筛除去粪渣 ] 粪便，置于载玻片，覆以浸透甘油孔雀绿溶液的玻璃纸片，轻压，使粪便展开(20 mm×25 mm)。置于30℃～36℃温箱中30 min后镜检。

5.1.1.4

    浓聚法  concentration method

    利用原虫包囊和蠕虫卵比重大，可沉积于水底或利用比重较大的液体，使原虫包囊或蠕虫卵上浮，集中于液体表面，检获包囊或虫卵的方法。

5.1.1.5

    沉淀法  sedimentation method

    利用原虫包囊和蠕虫卵比重大，可沉积于水底的特点，检获虫卵的方法。常用的有重力沉淀法、离心沉淀法和汞碘醛离心沉淀法。

5.1.1.6

    重力沉淀法  gravity sedimentation

    自然沉淀法  natural sedimentation

    主要用于蠕虫卵检查。蠕虫卵比重大于水可沉淀于水底，使虫卵浓集。取粪便20 g--30 g，加水制成混悬液，用金属筛 [ 250μm - 380μm（40孔～60孔）] 或2层～3层湿纱布过滤，再加清水冲洗残渣；过滤后的粪液在容器中静置25 min，倒去上层液。重新加满清水，以后每隔15 min - 20 min换水1次（共3次～4次），直至上层液清晰为止。最后倒去上层液。取沉渣做涂片镜检。如检查包囊，换水间隔时间宜延长至约6h。

5.1.1.7

    离心沉淀法  centrifuge sedimentation

    将滤去粗渣的粪液离心(500 g) 1 min - 2 min，倒去上层液体，注入清水，再离心沉淀，如此反复沉淀3次～4次，直至上层液澄清为止，最后倒去上层液，取沉渣镜检。

5.1.1.8

    汞碘醛离心沉淀法  merthiolate-iodine-formaldehyde centrifugation sedimentation method，MFC

    本法适用于原虫包囊、滋养体及蠕虫卵和幼虫的检查。如准确称取lg粪便，即可做蠕虫卵的定量检查。取粪便lg，加适量（约10 mL）汞碘醛液，充分调匀，用2层脱脂纱布过滤，再加入乙醚4 mL，摇2 min，离心(500 g) 1 min - 2 min，即分成乙醚、粪渣、汞碘醛及沉淀物4层。吸弃上面3层，取沉淀镜检。

5.1.1.9

    醛醚沉淀法  formalin-ether sedimentation

    取粪便1 g - 2 g置于小容器内，加水10 mL～20 mL调匀，将粪便混匀液经2层纱布 [ 或150μm（100目）金属筛网]过滤，离心(500 g) 2 min;倒去上层粪液，保留沉渣，加水10 mL混匀，离心2 min;倒去上层液，加10%甲醛7 mL。5 min后加乙醚3 mL，塞紧管口并充分摇匀，取下管口塞，离心2 min;即可见管内自上而下分为4层。取管底沉渣涂片镜检。

    本法不仅浓集效果好，而且不损伤包囊和虫卵的形态，易于观察和鉴定。对于含脂肪较多的粪便，本法效果优于硫酸锌浮聚法。但对布氏嗜碘阿米巴包囊、蓝氏贾第鞭毛虫包囊及微小膜壳绦虫卵等的检查效果较差。

5.1.1.10

    浮聚法  flotation method

    利用比重较大的液体，使原虫包囊或蠕虫卵上浮，集中于液体表面检获寄生虫的方法。常用方法有饱和盐水浮聚法、硫酸锌离心浮聚法、蔗糖溶液离心浮聚法。

5.1.1.11

    饱和盐水浮聚法  brine flotation

    用以检查钩虫卵效果最好，也可用于检查其他线虫虫卵和微小膜壳绦虫虫卵。但不适于检查吸虫卵和原虫包囊。用竹签取黄豆粒大小的粪便置于浮聚瓶中，加入少量饱和盐水调匀，再慢慢加入饱和盐水至液面略高于瓶口，以不溢出为止。此时在瓶口覆盖一载玻片，静置15 min后，将载玻片提起并迅速翻转，镜检。

5.1.1.12

    硫酸锌离心浮聚法  zinc sulfate centrifuge flotation

    适用于检查原虫包囊、球虫卵囊、线虫卵和微小膜壳绦虫卵。取粪便约lg，加入10倍～15倍的水，充分搅碎，按离心沉淀法过滤，反复离心(500g)3次～4次，至清水为止。最后倒去上清液，在沉淀中加入相对密度为1.18的硫酸锌（33%的溶液），调匀后再加硫酸锌溶液至距管口约1 cm处，离心1 min。用金属环粘取表面的粪液置于载玻片上，加碘液1滴（查包囊），镜检。

5.1.1.13

    蔗糖溶液离心浮聚法  flotation method with sucrose solution

    适用于检查粪便中隐孢子虫卵囊。取粪便约5g，加水15 mL- 20 mL．以58μm（260目）尼龙袋或4层纱布过滤，取滤液离心(300g)5 min - 10 min，吸弃上清液，加蔗糖溶液再离心，然后如同饱和盐水浮聚法，取其表面液镜检（高倍或油镜）。

5.1.1.14

    毛蚴孵化法  miracidium hatching method

    利用血吸虫卵内的毛蚴在适宜温度的清水中，可在短时间内孵出的特性而设计的方法。取粪便30 g，先经重力沉淀法浓集处理，再将粪便沉渣倒入锥形烧瓶内，加清水至瓶口，在20℃～30℃的条件下，经4 h～6 h后用肉眼或放大镜观察结果，即可看到水面下有白色点状物作直线来往游动。

5.1.1.15

    肛门拭子法  anal swab

    用于检查肛周的蛲虫卵或常可在肛门附近发现带绦虫卵。常用方法有棉签拭子法和透明胶纸法。

5.1.1.16

    棉签拭子法  cotton swab

    先将棉签浸泡在生理盐水中，取出时挤去过多的盐水，在肛门周围擦拭，随后将棉签放入盛有饱和盐水的试管中，用力搅动，迅速提起棉签，在试管内壁挤干水分后弃去，再加饱和盐水至管口处，覆盖一载玻片，使其接触液面，5 min后取下载玻片镜检。

5.1.1.17

    透明胶纸法  cellophane tape

    用长约6 cm，宽约2 cm的透明胶纸胶面粘贴肛门周围的皮肤，然后将胶面平贴在载玻片上，镜检。

5.1.1.18

    定量透明法  quantitative transparent method

    适用于各种粪便内蠕虫卵的检查及计数。应用改良聚苯乙烯作定量板，大小为40 mm×30 mm×1.37 mm，模孔为一长圆定量板孔，大小为8 mm×4 mm，两端呈半圆形，所取的粪样平均为41.7 mg。将大小约4 cm×4 cm的150μm（100目）尼龙网或金属筛网覆盖在粪便标本上，自筛网上用刮片刮取粪便，置定量板于载玻片上，用两指压住定量板的两端，将刮片上的粪便填满模孔，刮去多余粪便。掀起定量板，载玻片上留下一长形粪条，然后在粪条上覆盖含甘油孔雀绿溶液的玻璃纸条，展平后加压，使玻璃纸下的粪便铺成长椭圆形。经1 h - 2 h透明后置镜下计数。将所得虫卵数×24，再乘上粪便性状系数，即为每克粪便虫卵数(egg per gram，EPG)。

5.1.1.19

    淘虫检查法  amoying and screening worm method

    为了考核驱虫效果，常需从粪便中淘取驱除的虫体进行鉴定与计数。取患者服药后24 h - 72 h的全部粪便，加水搅拌，用筛 [ 375μm（40目）] 或纱布滤出粪渣，经水反复冲洗后，倒在盛有清水的大型玻皿内。检查混杂在粪渣中的虫体时，应在玻皿下衬以黑纸。

5.1.1.20

    钩蚴培养法    culture method for hookworm larvae

    根据钩虫卵内幼虫在适宜条件下可在短时间内孵出而设计的方法。

    加冷开水约1mL于洁净试管内(1 cm×10 cm)，将滤纸剪成与试管等宽但较试管稍长的T字形纸条，用铅笔书写受检者姓名和编号于横条部分。取粪便0.2 g～0.4 g，均匀涂抹在纸条上2/3处，再将纸条插入试管，下端浸泡在水中。在20℃～30℃的条件下培养。培养期间每天沿管壁补充冷开水，以保持水面高度。3d后即可用肉眼或放大镜观察试管底部，钩蚴在水中常作蛇行游动，虫体透明。

5.1.1.21

    带绦虫孕节检查法  test for taenia proglottid

    绦虫节片用清水洗净，置于两张载玻片之间，轻轻压平，对光观察内部结构，并根据子宫分支情况鉴定虫种。也可用注射器从孕节后端正中部插入子宫内徐徐注射碳素墨水或卡红，待子宫分支显现后计数。

5.1.2

    血液涂片检查法  blood smear test

    血液涂片检查主要是诊断疟疾、丝虫病的方法。检查疟原虫常用薄血膜和厚血膜，检查微丝蚴可用新鲜血片和厚血膜。

5.1.3  排泄物与分泌物检查

5.1.3.1

    夏科-莱登结晶  Charcot-Leyden crystals

    由嗜酸粒细胞裂解产物形成的双尖形、六角形或针样的结晶。常见于阿米巴痢疾患者粪便或卫氏并殖吸虫病患者的痰液或病变组织中。

5.1.3.2

    肠检胶囊法  Entero-test capsule

    检查贾第虫病的一种实验诊断方法。嘱患者禁食后吞入一特制的装有尼龙线的胶囊，将线的末端经胶囊一端的小孔引出，并固定在受检者的口外侧。吞下的胶囊在体内溶解后，尼龙线松开、伸展，经3 h - 4 h可达十二指肠或空肠，含贾第虫滋养体的肠液即可黏附于尼龙线上，然后缓慢拉出尼龙线，取其远端的黏附物，滴在载玻片上，镜检蓝氏贾第鞭毛虫滋养体。

5.1.4  其他器官组织检查

5.1.4.1

    NNN培养液  Novy-McNeal-Nicolle medium

    用于利什曼原虫的培养。配制方法：取1.4 g琼脂、0.6 g氯化钠、900 mL蒸馏水置烧瓶中加热熔化、分装，每试管30 mL。高压灭菌，待冷却后加入1 mL去纤维兔血，混匀、斜置，冷却。再加入0.5 mL洛克氏溶液，4℃冷藏。

5.1.4.2

    杜氏利什曼原虫培养  culture method for Leishmania donovani

    培养杜氏利什曼原虫前鞭毛体的一种方法。在无菌条件下取受检者骨髓、淋巴结穿刺液或皮肤刮取物，与0.2 mL洛克液混合，迅速注入NNN培养基或Schneider培养基内．置22℃～28℃生化培养箱中培养，10 d--20 d后取试管底部混合液，涂片、镜检前鞭毛体。

5.1.4.3

    利什曼素  leishmanin

    在无菌条件下，取在NNN培养基中培养10 d～12 d的利什曼原虫前鞭毛体培养液，倒人离心管内，以1700g离心5 min，洗涤3次～4次，再用硫柳汞生理盐水稀释成浓度为107个／mL前鞭毛体悬液。

5.2  免疫学诊断技术

5.2.1

    皮内试验  intradermal test；IDT

    宿主在寄生虫变应原刺激后，体内产生亲细胞性抗体（IgE和IgG4）。当其与相应抗原结合后，肥大细胞和嗜碱粒细胞脱颗粒，释放生物活性物质，引起注射抗原的局部皮肤出现皮丘及红晕，以此可判断体内是否有某种特异性抗体存在。

    皮内试验用于多种蠕虫病，如血吸虫病、肺吸虫病、姜片吸虫病、囊尾蚴病、棘球蚴病等的辅助诊断和流行病学调查。本法简单、快速，尤其适用于现场应用，但假阳性率较高。

5.2.2

    卡松尼皮内试验  Casoni intradermal test

    卡松尼皮肤试验  Casoni skin test

    卡松尼试验  Casoni test

    用棘球蚴抗原进行的皮内试验，主要用于包虫病诊断的初筛。

5.2.3

    利什曼素皮内试验  leishmanin；intractaneous test

    蒙氏实验  Montenegro's test

    将利什曼素皮内注射至受试者前臂曲侧后48 h观察结果。注射部位出现直径大于0.5 cm隆起于皮肤表面的硬结者为阳性反应。

5.2.4

    免疫电泳  immunoelectrophoresis

    将免疫扩散与蛋白质凝胶电泳相结合的一项技术。事先将抗原在凝胶板中电泳，之后在凝胶槽中加入相应抗体，抗原和抗体双相扩散后，在比例合适的位置，产生肉眼可见的弧形沉淀线。该法除可用于某些寄生虫病的免疫诊断外，还可用于寄生虫抗原鉴定和检测免疫血清的滴度。

5.2.5

    间接红细胞凝集试验  indirect haemagglutination test;IHA

    以红细胞作为可溶性抗原并使之致敏。致敏的红细胞与特异性抗体结合而产生凝集，即为阳性反应。

    适用于寄生虫病的辅助诊断和现场流行病学调查。用于诊断疟疾、阿米巴病、弓形虫病、血吸虫病、囊尾蚴病、旋毛虫病、肺吸虫病和肝吸虫病等。

5.2.6

    间接荧光抗体试验  indirect fluorescent antibody method；IFA

    用荧光素标记第二抗体，可以进行多种特异性抗原抗体反应，即可检测抗原又可检测抗体。可用于寄生虫病的快速诊断、流行病学调查和疫情监测，还可用于组织切片中抗原定位以及在细胞和亚细胞水平观察和鉴定抗原、抗体和免疫复合物。主要用于诊断疟疾、丝虫病、血吸虫病、肺吸虫病、华支睾吸虫病、棘球蚴病及弓形虫病。

5.2.7

    对流免疫电泳试验  counter-immunaoelectrophoresis；CIE

    对流免疫电泳试验是以琼脂或琼脂糖凝胶为基质的一种快速、敏感的电泳技术。本法可用于血吸虫病、肺吸虫病、阿米巴病、贾第虫病、锥虫病、棘球蚴病和旋毛虫病等的血清学诊断和流行病学调查。

5.2.8

    酶联免疫吸附试验  enzyme-linked immunosorbent assay；ELISA

    该试验原理是将抗原或抗体与底物（酶）结合，使其保持免疫反应和酶的活性。把标记的抗原或抗体与包被于固相载体上的配体结合，再使之与相应的无色底物作用而显示颜色，根据显色深浅程度目测或用酶标仪测定 OD 值判定结果。本法可用于宿主体液、排泄物和分泌物内特异抗体或抗原的检测。已用于多种寄生虫感染的诊断和血清流行病学调查。

5.2.9

    免疫酶染色试验  immunoenzymic staining test;IEST

    免疫酶染色试验以含寄生虫病原的组织切片、印片或培养物涂片为固相抗原，当其与待测标本中特异性抗体结合后，可再与酶标记的第二抗体反应形成酶标记免疫复合物，后者可与酶的相应底物作用而出现肉眼或光镜下可见的呈色反应。本法适用于血吸虫病、肺吸虫病、肝吸虫病、丝虫病、囊尾蚴病和弓形虫病等的诊断和流行病学调查。

5.2.10

    免疫印迹试验  immunobloting technique；ELIB；Western blot

    由十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳( SDS-PAGE)、电转印及固相酶免疫试验三项技术结合为一体的一种特殊的分析检测技术。本法具有高度敏感性和特异性，可用于寄生虫抗原分析和寄生虫病的免疫诊断。

5.2.11

    弓形虫染色试验  Sabin-Feldman dye test

    一种检测弓形虫感染的血清学方法。活的虫体与血清作用后，60%虫体不被亚甲蓝着色者为阳性，反之为阴性。本方法为经典的免疫学方法，其特异性、敏感性和重复性均较好。

5.2.12

    环卵沉淀试验  circumoval precipitin test；COPT

    血吸虫卵内毛蚴分泌的抗原物质经卵壳微孔渗出后与待检测血清内的特异抗体结合，在虫卵周围形成镜下可见的带状或泡状免疫复合物沉淀，即为阳性反应。

5.2.13

    旋毛虫环蚴沉淀实验  circumlarval precipitin test for trichina；CLPT

    取50条～100条脱囊的旋毛虫活幼虫（冻干幼虫或空气干燥幼虫也可）放人待检血清中，37℃温育24 h，如1条以上幼虫体表出现泡状或袋状沉淀附着，即为阳性反应。

5.2.14

    单克隆抗体  monoclonal antibody；McAb

    用经特异性抗原刺激的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞杂交、融合后分泌的一种单一的特异性抗体。用于寄生虫病种株分型与鉴定、虫体结构与功能分析、免疫病理研究、分析和纯化抗原以及制备保护性疫苗等。利用McAb检测循环抗原可诊断疟疾、弓形虫病、血吸虫病、肺吸虫病、棘球蚴病、丝虫病。

5.2.15

    免疫扩散  immunodiffusion

    在一定条件下，抗原与抗体在琼脂凝胶中相遇，在二者含量比例合适时形成肉眼可见的白色沉淀。免疫扩散法除可用于某些寄生虫病的免疫诊断外，还可用于寄生虫抗原鉴定和检测免疫血清的滴度。

5.3  分子生物学诊断技术

5.3.1

    DNA探针技术  DNA probe

    基因探针技术

    用同位素、生物素、酶或其他半抗原标记的特定DNA片段。在其与DNA样本杂交过程中，借助上述标记物可探查出特异性或差异性DNA。目前，DNA探针已用于疟原虫、隐孢子虫、蓝氏贾第鞭毛虫、锥虫、巴贝虫、弓形虫、丝虫、血吸虫、棘球蚴、猪带绦虫、肝片吸虫等虫种的鉴定和相应疾病的诊断。

5.3.2

    聚合酶链反应  polymerase chain reacti

    PCR技术

    在引物介导下特异性扩增DNA的一种技术。目前，PCR技术多用于寄生虫病的基因诊断、分子流行病学研究和种株鉴定、分析等领域。已应用的虫种包括利什曼原虫、疟原虫、弓形虫、阿米巴、巴贝虫、旋毛虫、锥虫、隐孢子虫、蓝氏贾第鞭毛虫、猪带绦虫和丝虫。

（完）

( 标准资料来源： 

http://www.moh.gov.cn/zhuz/s9499/wsbz.shtml  

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