移液管、移液枪与瓶口移液器，你分得清吗？

移液管、移液枪、瓶口移液器这仨到底有啥不同之处？

移液管的正确使用方法和步骤都是啥？

移液枪的使用步骤有哪些？

移液管、移液枪与瓶口移液器的精度要如何比较呢？

今天，统统告诉你！

移液管的正确使用方法和步骤

1.使用前：

使用移液管，首先要看一下移液管标记、准确度等级、刻度标线位置等。

2.吸液：

用右手的拇指和中指捏住移液管的上端，将管的下口插入欲吸取的溶液中，插入不要太浅或太深，一般为10～20mm处，太浅会产生吸空，把溶液吸到洗耳球内弄脏溶液，太深又会在管外沾附溶液过多。左手拿洗耳球，接在管的上口把溶液慢慢吸入，先吸入该管容量的1/3左右，用右手的食指按住管口，取出，横持，并转动管子使溶液接触到刻度以上部位，以置换内壁的水分，然后将溶液从管的下口放出并弃去，如此用反复洗3次后，即可吸取溶液至刻度以上约5mm，立即用右手的食指按住管口。

3.调节液面：

将移液管向上提升离开液面，用滤纸将沾在移液管外壁的液体擦掉，管的末端靠在盛溶液器皿的内壁上，管身保持垂直，略为放松食指（有时可微微转动吸管）使管内溶液慢慢从下口流出，直至溶液的弯月面底部与标线相切为止，立即用食指压紧管口。将尖端的液滴靠壁去掉，移出移液管，插入承接溶液的器皿中。

4.放出溶液：

承接溶液的器皿如是锥形瓶，应使锥形瓶倾斜30°，移液管保持垂直，管下端紧靠锥形瓶内壁，松开食指，让溶液沿瓶壁慢慢流下，当液面降至排液头后管尖端接触瓶内壁约15秒后，再将移液管移去，残留在管末端的少量溶液，不可用外力强使其流出，因较准时已考虑了末端保留的溶液的体积。

备注：

1.移液管购入后都要进行清洗，清洗后进行校准，校准合格后才能使用；

2.看刻度时，应将移液管的刻度与眼睛平行，以最下面的弯月面为准；

3.标示为“吹”的移液管可将排液头内的残留液体吹出；

4.有些特殊移液管，如进口的AS级移液管一般标示等待时间（一般为5秒）；

该移液管等待时间结束后，将排液头在容器的内壁上向上滑动约10mm以除去残留液体。

移液枪的使用步骤都有哪些？

在进行分析测试方面的研究时，一般采用移液枪（pipette）量取少量或微量的液体。对于移液枪的正确使用方法及其一些细节操作，是很多人都会忽略的，现在分几个方面详细叙述。在调节量程时，如果要从大体积调为小体积，则按照正常的调节方法，逆时针旋转旋钮即可；但如果要从小体积调为大体积时，则可先顺时针旋转刻度旋钮至超过量程的刻度，再回调至设定体积，这样可以保证量取的最高精确度。

在该过程中，千万不要将按钮旋出量程，否则会卡住内部机械装置而损坏了移液枪。移液之前，要保证移液器、枪头和液体处于相同温度。吸取液体时，移液器保持竖直状态，将枪头插入液面下2～3毫米。

移液器的使用步骤

a.吸液：根据需要吸取的试剂量选择不同规格的移液器；调准加样器容量，用右手握住加样器外壳，套上移液器枪头，拇指置于推动按钮上，用拇指按下推动按钮至第一档位，将枪头尖口插入液面以下，缓缓松开拇指，让推动按钮复原。在吸取液体的过程中，特别注意别吸入液泡，并且移液器枪头不能有气泡，以免影响体积的准确性。

b.放液：一手拿称放溶液的容器与台面成45°，将移液器垂直贴容器壁，重新将拇指按下，推动按钮到达第二档位，完成放液。该过程要反复一次，保证液体全部被打出。如发现枪头尖口处仍有液滴残留，应继续按住按钮，将枪头接触受液容器内壁，使液滴顺壁留下。

c.换枪头：微量加样器的枪头（也称吸头）不可混用，吸取不同液体时必须更换。通过活动第一掌指关节和大鱼际，按下卸尖按钮即可退去枪头。

两种移液方法

在吸液之前，可以先吸放几次液体以润湿吸液嘴（尤其是要吸取粘稠或密度与水不同的液体时），这时可以采取两种移液方法：

一是前进移液法：

用大拇指将按钮按下至第一停点，然后慢慢松开按钮回原点（吸取固定体积的液体）。接着将按钮按至第一停点排出液体，稍停片刻继续按按钮至第二停点吹出残余的液体。最后松开按钮。

二是反向移液法：

此法一般用于转移高粘液体、生物活性液体、易起泡液体或极微量的液体，其原理就是先吸入多于设置量程的液体，转移液体的时候不用吹出残余的液体。先按下按钮至第二停点，慢慢松开按钮至原点，吸上之后，斜靠一下容器壁将多余液体沿器壁流回容器。接着将按钮按至第一停点排出设置好量程的液体，继续保持按住按钮位于第一停点（千万别再往下按），取下有残留液体的枪头，弃之吸上之后，斜靠一下容器壁将多余液体沿器壁流回容器。使用完毕，可以将其竖直挂在移液枪架上，但要小心别掉下来。当移液器枪头里有液体时，切勿将移液器水平放置或倒置，以免液体倒流腐蚀活塞弹簧。

当然是在量程范围内越小越精确。超出了量程不但精确度得不到保证，而且容易损坏移液枪。打个比方，同样取25μl，100μl的枪肯定比1000的精确。用20μl的枪取25μl虽然可能会比1000的精确，但是一来不如100的精确，二来时间久了会损坏枪100的枪范围一般是10～100，取25μl是准确的。20μl的范围是2～20，超出的部分无法预计。退一万步说，PCR没必要精确到这个程度，何况还是牺牲枪的寿命。

移液管、移液枪与瓶口移液器的精度比较

1.移液管：

（胖肚的）比较准确，但是移取体积不能随意选择，而且也没有微量体积的移液管；

2.移液枪：

选择的范围比较大，常量到微量的都有，也比较准确，使用很方便，保养和正确使用也很重要；

3.瓶口移液器：

用的是针筒的原理，精度比上两者要差，一般使用是为了方便快速，而且多是移取大量溶剂时用；

吸量管、移液管校正标准操作规程

适用范围：

1mL、2mL、5mL、10mL、15mL、20mL、25mL、50mL、100mL吸量管、移液管的校正；

校正规程：

将待校正的移液管充分洗净，用洗耳球吸取蒸馏水至移液管标线之上2~3厘米处，将移液管提离液面，缓慢放出多余的蒸馏水至液面底部与标线相切为止。除去移液管尖外面的水珠，再将水移入已准确称重（准确至0.01g即可）的50毫升具塞锥形瓶中，使管尖与锥形瓶内壁接触，收集管尖余滴，停放15秒左右取出移液管，记录水温，盖上锥形瓶玻塞，准确称出瓶与水的总重量，并记录两次称重之差，即为待校正移液管放出的水重。用实验温度时1毫升水的重量（查下表）来除水重，即可算出移液管的实际毫升数（即20℃时的真实容积）；

结果处理和周期：

根据上述自校项目的自校数据，查表1，判定其是否符合相应的标准等级。自校周期为三年，校正工作结束，记录于“仪器、设备自校记录”中；

表1：容量允差

标称总容量（mL）	1	2	5	10	15	20	25	50	100
容量允 差（mL）	A	±0.007	±0.010	±0.015	±0.020	±0.025	±0.030	±0.05	±0.08
B	±0.015	±0.020	±0.030	±0.040	±0.050	±0.060	±0.10	±0.16

例：在21℃时，用移液管移取25.00毫升水，其重量为25.00g，查表知道在21℃时每毫升水的重量为0.99700g。由此可算出20℃时其实际容积为

毫升。故此移液管为正误差25.08-25.00=0.08毫升；

表2：不同温度下用水充满20℃时容积为1升的玻璃容器于空气中以黄铜砝码称取的水重。

温度℃	克数g	温度℃	克数g	温度℃	克数g
0	998.24	14	998.04	28	995.44
1	998.32	15	997.93	29	995.18
2	998.39	16	997.80	30	994.91
3	998.44	17	997.65	31	994.64
4	998.48	18	997.51	32	994.34
5	998.50	19	997.34	33	994.06
6	998.51	20	997.18	34	993.75
7	998.50	21	997.00	35	993.45
8	998.48	22	996.80	36	993.12
9	998.44	23	996.60	37	992.80
10	998.39	24	996.38	38	992.46
11	998.32	25	996.17	39	992.12
12	998.23	26	995.93	40	991.77
13	998.14	27	995.69

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