SOP文件 | 脓及伤口标本细菌学检验标准操作规程
1 目的
规范脓及伤口标本细菌学检验标准操作规程，确保检验结果准确可靠。
2 适用范围
脓液培养或涂片检查。
3 标本
3.1 标本类型：脓液。
3.2 标本采集
3.2.1 开放性脓肿和脓性分泌物：用无菌盐水或75％酒精擦去表面渗出物，用拭子深入溃疡深处采集2支拭子，1支为涂片检查用，1支作培养用。
3.2.2 大面积烧伤的创面分泌物：用灭菌棉拭取多部位创面的脓液或分泌物，置灭菌试管内（注明采集部位）送检。
3.2.2 封闭性脓肿：消毒局部皮肤或黏膜表面后，用注射器抽取，将脓液注入多功能培养瓶或无菌试管内送检。疑为厌氧菌感染时，应作床边接种或置厌氧运送培养基内送检。
3.3 标本拒收标准
3.3.1 标本标识与化验申清单不符。
3.3.2 标本不是无菌留取。
3.3.3 送标本的时间在采集标本后超过2小时。
4 试剂、仪器
4.1 革兰染液、氧化酶试剂、3％触酶、血琼脂平板、巧克力平板、麦康凯平板、相关系列化试剂等。
4.2 VITEK鉴定系统；革兰阴性菌鉴定药敏卡、革兰阳性菌鉴定药敏卡、药敏纸片等，有效期及储存条件参见试剂说明书。
4.3 接种针、接种环、电热灼烧器、显微镜、孵育箱、CO2培养箱等。
5 细菌鉴定和药敏质控
参见《质量管理程序》。
6 检验步骤
接收标本后，立即对标本进行编号、登记。
6.1 涂片检查：革兰染色镜检，报告“查见革兰×性菌，形似××菌”或报告“未查见细菌”。
6.2 培养
6.2.1 一般细菌培养：标本接种血琼脂平板和麦康凯琼脂平板（或EMB、中国蓝琼脂平板），35℃培养18 ~ 24小时后，根据菌落特性和形态染色，作出初步判断，再按各类细菌的生物学特性进行鉴定。
6.2.2 厌氧菌培养：取脓液标本接种厌氧血琼脂平板及其他厌氧选择平板，置于厌氧环境培养，根据生长情况及涂片染色结果，按厌氧菌生物学特性进行鉴定。
6.2.3 嗜血杆菌及奈瑟菌培养：接种于巧克力琼脂平板，置5％ ~ 10％ CO2环境中培养。
6.2.4 真菌培养 可用沙氏培养基。
7 操作流程
8 结果报告
查见致病菌，报告菌名和药敏结果。
9 注意事项
9.1 对于某些特殊病人（如气性坏疽病人），在菌种鉴定及药敏试验结果尚未报出之前，根据涂片镜检情况，采取治疗措施。
9.2 厌氧菌培养取得样本后，拭子应立即置于厌氧运送管，尽可能少让样本暴露于空气中。穿刺时最好以针筒直接抽取，避免接触环境中氧气。
10 临床意义
从脓液及创伤标本中能检出的病原微生物种类很多，最常见的由葡萄球菌和链球菌引起的局部化脓性感染，包括有毛囊炎、疖、痈、甲沟炎、扁桃体炎、乳腺炎、中耳炎、外耳道疖肿、外耳道炎、细菌性结膜炎、脓疱疮、外科切口及创伤感染等。化脓性骨髓炎、化脓性关节炎的主要致病菌是金黄色葡萄球菌。慢性骨髓炎和慢性化脓性关节炎病原菌中，除上述细菌外，主要为结核分枝杆菌。脓液标本中可检出铜绿假单胞菌、变形杆菌和类白喉棒状杆菌等，常为继发感染或污染所致。气性坏疽主要致病菌为产气荚膜梭菌，其次为水肿梭菌、败毒梭菌及溶组织梭菌等。坏疽常继发葡萄球菌、链球菌、大肠埃希菌或其他需氧菌感染。器官脓肿和机体深部组织的脓肿多为厌氧菌感染。
11 危急值报告
培养出产气荚膜梭菌及时按传染病报告。
12 相关文件及记录表格
JYK-***-WSW*** 质量管理程序