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SOP文件 | 志贺菌血清学检测标准操作规程
1 目的
规范志贺菌血清学检测操作规程。
2 原理
用已知志贺菌诊断血清在载玻片上直接与细菌培养或菌悬液混合,若出现肉眼可见的特异性凝集块,表示该菌即为志贺菌。
3 试剂
志贺菌诊断血清,生理盐水。
4 质控
福氏志贺ATCC12022阳性;大肠埃希菌ATCC25922阴性。
5 操作步骤
5.1 首先用志贺菌属4种多价血清作玻片凝集,如凝集再进一步作血清定型(用福氏志贺菌1 ~ 6型、痢疾志贺菌1 ~ 2型、鲍氏志贺菌1 ~ 6型以及宋内志贺菌鉴定到种、型)。一般先用福氏志贺菌血清凝集,因我国以B群最为多见,如出现生化反应符合志贺菌,而与4种多价血清不凝集的菌株,应考虑为K抗原存在,将菌液加热到100℃ 15 ~ 30分钟后再进行凝集。
5.2 与各型志贺菌血清不发生凝集,菌落特征与生化反应似痢疾志贺菌,可考虑非典型性痢疾血清型,应送到专业实验室进行鉴定。
6 结果判断
阴性:试验一侧及对照一侧均匀混浊。阳性:对照一侧均匀混浊,试验一侧明显凝集。自凝:试验一侧及对照一侧凝集。
7 注意事项
志贺菌菌体表面常有一层K抗原,它能阻抑菌体抗原与抗血清的凝集,从而导致假阴性结果。此时应将菌悬液于100℃中煮沸15 ~ 30分钟,以破坏K抗原,然后再作试验。
8 临床意义
主要用于志贺菌属的鉴定。
9 相关文件及记录表格
周庭银编著.临床微生物学诊断与图解.第二版.上海.上海科学技术出版社,2007
叶应妩,王毓三,申子瑜主编.全国临床检验操作规程.第3版.
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