SOP文件 | 医院感染检测操作规范
1 相关临床知识
医院感染的广义对象包括住院病人、医院职工、就诊病人、探视者和陪护家属，对于就诊病人、探视者和陪护家属其感染难于确定，故医院感染的对象主要是住院病人和医院职工。医院感染监测是医院感染的基础，为医院感染提供科学依据。其监测的对象主要是①对临床各科医院感染发病率进行监测，明确医院感染的重点发病科室；②对医院感染部位的监测以明确各部位的医院感染率；③对各种基础疾病的医院感染率进行监测，明确其与医院感染的关系；④危险因素分析（机体的免疫力、年龄、介入性诊疗操作、抗菌药物的使用，空气、医护人员 的手和物体表面被污染所致的交叉感染，血、血制品、药品污染和医用器材不佳或被污染等）；⑤病原体的分布。在这里主要介绍空气、医护人员的手和物体表面以及医院所用的消毒剂和器械液等样本的采集与运送。
2 标本的采集与运送
2.1 标本的采集（按照部颁标准GB 15982-1995）
2.1.1 空气
标本采集：房间面积≤30m2，设一条对角线上取一点，即中心一点，两端各距墙1m处各取一点；室内面积>30m设东、西、南、北中5点，其中东、西、南、北点距墙1m，将9cm直径普通琼脂平板置于采样点暴露5分钟后送检。层流洁净病房、手术室空气采集，取6点，各点距四周1m并均匀分布于室间，将9cm直径普通琼脂平板置于采样点暴露30分钟后送检。
2.1.2 手
标本采集：用浸有无菌生理盐水棉试子来回涂擦双手两次（每只手面积30cm2），将棉试子剪去手接触部位，放入5ml无菌生理盐水的试管送检。
2.1.3 物表
标本采集：用浸有无菌生理盐水棉试子采取面积100cm2表面，往返涂抹5次，将棉试子剪去手接触部位，放入5ml无菌生理盐水的试管送检。
2.1.4 消毒剂
标本采集：在无菌条件下，用无菌吸管吸取0.5ml样本，加入4.5ml稀释液中混匀送检。对于含氯、碘、过氧化物消毒剂，采用稀释液为0.1%硫代硫酸钠肉汤。对于含醛类，采用稀释液为0.3%甘氨酸肉汤。
2.1.5 灭菌物品
标本采集：在无菌条件下，采取灭菌物品于5ml无菌普通肉汤送检培养。对不能用破坏性方法取样的医疗用品，可用浸有无菌生理盐水棉试子在被检物体面涂抹采样，将棉试子剪去手接触部位放入5ml无菌普通肉汤送检培养。
2.1.6 肾透析机进出口液体：采用无菌操作方法分别取5ml进、出口液体于无菌试管中送检培养。
2.2 标本的运送
2.2.1 应在标本采集前来检验科或医院感染管理科取培养基，如不能马上采集，应将培养基放4℃冰箱保存，但不应超过24h。否则应重新取培养基。
2.2.3标本采集后应在1h内送达检验科或医院感染管理科，检验科或医院感染管理科在收到标本后应马上培养。
3 标本的验收
3.1 标识：标本种类、科室、物表和空气采样的地点、采样手的姓名等。对于标识不清者电话联系并退回重采。
3.2 采样量：要求按标本与培养基按比例或某些标本需定量采集，其比例和量必须准确，否则应重新采集。
4 培养
4.1 空气培养：送检验科微生物室，37℃ 18 ~ 24小时，进行菌落计数。
4.2 手培养：取83μl样本，用L棒均匀涂布于普通琼脂平板，置于37℃ 18 ~ 24小时，进行菌落计数。
4.3 物表养：取50μl样本，用L棒均匀涂布于普通琼脂平板，置于37℃ 18 ~ 24小时，进行菌落计数。
4.4 消毒剂、器械液培养：置于37℃ 18 ~ 24小时，观察有无细菌生长。
4.5 灭菌物品培养：置于37℃ 1 8 ~ 24小时，观察有无细菌生长。
4.6 透析仪进出口液体培养：取进口液100μl，出口液20μl，用L棒均匀涂布于普通琼脂平板，置于37℃ 18 ~ 24小时，进行菌落计数。
5 报告
5.1 空气：
5.1.1 结果：cfu/m3=50000N/A*T=N*157cfu/m3 [N—平均菌落数，A—平板面积（平板直径9cm），T为放置时间（T为5分钟）]。
5.1.2 报告：XXXcfu/m3（Ⅱ类≤200cfu/m3，Ⅲ类≤500cfu/m3）
5.1.3 层流洁净空气结果：cfu/m3=50000N/A*T=N*26cfu/m3[N—平均菌落数，A—平板面积（平板直径9cm），T为放置时间（T为30分钟）]。
5.1.4 报告：XXXcfu/m3（层流洁净空气≤10cfu/m3）
5.2 手
5.2.1 结果：cfu/cm2=Ncfu/cm2（平皿上菌落数）
5.2.2 报告：XXXcfu/cm2（Ⅰ、Ⅱ类≤5cfu/cm2，Ⅲ类≤10cfu/cm2，Ⅳ类≤15cfu/cm2）
5.3物表
5.3.1 结果cfu/cm2=Ncfu/cm2（N—平皿上菌落数）
5.3.2 报告：XXXcfu/cm2（Ⅰ、Ⅱ类≤5cfu/cm2，Ⅲ类≤10cfu/cm2，Ⅳ类≤15cfu/cm2）
5.4 消毒剂、器械液
5.4.1 如无菌生长，消毒剂：报告0cfu/ml；器械保存液报告无生长。如有菌生长通知感染管理科重送采集标本。取0.1ml样本, 用L棒均匀涂布于普通琼脂平板，置于37℃ 18 ~ 24小时，进行菌落计数。
5.4.2 结果报告：cfu/ml=Ncfu/ml（N—平皿上菌落数）（消毒剂≤100cfu/ml，器械保存液无菌）
5.5 灭菌物品
结果报告：如无细菌生长报告无生长；如有菌生长，转BAP并涂片作革兰染色，报告革兰XX细菌生长，必要时作鉴定。
5.6 透析仪进出液体
5.6.1 结果：进口液cfu/ml=N*10cfu/ml；出口液cfu/ml=N*50cfu/ml （N—平皿上菌落数）
5.6.2 报告：进口液XXXcfu/ml，出口液XXXcfu/ml。（进口液≤200cfu/ml，出口液≤2000cfu/ml）
6 相关文件及记录表格
GB 15982-1995