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引物设计？现成的随便拿啦！
啥叫引物？就是你想看看某些样本，或血液或组织里有没有某一种你感兴趣的基因的表达，通畅情况下，你要根据你的目标基因，根据碱基互补配对的原则，设计上下游两条核苷酸序列，遵循什么原则设计，那有很多指标，也有一些常用软件，比如：Premier5和Oligo7。
但我的电脑太老，讨厌又要装啥软件（刚卸载了Visio，哈），也懒得到处找破解版，还要不断调试各种参数，有没有现成的？有啊！推荐这个在线工具：Primer bank（百度下，第一条网址就是了嘻嘻）
这是个免费的PCR引物库，属于哈弗大学，有近20万条现成的引物可供查询和选择，更让人惊喜的是，其有效率接近90％，比我自己设计的还高，不用才傻。
以下以查找EGFR的引物为例：
1、首先，到NCBI上，左边选择Gene，右边输入EGFR。
选择你想要的，如图，第二个是老鼠的，我们选择人的EGFR（homo sapiens），ID是1956，因为不同物种同一个基因的引物是不一样的。
进入primerbank的首页，Search by选择NCBI Gene ID,Species（物种）与之前对应，即人，For text里要和Search by里内容相应，这里就是输入1956.
以上就是结果啦，共有2对引物，看第一个，PCR产物是177，引物长度是21，各种指标都很标准，把这个序列告诉生物合成公司，老板交给的任务搞定，耶。。。