小鼠腹腔注射,我为什么总是打不进或出血?
腹腔注射:将药物注入动物胃肠道浆膜以外、腹膜以内的注射方式。
药物循环途径: 肠系膜上静脉→肝门静脉→肝→肝静脉→下腔静脉→右心房→右心室的吸收进入血液循环;化合物给药后不经胃肠道吸收,故腹腔给药方式不存在胃肠道首过代谢但仍然存在肝脏首过代谢,损耗较灌胃小。
腹腔注射模式图
特点:
吸收能力很强:因腹膜吸收面积大,且布满毛细血管和淋巴管,直接入血,生物利用度与静脉注射100%相比可达80%;
吸收速度快:每小时可吸收动物体重3%-8%的液体,且腹腔补液时间短;
应用广泛:广泛用于大小鼠的各种实验中,如常用的麻醉实验;
对剂型要求较低:只要是液态或均一悬液均可采用腹腔注射。
腹腔注射与静脉注射的对比:
腹腔注射和静脉注射同为常用的给药方式,但是与静脉注射相比,它又有以下优势:
操作简单易上手,而静脉注射较难;
研发成本更低,安全性更高;
更适合长周期研发:静脉注射对血管损伤较大,恢复的更慢;
给药体积相对较大,小鼠:0.2-0.8ml;静脉:小鼠:0.05-0.2ml;
适用动物更广,无论大小鼠年幼,而静脉注射若动物过小,很难找到血管或者不明显。
下面就一起看看腹腔注射的操作手法:
第一步:抓取小鼠
① 右手提起小鼠尾巴,将其放在鼠笼盖或其他粗糙表面上(如下图左);
② 小鼠向前挣扎爬行时,再用左手拇指和食指抓住鼠耳和颈部皮肤(如下图右);
③ 小鼠于左手心中后,用左手的无名指和小指夹其背部皮肤和尾部,腹部向上,头呈低位(如下图)。
第二步:注射
①先刺入皮下:右手持注射器,左手抓紧背部皮肤使腹部皮肤紧绷,在小鼠于两大腿根连线与腹中线交叉点一侧约0.3-0.5cm位置(偏左/偏右)刺入皮下;如下图2个红点位置。
②进入腹膜:针头到达皮下后, 沿皮下向前推进2-3cm,然后注射器针头与皮肤呈45°角刺入腹膜,慢慢感觉到抵抗力消失,即可快速注射液体;
第三步:拔针
注射完毕后,轻轻将针头旋转一定角度,缓慢拔出针头,防止液体外漏。
下面是我们为大家准备的小鼠腹腔注射的视频,欢迎观看:
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常见问题解答
小鼠腹腔注射最需要注意的关键点是什么?
首先必须固定好小鼠,防止小鼠扭头过来咬到你;然后注射时注意头呈低位,使内脏向胸部偏移,以防止刺伤肠道、膀胱或其它内脏器官;注射时要快且准。
注射时抵抗力如何把握?
因为小鼠皮具有韧性,刚开始刺时会有一种明显的抵抗力,但是后来突然会有一种抵抗力消失的感觉,且针头移动感觉里面空空的,说明针头已刺入腹腔内,此时就可以开始进药。
为什么小鼠腹腔注射时,液体流出?
一般若只有液体流出则考虑注射到小鼠皮下,并未进入腹腔。最常见的针头刚插入皮肤就向上挑起,此时针头很可能还没刺破腹腔壁,只是将液体注射在腹部皮下。
为什么小鼠腹腔注射时,出血?
注射时未掌握好角度且力度过猛,刺到内脏,导致小鼠内脏器官出血。注射时最好将小鼠呈头低位,另外可以在注射到腹膜后,将针挑起,可减少内脏出血的概率。
注射的药剂要求?
腹腔注射宜用等渗药液(如5%葡萄糖液、0.9%生理盐水),高渗盐水、糖水(如10%氯化钠液,50%、10%葡萄糖液)不能作腹腔注射,因为它们会引起反渗透,使组织脱水和腹水增加;
不宜刺激性药液,如氯化钙、磺胺、抗菌素易引起腹膜炎和组织坏死;
剂型要求:油乳剂、有沉淀的药物、半固体药剂等药物不易吸收,不宜作腹腔注射。
腹腔注射相对比较简单,个人觉得大家最需要掌握的点在于:切不可刺入到内脏,内脏出血一方面影响你的实验数据准确性,另外长期内脏出血会导致小鼠内脏溃烂,体重减轻甚至死亡等现象。所以在正式实验前,你可以用生理盐水等无刺激试剂进行练习,掌握好注射分寸,最后祝大家实验顺利。有任何问题欢迎留言。
参考文献
1. 中国药品生物制品鉴定所. 中国药品检验总所. 中国药品检验标准操作规范. 北京,中国医药科技出版社, 2010: 304-306.
2. 俞玉忠, 穆斌. 浅谈小鼠腹腔注射的方法与技巧. 中国实用医药2011 年8 月第6 卷第22 期 China Prac Med,Aug 2011,Vol. 6,No. 22
肿瘤动物模型相关实验
5. 小鼠腹腔注射
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