选修三基因工程知识点填空及答案
一、基因工程的基本工具
1.“分子手术刀”：________________。
（1）来源：主要是是从___________生物中分离纯化出来的。限制酶主要在原核生物中，酵母菌中也有。
（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的______________断开，大多数限制酶能识别系列由 个核苷酸组成，例如E·coli、SmaI限制酶，也有少数识别系列由4、5或8个核苷酸组成。因此具有专一性。
（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：__________和__________。
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限制酶；原核；磷酸二酯键；6；粘性末端；平末端
2.“分子缝合针”——______________。
（1）根据酶来源不同可以分为两类：一类是从大肠杆菌中分离得到的，称为E·coli DNA连接酶；另一类是从T4噬菌体中分离出来的，称为__________。
（2）两种酶的相同点是都缝合____________键。不同的是________________________。
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DNA连接酶；T4DNA连接酶;磷酸二酯键;E·coli DNA连接酶只能将双链DNA片段互补的粘性末端之间连接起来，不能链接平末端。T4DNA连接酶既可以缝合双链DNA片段互补的粘性末端，又可以链接平末端。
3.“分子运输车”——载体
（1）最常用的载体是________,它是一种裸露的、结构简单的、独立于________之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。质粒DNA分子上有____________限制酶切割位点，供外源________________________插入其中。质粒上有特殊的标记基因，如四环素抗性基因，氨苄青霉素抗性基因，供__________________________（课本P6）
（2）其他载体：_________________。在进行基因工程操作中，真正被用作载体的质粒，都是在_______________的基础上进行人工改造的。（课本P6）
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（1）质粒；细菌拟核；一个至多个；外源DNA片段（基因）；重组DNA的鉴定和选择
（2）λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等；天然质粒
二、基因工程的基本操作程序
1.基因组文库含有一种生物的_____的基因，cDNA文库含有生物的_____基因。cDNA的合成是以RNA为模板，在逆转录酶作用下合成目的基因DNA(cDNA)。目的基因主要是指_______________________________。
2.基因工程的核心步骤是_______________，其目的_______________。
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1.全部 部分；编码蛋白质的基因
2.基因表达载体的构建；是使目的基因在受体细胞中稳定的存在，同时，使目的基因能够表达和发挥作用
3.一个基因表达载体组成________________________________________：（注意目的基因插在启动子和终止子之间）。启动子位于____，是______识别和结合的部位，驱动基因转录出mRNA。（注意：起始密码子、终止密码子位于mRNA上）。
画出基因表达载体的模式图（参考课本P11）
标记基因的作用是_________________（课本P11）
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启动子+目的基因+终止子+标记基因；基因首端；RNA聚合酶；鉴别和筛选含有目的基因的细胞
4.目的基因导入受体细胞的方法：
（1）导入植物细胞——体细胞，导入双子叶植物的最常用的方法是_________________；还可以用__________________（如转基因抗虫棉的获得），导入单子叶植物的方法是__________________。（课本P12）
（脓杆菌转化法：目的基因要插入到______________________片段上，借助__________________（可转移DNA）的可转移性，转至受体细胞并整合到受体细胞的染色体DNA上，使目的基因_______________________________）
（2）导入动物细胞——选择受精卵为导入细胞，方法_________________（动物体细胞没有全能性，要发育成个体，需要导入受精卵中）；
（3）导入微生物，方法：___________________。一般选择原核生物为受体细胞，原因是：_________________，一般为单细胞生物，遗传物质相对较少。首先用Ca2+处理细胞，使细胞处于_________。
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（1）脓杆菌转化法；花粉管通道法；基因枪法；Ti质粒的T-DNA；T-DNA；遗传特性得以稳定维持和表达
（2）显微注射法
（3）感受态细胞法；繁殖快；感受态
5.目的基因（如抗虫基因）在真核细胞中稳定遗传的关键是_________。检测方法是DNA分子杂交技术，将转基因生物的_________提取出来，在含有____片段上用放射性同位素等作标记，以此作为探针进行杂交，看是否有杂交带。检测目的基因是否转录和翻译的方法分别是__________和__________。
若在个体水平检测一个抗虫或抗病的目的基因导入植物后是否赋予植物抗虫或抗病特性，可以做________________________实验。（参考课本P15）
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目的基因成功插入转基因生物染色体DNA上；基因组DNA；目的基因的DNA；DNA-mRNA分子杂交技术；抗原-抗体杂交；抗虫或抗病的接种
三、基因工程的应用
1.用转基因动物生产药物——乳腺生物反应器或乳房生物反应器
科学家将药用蛋白基因与乳腺蛋白基因的________等调控组件重组在一起，通过显微注射等方法，导入哺乳动物的受精卵中，然后，将受精卵送入母体内，使其生长发育成转基因动物。转基因动物进入泌乳期后，可以通过分泌的乳汁来生产所需的药品，因而称为乳腺生物反应器或乳房生物反应器。
2.基因治疗是把____导入病人体内，使该基因的表达产物发挥功能而达到治疗目的，这是治疗遗传病最有效的手段。（注意：正常基因并没有把病变基因替换）。
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1.启动子2.正常基因
四、蛋白质工程的应用
1.基本途径是：从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→_____________________→找到相对应_________________________
2.概念：通过基因____或基因_____，对现有蛋白质进行____，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活需求。
3.蛋白质工程和基因工程的联系：蛋白质工程是在基因工程的基础上延伸出来的______________，因为对现有蛋白质的改造或制造新的蛋白质，必须通过基因修饰或基因合成实现。
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1.推测应有的氨基酸序列；脱氧核苷酸序列
2.修饰；合成；改造；
3.第二代基因工程