SOP文件 | 肺炎支原体冷凝集试验操作规程及临床意义

目的： 

规范冷凝集试验的操作

范围：

检验科免疫实验室

责任人：

免疫实验室专业组长和实验室工作人员

检测原理：

受肺炎支原体感染的患者，血清中常见含有非特异性冷凝集素（其本质是LgM），能在0~4⁰C与自身红细胞或“O”型人红细胞发生凝集。将人红细胞与待检血清混合，在0~4⁰C中观察凝集现象，借以判断冷凝集素的存在。

操作方法：

静脉取血2ml，置37℃温箱内剥离血块，经离心沉淀分离出血清（注意：血清未分出前，标本不可冷藏。离心沉淀时，套管内应加37℃温水保温）。排列10支小试管于试管架上，每管加入生理盐水0.5ml。再于第1管中加入病人血清0.5ml混匀，吸出0.5ml加入第2管中混匀。如此稀释至第9管，弃去0.5ml。最后一管不加血清作为对照。然后每管加入2%红细胞悬液0.5ml。混匀后，置于4⁰C冰箱2h或过夜，取出观察结果。

注意事项：

1.  血液在分离血清前勿放冰箱，否则，冷凝集素被自身红细胞吸附，导致假阴性。

2．凝集为可逆反应，已凝集的红细胞如放置37⁰C或室温，凝集现象又可消失，因此，从冰箱取出后应立即观察结果。阳性者，须将试管置于37⁰C水箱内30分钟，凝集全部消散者，证明是真正的冷凝集现象；否则为假凝集，应检查原因，并重行试验。

3．红细胞若洗条不充分或浓度不当，或放4⁰C冰箱不足2h，均可影响结果。

4．2%红细胞悬液可用草酸盐或枸橼酸钠抗凝血配制。

5. 正常人血清中可含少量冷凝集素，约有1%的人可达1:32以上。有60%的肺炎支原体肺炎病人，病后第2周血清冷凝集效价可达1:32以上。某些疾病如传染性单核细胞增多症、重症贫血、疟疾、骨髓瘤、肝硬化和肢端动脉痉挛症（即雷诺氏病）亦棵呈阳性反应，但凝集效价不高。

参考范围：

阴 性：血清冷凝集素效价在1：32以内。

临床意义:

主要用于由肺炎支原体引起的原发性非典型性肺炎的辅助诊断。 由肺炎支原体感染引起的原发性非典型性肺炎患者的血清中常含有较高的寒冷红细胞凝集素，简称冷凝集素，它能与患者自身红细胞或“O”型人红细胞于4℃条件下发生凝集，在37℃时又呈可逆性完全散开。75％的支原体肺炎病人，于发病后第二周血清中冷凝集素效价达1：32以上，一次检查凝集效价>1：64或动态检查升高4倍以上时，有诊断意义。某些患冷凝集素综合征的病人，其效价可高达1：1000以上。绝大多数正常人本试验呈阴性反应，但本试验并无特异性，流行性感冒、传染性单核细胞增多症、锥虫病、肝硬化等也可呈阳性反应，但滴度均较低。

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